Page 31 - 《中国药房》2025年18期

established HPLC fingerprints for 10 batches of P. pauciflorum. Each batch of medicinal herbs demonstrates certain anti-
inflammatory activities， among which neochlorogenic acid， syringaldehyde， and the components corresponding to peaks 1， 3， 9，
12 and 14 are likely to be the active anti-inflammatory components.
KEYWORDS Yao ethnic medicine； Pittosporum pauciflorum； chemical components； fingerprint； anti-inflammatory effect；
spectrum-effect relationship； different producing areas in Guangxi Province

瑶药上山虎，源自海桐科植物少花海桐Pittosporum α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）酶联免疫吸附测定
pauciflorum Hook. & Arn. 的干燥茎枝 ，属于药效迅猛 （ELISA）试剂盒（批号分别为 JQ-00039A、JQ-00162A、
[1]
的“虎类药”，具有抗炎、镇痛、抑菌、抗肿瘤等药理作用， JQ-00131A）均购自上海酶联生物科技有限公司；LPS
常用于祛风除湿、活血化瘀和消肿止痛等 。然而，目前 （批号 3230506004）购自北京索莱宝科技有限公司；
[2]
针对其化学成分和药理作用的系统研究有限，仅涉及 DMEM 不完全高糖培养液（批号 20240913）购自江苏凯
[3]
[1]
[4]
DNA 条形码 、药材鉴别 、挥发油化学成分 以及镇痛 基生物技术股份有限公司；甲醇、磷酸、甲酸均为色谱
[5]
作用领域 ，一定程度上制约了该民族药临床应用价值 纯，其余试剂均为分析纯或实验室常用规格，水为超
的深度挖掘及科学评价。近年来，探讨中药民族药化学 纯水。
成分群与药效活性之间的关联规律逐渐成为学界的研 10 批广西不同产地上山虎药材经广西中医药大学
究热点之一，通过关联指纹图谱与药效学数据，揭示多 壮医药学院韦松基教授鉴定为海桐科植物少花海桐
成分协同作用机制已成为中药现代化研究的重要方 P. pauciflorum Hook. & Arn. 的 干 燥 茎 枝 ，具 体 信 息
[6]
向 。本研究以瑶药上山虎为对象，采用超高效液相色 见表1。
谱-四极杆-静电场轨道阱质谱（UHPLC-Q-Orbitrap-MS） 表1 10批上山虎药材的产地及采集时间
技术分析其化学成分，结合高效液相色谱（HPLC）法构 编号 产地 采集时间 编号 产地 采集时间
建广西不同产地上山虎药材的指纹图谱，通过脂多糖 S1 桂林市资源县两水乡 2024-01-18 S6 桂林市恭城县平安乡 2022-07-21
S2 桂林市永福县 2024-04-24 S7 来宾市金秀县金秀镇六巷 2023-08-03
（lipopolysaccharide，LPS）诱导的 RAW264.7 巨噬细胞评
S3 梧州市藤县狮山森林公园 2023-11-24 S8 来宾市金秀县和平村河口石崖边 2023-08-01
价各批上山虎药材的体外抗炎活性，借助灰色关联度分 S4 来宾市金秀县三角乡 2023-08-02 S9 百色市田林县百乐乡 2022-05-10
析和偏最小二乘法回归分析评价指纹图谱和抗炎药效 S5 桂林市恭城县三江乡 2024-01-12 S10 玉林市江南区 2023-07-17
[7]
之间的关系 ，以期为阐明瑶药上山虎抗炎作用的物质 1.3 细胞
基础、筛选质量标志物及后续新药研发提供试验依据。 小鼠巨噬细胞RAW264.7由广西中医药大学广西壮
1 材料 瑶药重点实验室提供。
1.1 主要仪器 2 方法与结果
TM
本研究所用主要仪器包括 Dionex UltiMate 3000 2.1 上山虎药材冻干粉末的制备
TM
型 UHPLC 仪、Q Exactive 组合型四极杆-Orbitrap 质谱 取上山虎药材，粉碎，过三号筛，称取粗粉 50 g，置
®
仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、Direct-Q 5UV 于煎药袋内，加入12倍量水，煎煮40 min×2次，过滤，合
型超纯水仪（美国Millipore公司）、SQP型十万分之一分 并 2 次滤液，于 60 ℃下减压浓缩，得质量浓度为 2 g/mL
析天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]、Agilent （以生药量计）的药液；冷却后，加入无水乙醇，使乙醇含
1260 型 HPLC 仪（美国 Agilent 公司）、Epoch2 型全波长 量达到 60%，静置后，吸取上清液，回收乙醇至无醇味，
酶标仪（美国 Bio-Tek 公司）、CKX53 型倒置生物显微镜 得稠膏，经冷冻干燥后研磨成粉末（得率为16.44%）。
（日本 Olympus 公司）、C170 型 CO2培养箱（德国 Binder 2.2 化学成分分析
公司）等。 采用UHPLC-Q-Orbitrap-MS技术分析。
1.2 主要药品与试剂 2.2.1 样品溶液制备
新绿原酸对照品（纯度≥98%，批号Yz080722）购自 取“2.1”项下上山虎药材（编号 S6）冻干粉末适量，
南京源植生物科技有限公司；绿原酸对照品（纯度 加入 70% 甲醇 1 mL，涡旋 30 s，超声（功率 100 W，频率
98.40%，批号 MUST-21070910）购自曼斯特（成都）生物 40 kHz）20 min 使溶解，再于 4 ℃下以 12 000 r/min 离心
科 技 有 限 公 司 ；丁 香 醛 对 照 品（纯 度 ≥98%，批 号 10 min，取上清液，经 0.22 µm 针头式无菌膜过滤，即得
R09J6Y1）购自上海源叶生物科技有限公司；CCK-8试剂 样品溶液，备测。
盒（批号20240228）购自苏州新赛美生物科技有限公司； 2.2.2 检测条件
®
一 氧 化 氮（nitric oxide，NO）测 定 试 剂 盒（ 批 号 以 ACQUITY UPLC BEH C18 （50 mm×2.1 mm，1.7
112223240711）购自上海碧云天生物技术有限公司；白 μm）为色谱柱；以0.1%甲酸溶液（A）-甲醇（B）为流动相
细胞介素1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子 进 行 梯 度 洗 脱（0～5 min，5%B→20%B；5～18 min，

中国药房 2025年第36卷第18期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 18 · 2245 ·