Page 80 - 《中国药房》2025年16期

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对照组 顺利穿过黏液层的网状结构到达小肠上皮细胞并被该
瘤体体积/mm 2 600 DOX-LPNs组 a a 0.5 a 对照组 细胞摄取奠定了基础。
DOX原料药组
RGD@DOX-LPNs组
DOX原料药组
0.4
DSC、XRD 结果显示，经纳米粒包裹后，DOX 从晶
DOX-LPNs组
400
RGD@DOX-LPNs组
200 a 瘤重/g 0.3 a 体形态转变为无定型或分子状态，这种相变可显著改善
0.2
a
[14]
0.1 药物的溶解特性 。体外释放结果显示，与DOX原料药
0 2 4 6 8 10 12 14
时间/d 0 0.5 h释放超过95%相比，RGD@DOX-LPNs实现了48 h
A.瘤体体积 B.瘤重
a：与对照组比较，P＜0.01。 内的缓释，这种释放行为可能源于PLGA壳层的扩散屏
[14]
图7 瘤体体积及瘤重检测结果（x±s，n＝5） 障作用和药物分子与磷脂层的疏水相互作用 。此外，
稳定性考察结果显示，RGD@DOX-LPNs 在 4、25 ℃下
2.9.4 细胞凋亡检测
放置 7 d 的外观、粒径、包封率均无明显变化，提示该制
采用 TUNEL 染色法检测。取各组小鼠的肿瘤组
剂具有良好的稳定性。笔者分析认为，纳米粒的稳定性
织，置于 10% 中性福尔马林中固定后进行常规石蜡包
与其自身组成、结构密切相关，其中 PEG2000-PLGA 嵌
埋、切片，参照 TUNEL 细胞凋亡试剂盒方法处理后封
段可能发挥了重要作用：PEG2000 具有良好的亲水性，
片，使用显微镜观察各组肿瘤细胞的凋亡情况（凋亡细
可在纳米粒表面形成水化层，并可通过空间位阻效应有
胞呈棕色）并计算凋亡率（凋亡细胞数与细胞总数的百
[15]
效阻止纳米粒之间的聚集，从而维持了粒径的稳定 ；
分比）。结果（图8）显示，对照组小鼠的肿瘤细胞凋亡率
为（2.65±0.12）% ；DOX 原 料 药 组 、DOX-LPNs 组 、 PLGA 作为纳米粒的核心结构，可增强其整体结构的稳
RGD@DOX-LPNs 组小鼠的肿瘤细胞凋亡率分别为 固性，减少因外力或环境变化所导致的纳米粒结构受
[16]
（21.36±3.67）%、（36.19±2.34）%、（49.54±3.58）%，且 损 ，为药物耐受胃肠道环境提供了良好保障。
RGD@DOX-LPNs 组 ＞DOX-LPNs 组 ＞DOX 原 料 药 RGD是一类由多种氨基酸组成的小分子多肽，常作
组＞对照组（P＜0.01）。这表明DOX原料药及相关制剂 为整合素 αvβ3 的特异性配体，能够介导细胞对多种载
[5]
均能诱导乳腺癌细胞凋亡；经RGD修饰后，DOX的抗肿 体的内吞作用，比传统黏附型载体具有更明显的优势 。
瘤效果明显增强。 基于此，本研究选择其作为渗透性纳米粒的辅助载体。
硅胶管旋转实验结果显示，RGD@COU-LPNs中COU在
黏液中的滞留量较COU-LPNs多，这种效应可能是因为
RGD 中的精氨酰基团可通过静电吸附与黏蛋白 2 的硫
[17]
酸化糖基结合，从而增强制剂与黏液间的相互作用 。
离体组织器官荧光成像进一步证实，经RGD修饰后，制
剂在小肠中的滞留时间可超过24 h，在胃中的滞留也较
未经 RGD 修饰的制剂明显，这种“黏液锚定”效应显著
A.对照组 B. DOX原料药组
延长了载药纳米粒在胃肠道中的滞留时间，结合制剂的
缓释效果，可进一步延长药物的吸收窗口期。值得注意
的是，黏液滞留的实现并不完全依赖于药物的荷电特性
或特定受体，而是通过分子间作用力来提升 RGD 修饰
制剂与靶细胞接触的概率，间接促进整合素介导的内吞
过程；上述黏液滞留机制与整合素介导的内吞作用相互
C. DOX-LPNs组 D. RGD@DOX-LPNs组 协同，最终增强了小肠上皮细胞对载药纳米粒中药物的
图8 各组小鼠肿瘤细胞凋亡的显微图（标尺：250 μm） 摄取 。本研究的细胞摄取实验也得到了相似的结果，
[18]
3 讨论 即细胞对经RGD修饰制剂中药物的摄取明显多于未经
乳腺癌是女性高发恶性肿瘤，其治疗面临化疗药物 RGD修饰的制剂。
[11]
生物利用度低、心脏毒性大及靶向性差等关键挑战 。 在 4T1 荷瘤小鼠模型中，RGD@DOX-LPNs 表现出
本研究采用纳米沉淀法制备RGD@DOX-LPNs，其粒径 了明显的抗肿瘤活性，即该制剂可使荷瘤小鼠瘤体缩
为（159.67±8.02）nm，符合口服纳米制剂的粒径要求 小、瘤重下降，并可诱导乳腺癌细胞凋亡；此外，该制剂
（100～200 nm） ；该制剂的 PDI 为 0.15±0.06（＜0.3）， 的 IRT 达 65.74%，高于 DOX 原料药（30.53%）和 DOX-
[12]
粒径分布均匀，与 TEM 观察到的微观特征相符；此外， LPNs（43.19%）。笔者认为这种增强效应可能归因于：
[19]
该制剂的Zeta电位为（－19.70±0.79）mV，荷负电，与文 （1）纳米粒可保护药物免受胃酸降解 ；（2）PEG2000 修
[13]
[20]
献报道的肠道屏障表面电荷特征一致 ，可避免药物滞 饰可延长黏液滞留时间 ；（3）RGD 的主动靶向性效应
[21]
留于肠道屏障表面。上述物理化学特性为后续纳米粒 可提高药物在肿瘤部位的浓度 ；（4）RGD 能特异性识
· 2022 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 16 中国药房 2025年第36卷第16期