Page 27 - 《中国药房》2025年18期
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3.1.2 PP9对HepG2细胞克隆形成能力的影响
                                                                        Fas                           45 kDa
              与对照组比较,PP9 2、4 μmol/L组细胞的克隆数及
          克隆形成率均显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。结果见                              FasL                           31 kDa
          图2、表1。
                                                                 cleaved caspase-8                    45 kDa

                                                                 cleaved caspase-3                    17 kDa

                                                                      β-actin                         43 kDa

                                                                              Ⅰ        Ⅱ        Ⅲ
                                                                Ⅰ:对照组;Ⅱ:PP9 2 μmol/L组;Ⅲ:PP9 4 μmol/L组。
              A.对照组         B. PP9 2 μmol/L组  C. PP9 4 μmol/L组  图4 PP9 对 HepG2 细胞中 Fas/FasL 信号通路相关蛋
         图2 PP9 对 HepG2 细胞克隆形成影响的观察图(圆形
                                                                  白表达影响的电泳图
               视野直径:35 mm)
                                                             表2 PP9 对 HepG2 细胞中 Fas/FasL 信号通路相关蛋
         表1 PP9 对 HepG2 细胞克隆数、克隆形成率和凋亡率
                                                                  白表达的影响(x±s,n=3)
               的影响(x±s,n=3)
                                                              组别       Fas/β-actin  FasL/β-actin  cleaved caspase-8/β-actin  cleaved caspase-3/β-actin
          组别           克隆数/个       克隆形成率/%       凋亡率/%        对照组      0.15±0.04  0.35±0.14  0.42±0.09  0.15±0.04
          对照组         146.00±20.22  29.20±4.04  2.96±1.62     PP9 2 μmol/L组  0.38±0.05 a  0.75±0.11 a  0.74±0.14 a  0.50±0.16 a
          PP9 2 μmol/L组  83.67±24.66 a  16.73±4.93 a  22.68±5.72 a
                                                              PP9 4 μmol/L组  0.56±0.13 b  0.89±0.13 b  0.87±0.12 b  0.79±0.15 b
          PP9 4 μmol/L组  34.01±25.16 b  6.80±5.03 b  35.54±10.30 b
                                                                a:与对照组比较,P<0.05;b:与对照组比较,P<0.01。
             a:与对照组比较,P<0.05;b:与对照组比较,P<0.01。
                                                            (P<0.01),KR-33493 组上述蛋白表达的差异均无统计
          3.1.3 PP9对HepG2细胞凋亡的影响
                                                             学意义(P>0.05);与PP9组比较,PP9+KR-33493组细胞
              与对照组比较,PP9 2、4 μmol/L组细胞的凋亡率均
                                                             中上述蛋白的表达均显著下调(P<0.01)。结果见图
          显著升高(P<0.05或P<0.01)。结果见图3、表1。
                                                             5、表3。
            1×10 6                   1×10 6
            1×10 5                   1×10 5
                                                                        Fas                           45 kDa
            1×10 4                   1×10 4
           PI                       PI
            1×10 3                   1×10 3                            FasL                           31 kDa
            1×10 2                   1×10 2
                                                                 cleaved caspase-8                    45 kDa
            1×10 1                   1×10 1
               1×10   1  1×10   3  1×10 5  1×10   1  1×10   3  1×10 5
                  Annexin Ⅴ-FITC           Annexin Ⅴ-FITC        cleaved caspase-3                    17 kDa
                    A.对照组                 B. PP9 2 μmol/L组
                        1×10 6
                                                                      β-actin                         43 kDa
                        1×10 5
                                                                            Ⅰ       Ⅱ      Ⅲ      Ⅳ
                        1×10 4
                        PI                                      Ⅰ:对照组;Ⅱ:PP9组;Ⅲ:KR-33493组;Ⅳ:PP9+KR-33493组。
                        1×10 3
                                                             图5 加入Fas抑制剂后PP9对HepG2细胞中Fas/FasL
                        1×10 2
                                                                  信号通路相关蛋白表达影响的电泳图
                        1×10 1
                           1×10   1  1×10   3  1×10 5        表3 加入Fas抑制剂后PP9对HepG2细胞中Fas/FasL
                               Annexin Ⅴ-FITC                     信号通路相关蛋白表达的影响(x±s,n=3)
                              C. PP9 4 μmol/L组
             图3 PP9对HepG2细胞凋亡影响的流式细胞图                         组别          Fas/β-actin  FasL/β-actin  cleaved caspase-8/  cleaved caspase-3/
                                                                                              β-actin  β-actin
          3.1.4 PP9对HepG2细胞中Fas/FasL信号通路相关蛋白                  对照组         0.51±0.08  0.46±0.08  0.44±0.07  0.22±0.04
                                                              PP9组        1.14±0.07 a  1.06±0.06 a  0.82±0.09 a  1.02±0.07 a
          表达的影响
                                                              KR-33493组   0.52±0.08  0.47±0.07  0.43±0.08  0.26±0.07
              与 对 照 组 比 较 ,PP9  2、4  μmol/L 组 细 胞 中 Fas、      PP9+KR-33493组  0.60±0.07 b  0.58±0.05 b  0.48±0.09 b  0.31±0.04 b
          FasL、cleaved caspase-8、cleaved caspase-3 蛋白的表达均       a:与对照组比较,P<0.01;b:与PP9组比较,P<0.01。
          显著上调(P<0.05或P<0.01)。结果见图4、表2。                      3.2 动物实验结果
          3.1.5 Fas抑制剂干预对PP9抗肿瘤活性的影响                         3.2.1 PP9对裸鼠体内移植瘤生长的影响
              与对照组比较,PP9 组细胞中 Fas、FasL、cleaved                   与对照组比较,5-Fu 组、PP9 组裸鼠的瘤体体积(第
          caspase-8、cleaved  caspase-3 蛋 白 的 表 达 均 显 著 上 调   27 天)、瘤体质量均显著降低(P<0.01),其抑瘤率分别


          中国药房  2025年第36卷第18期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 18    · 2241 ·
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