Page 76 - 《中国药房》2025年16期
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in  the  first  segmental  mucus  layer  of  COU-LPNs  was  significantly  lower  than  that  in  the  corresponding  segment  of  RGD@COU-
          LPNs，  whereas  it  was  significantly  higher  in  the  2nd  to  5th  segmental  mucus  layers  compared  to  RGD@COU-LPNs （P＜0.01）.
          Cellular  uptake  of  RGD@COU-LPNs  was  significantly  higher  than  that  of  COU-LPNs（P＜0.05）.  The  isolated  tissue  fluorescence
          intensity  of  RGD@IR780-LPNs  was  stronger  than  that  of  IR780-LPNs，  indicating  better  small  intestinal  retention.  Compared  with
          free  DOX  and  unmodified  nanoparticles （DOX-LPNs），  RGD@DOX-LPNs  exhibited  a  higher  tumor  inhibition  rate  of  65.74%，
          significantly  reduced  tumor  volume  and  weight，  and  increased  apoptosis  rate（P＜0.01）.  CONCLUSIONS  RGD@DOX-LPNs  are
          successfully prepared with sustained release properties， which can improve gastrointestinal mucus retention， enhance cellular uptake
          of DOX， and have potent antitumor activity against breast cancer.
          KEYWORDS     doxorubicin； RGD； lipid-polymer hybrid nanoparticles； anti-tumor effect



              乳腺癌是女性最高发的恶性肿瘤 ，其临床治疗以                          1′-二正丙基-3，3，3′，3′-四甲基-10，12-三亚甲基吲哚三
                                           [1]
          手术治疗、放疗和化疗等为主。多柔比星（doxorubicin，                     碳花青碘盐（IR780，批号P2561884）、香豆素6（coumarin
          DOX）是一种蒽环类药物，以细胞核为最终靶点，具有很                          6，COU）对照品（批号 P2682904，纯度＞98.0%）、磷酸盐
          强的抗肿瘤活性。目前，DOX已被制备成脂质体等多种                           缓冲液（PBS，批号P2946743）均购自烟台希杰优生物科
          递药系统，以解决其心肾毒性强、生物利用度低等问                             技有限公司；聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly（lactic-co-
          题 [2―3] ，但靶向性仍有待提高。细胞黏附肽能够介导多                       glycolic  acid），PLGA；乳 酸 与 羟 基 乙 酸 的 质 量 比 为
          种载体的内吞作用，刺激性低，且在一定浓度范围内对                            50∶50，批号 20240826]购自大连美仑生物科技有限公
          宿主细胞无毒害作用，是一种应用广泛的新型药物递送                            司；大豆卵磷脂（批号 790648-1）购自德国 Lipoid 公司；
          材料  [4―5] 。基于此，本研究选择细胞黏附肽精氨酰-甘氨                     TUNEL细胞凋亡试剂盒（批号2403210001）购自北京索
          酰-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp，RGD）修饰的脂质聚合物纳                    莱宝科技有限公司；RPMI-1640 培养基（批号 6124357）
          米粒（lipid-polymer hybrid nanoparticles，LPNs）为载体，     购自美国Gibco公司；胎牛血清（批号SA240119）购自武
          制备载 DOX 的“核-壳”型纳米粒（简称“RGD@DOX-                      汉普诺赛生命科技有限公司；小肠黏液取自新鲜宰杀猪
          LPNs”），通过提高药物在胃肠道黏液中的滞留性来改善                         的小肠（空肠）；乙腈等试剂均为分析纯或实验室常用规
          其靶向吸收性能；同时，通过构建 4T1 乳腺癌荷瘤小鼠                         格，水为超纯水。
          模型，初步评价该制剂的抗肿瘤作用，以期为DOX相关                           1.3 细胞与动物
          制剂的研发及临床应用提供参考。                                         人结肠腺癌细胞 Caco-2（编号 SCSP-5027）和小鼠
          1 材料                                                4T1乳腺癌细胞（编号SCSP-5056）均购自中国科学院细
          1.1 主要仪器                                            胞库。SPF级雄性ICR小鼠，4周龄，体重18～22 g，购自
              本研究所用主要仪器包括8453型紫外-可见分光光                        济南朋悦实验动物科技有限公司，生产许可证号为
          度计（美国 Agilent 公司）、Nano ZS 90 型激光粒度仪（英               SCXK（鲁）2022 0006。所有动物均饲养于滨州医学院
          国Malvern Panalytical公司）、JEM-1230型透射电子显微             实验动物中心（温度22～25 ℃，相对湿度50%～70%，每
          镜（transmission electron microscope，TEM）（日本 JEOL     12 h光暗交替）内，自由摄食、饮水。本研究方案经滨州
          公司）、RC12AD型体外溶出仪（天津天大天发科技有限                         医学院动物伦理委员会批准（编号为动研批第 2023-
          公司）、DSC3 型差示扫描量热仪（differential scanning             402号）。
          calorimeter，DSC）（瑞士 Mettler Toledo 公司）、Ultima Ⅳ     2 方法与结果
          型 X 射 线 衍 射 仪（X-ray  diffractometer，XRD）（日 本        2.1 制剂制备
                                 TM
                                                                                    [6]
          Rigaku公司）、Forma Series  Ⅱ Water Jacket型CO2细胞            采用纳米沉淀法制备 ：取磷脂 25 mg（大豆卵磷脂
          培养箱（美国Thermo Fisher Scientific公司）、TCS SP8型          15 mg+RGD-DSPE-PEG2000 10 mg），用无水乙醇 0.25
          激光共聚焦显微镜（德国 Leica 公司）、NEWTON 7.0 型                  mL 溶解，再分散到 40 mL 水中，于 65 ℃水浴中搅拌 30
          小动物活体成像系统（法国Viber公司）等。                              min，作为水相。取 PLGA 40 mg 和 DOX 原料药 10 mg，
          1.2 主要药品与试剂                                         用80%乙腈20 mL溶解，作为有机相。将有机相倒入水
              DOX 原料药（批号 P2125318，纯度＞98.0%）、DOX               相中，于室温下以150 r/min搅拌2 h，随后旋转蒸发去除
          对照品（批号S20240426，纯度≥98.0%）、RGD-二硬脂酰                  乙腈，经0.8 µm滤膜过滤，即得RGD@DOX-LPNs。
          基磷脂酰乙醇胺（distearoyl phosphatidylethanolamine，            不 加 DOX，同 法 制 备 RGD-LPNs；不 加 DOX 和
          DSPE）- 聚 乙 二 醇 2000（polyethylene  glycol  2000，     RGD-DSPE-PEG2000，同 法 制 备 LPNs；不 加 RGD-
          PEG2000）（批号 TYJ0221-04，纯度＞95.0%）、11-氯-1，            DSPE-PEG2000，同法制备DOX-LPNs；分别以荧光探针


          · 2018 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 16                            中国药房  2025年第36卷第16期
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