Page 34 - 《中国药房》2025年18期

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度≥0.8时，表示共有峰与药效学指标存在较强关联 ）。 表5 各炎症指标抑制率的VIP值及标准化回归系数
结果（表 4）显示，14 个共有峰与 NO、TNF-α、IL-6、 NO抑制率 IL-1β抑制率 IL-6抑制率 TNF-α抑制率
峰号
IL-1β 的抑制率均存在关联。其中，共有峰 10、9、1 与 VIP值 标准化回归系数 VIP值 标准化回归系数 VIP值 标准化回归系数 VIP值 标准化回归系数
1 1.340 1.209 1.380 0.217 1.077 0.147 1.025 －1.728
NO 抑制率，共有峰 3、1、10、9 与 IL-1β 抑制率，共有峰
2 1.224 －1.042 0.676 0.737 0.826 0.813 1.366 －0.313
10、12、5、14 与 IL-6 抑制率，以及共有峰 10、9、5、12 与 3 1.123 －0.578 1.588 0.095 1.054 －0.571 1.007 1.215
TNF-α抑制率的关联性较强。 4 0.601 1.025 0.927 －0.039 1.016 －0.180 1.115 －0.944
5 1.038 1.161 1.228 －0.138 1.416 0.723 1.310 －2.015
表4 上山虎药材化学成分与药效学指标的灰色关联度
6 0.695 －1.553 0.924 0.096 0.918 0.291 0.936 1.380
分析结果 7 0.880 －1.726 0.947 0.578 0.924 0.215 0.965 1.263
NO抑制率 IL-1β抑制率 IL-6抑制率 TNF-α抑制率 8 0.942 1.935 1.218 －1.327 1.195 －0.950 1.044 －0.073
关联序号
关联度 峰号 关联度 峰号 关联度 峰号 关联度 峰号 9 0.939 1.012 0.852 －0.393 1.211 －1.013 0.906 0.283
1 0.83 10 0.86 3 0.83 10 0.87 10 10 0.972 0.405 0.942 －0.485 0.834 0.118 0.871 －0.193
2 0.82 9 0.85 1 0.82 12 0.82 9 11 1.285 1.081 0.778 －0.939 0.752 －0.555 0.874 0.148
3 0.80 1 0.83 10 0.82 5 0.80 5 12 0.831 －0.198 0.617 －0.051 0.994 0.546 0.805 －0.334
4 0.79 3 0.82 9 0.81 14 0.80 12 13 0.872 1.391 0.690 －0.822 0.750 －0.758 0.784 －0.078
5 0.78 6 0.77 6 0.79 8 0.79 1 14 0.966 0.618 0.664 0.478 0.780 0.367 0.779 －1.509
6 0.77 12 0.76 12 0.79 9 0.78 14 3 讨论
7 0.77 14 0.75 14 0.78 13 0.78 6
8 0.74 4 0.75 5 0.78 11 0.78 4 本研究通过 UHPLC-Q-Orbitrap-MS 技术从上山虎
9 0.74 13 0.74 4 0.76 3 0.78 3 药材（编号S6）中鉴定出了60个化学成分；采用HPLC法
10 0.73 5 0.73 13 0.76 7 0.78 7 建立了10批上山虎药材的指纹图谱，并从共有峰中指认
11 0.70 2 0.70 8 0.76 1 0.77 13
12 0.70 7 0.70 7 0.76 6 0.76 8 了3个成分（由于实验条件限制，本研究并未结合对照品
13 0.69 11 0.69 11 0.76 4 0.76 11 指认更多的化学成分）。在初步鉴定出的60个化学成分
14 0.69 8 0.68 2 0.74 2 0.74 2 中，酚酸类（绿原酸、丁香酸等）和黄酮苷类（异槲皮苷、
2.5.2 偏最小二乘法回归分析 芦丁等）能够通过抑制促分裂原活化的蛋白激酶/核因子
以 10 批上山虎药材各共有峰峰面积的无纲量化值 κB 通路、清除自由基来阻止促炎性细胞因子（TNF-α、
为自变量，以上山虎对细胞各炎症指标抑制率的无纲量 IL-6）产 生 ；特 征 性 脂 肪 酸 衍 生 物（13S-hydroxy-9Z，
化值为因变量，采用 SIMCA 14.1 软件进行偏最小二乘 11E，15Z-octadecatrienoic acid、12，13-dihydroxy-9Z-
法回归模型拟合，得到各共有峰与炎症指标抑制率的变 octadecenoic acid）可转化为消退素，从而激活炎症消退
量重要性投影（variable importance in projection，VIP）值 程序并抑制白细胞浸润；香豆素类（东莨菪内酯等）也具
和标准化回归系数。 有良好的抗炎作用 [20―21] 。这提示瑶药上山虎含有多个
结果（表5）显示，对于NO抑制率，峰1、11、2、3、5的 抗炎活性成分，为其后续抗炎作用机制的研究提供了新
VIP值均大于1。峰1、4、5、8～11、13、14与NO抑制率的 思路。
标准化回归系数均大于 0，提示对应成分含量与 NO 抑 在建立广西不同产地上山虎药材 HPLC 指纹图谱
制率呈正相关；其余共有峰与 NO 抑制率的标准化回归 前，本课题组对流动相（水-甲醇、水-乙腈、0.1% 甲酸溶
系数均小于 0，提示对应成分含量与 NO 抑制率呈负相 液-甲醇、0.1% 磷酸溶液-甲醇、0.2% 磷酸溶液-甲醇、
关。对于 IL-1β 抑制率，峰 3、1、5、8 的 VIP 值均大于 1。 0.3% 磷酸溶液-甲醇）、检测波长（214 nm、286 nm、296
®
峰1～3、6、7、14与IL-1β抑制率的标准化回归系数均大 nm全波长扫描和310 nm单波长检测）、色谱柱[Gemini
于 0，提示对应成分含量与 IL-1β 抑制率呈正相关；其余 C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）、Athena C18 （250 mm×4.6
共有峰与IL-1β抑制率的标准化回归系数均小于0，提示 mm，5 μm）、Agilent 5 TC-C18 （2）（250 mm×4.6 mm，5
对应成分含量与IL-1β抑制率呈负相关。对于IL-6抑制 μm）]、流速（0.6、0.9、1.2 mL/min）、柱温（25、30、35 ℃）进
率，峰 5、9、8、1、3、4 的 VIP 值均大于 1。峰 1、2、5～7、 行了考察，最终确定了“2.3.3”项下色谱条件。在该条件
10、12、14 与 IL-6 抑制率的标准化回归系数均大于 0，提 下，所得10批上山虎样品指纹图谱与对照指纹图谱的相
示对应成分含量与IL-6抑制率呈正相关；其余共有峰与 似度为 0.883～0.991，提示广西不同产地上山虎药材的
IL-6 抑制率的标准化回归系数均小于 0，提示对应成分 成分相似。
含量与IL-6抑制率呈负相关。对于TNF-α抑制率，峰2、 广西地区多为炎热潮湿气候，虽有利于特色药用植
5、4、8、1、3的VIP值均大于1。峰3、6、7、9、11与TNF-α 物的生长，但也与当地人群类风湿关节炎等慢性炎症性
抑制率的标准化回归系数均大于 0，提示对应成分含量 疾病的高发生率有关 。当地少数民族积累了丰富的
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与TNF-α抑制率呈正相关；其余共有峰与TNF-α抑制率 治疗经验，并发现了诸多可缓解炎症的天然药物，为民
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的标准化回归系数均小于0，提示对应成分含量与TNF- 族 药 的 进 一 步 开 发 利 用 提 供 了 可 能 。 本 研 究 以
α抑制率呈负相关。 RAW264.7 巨噬细胞为对象，使用 LPS 诱导建立炎症细

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