Page 77 - 《中国药房》2025年16期
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COU 或示踪指示剂 IR780 代替 DOX，同法制备 COU-                  2.3 包封率和载药量测定
          LPNs、RGD@COU-LPNs 和 IR780-LPNs、RGD@IR780-              采用超滤离心法 检测 DOX 的包封率。取 DOX-
                                                                                [7]
          LPNs，备用。                                           LPNs、RGD@DOX-LPNs各适量，以紫外-可见分光光度
          2.2 表征                                             计于233 nm波长处测定其中DOX的量M0 （定量方法的
          2.2.1 外观、微观形态观察和粒径、多分散性指数、Zeta                     方法学考察符合2020年版《中国药典》（四部）的相关规
          电位检测                                               定）；同时，取等体积 DOX-LPNs、RGD@DOX-LPNs，置
              取 RGD-LPNs 和 RGD@DOX-LPNs 适量，进行外观              于超滤离心管中，以 3 000 r/min 离心 10 min，取滤液适
          观察，结果显示，RGD-LPNs 为有淡蓝色乳光的透明液                       量，使用紫外-可见分光光度计于 233 nm 波长处测定
          体（图1A左），包载DOX后为橙色透明液体（图1A右）。                       DOX的量M1；按下式计算DOX的包封率：包封率（%）＝
          取 RGD@DOX-LPNs 1 mL，置 50 mL 容量瓶中，用水定               M0/M1×100%。每样品平行测定3次。
          容，摇匀，取适量滴加至覆盖碳支持膜的铜网上，自然晾                              采用质量法计算 DOX 的载药量。取 RGD-LPNs、
          干后，使用 TEM 观察其微观形态，结果（图 1B）显示，                      RGD@DOX-LPNs 各 1 mL，冷冻干燥后称重，分别得两
          RGD@DOX-LPNs 颗粒大小均一且近球形。另取上述                       者的质量 M2、M3，按下式计算载药量：载药量（%）＝
          稀释后的RGD@DOX-LPNs溶液，使用激光粒度仪测定                      （M3－M2 ）/M1×100%。每样品平行测定3次。
          其粒径、多分散性指数（polydispersity index，PDI）和Zeta              采用 GraphPad 6.02 软件对数据进行统计分析。符
          电位，每样品平行检测3次，结果显示，其粒径为（159.67±                     合正态分布的计量资料以 x±s 表示，两组比较采用 t 检
          8.02）nm，PDI为0.15±0.06，Zeta电位为（－19.70±0.79）         验；多组比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采
          mV（n＝3）。                                           用LSD-t检验。检验水准α＝0.05（下同）。
                                                                 结果显示，DOX-LPNs、RGD@DOX-LPNs 中 DOX
                                                             的包封率分别为（76.14±3.53）%、（72.65±4.37）%，载药
                                                             量分别为（4.82±0.29）%、（4.62±0.38）%，组间比较差异
                                                             均无统计学意义（P＞0.05），提示 RGD 的修饰不会影响

                                                  100 nm     纳米粒中药物的包封率和载药量。
                 A.外观                  B.微观形态                2.4 稳定性考察
                图1 相关制剂的外观、微观形态观察图                               取RGD@DOX-LPNs 适量，分别于4、25 ℃下储存，

          2.2.2 DSC和XRD分析                                    并于放置 1、3、5、7 d 时观察其外观变化，测定其粒径和
              取DOX原料药、DOX+磷脂+PLGA的物理混合物、                     包封率，每样品每条件平行测定3次。结果（图表略）显
          RGD-LPNs、RGD@DOX-LPNs 各适量，进行 DSC 分析                示，在上述条件下，RGD@DOX-LPNs 的外观无明显变
         （测试温度为30～300 ℃，扫描速率为10 ℃/min，测试气                    化且无沉淀析出，粒径与初始粒径基本一致，包封率虽
          体为氮气）和 XRD 分析（扫描范围为 3～80 °，扫描速率                    略有下降但整体变化不大，提示所制RGD@DOX-LPNs
          为 10 °/min）。结果（图 2）显示，在 DOX 原料药中，可观                较为稳定。
          察到明显的吸热峰和尖锐的晶型衍射峰，表明 DOX 是                         2.5 体外释放考察
          具有一定结晶度的分子；在物理混合物中，仍能观测到                               采用透析法检测。取 DOX 原料药、DOX-LPNs、
          部分吸热峰和晶型衍射峰，表明 DOX 在物理混合物中                         RGD@DOX-LPNs各适量，以pH7.4的PBS稀释，制成质
          仍以晶型存在；在 RGD-LPNs、RGD@DOX-LPNs 中，吸                 量浓度为250 μg/mL（以DOX质量计）的溶液；精密量取
          热峰和晶型衍射峰均消失，表明制成纳米粒后，DOX晶                          上述溶液各5.0 mL置于透析袋中，将透析袋两端夹紧后
          型发生变化，其可能以无定型或分子状态存在。                              放入释放介质（PBS）50 mL 中，于 37 ℃下以 50 r/min 振
             0  1                 2.5×10 6                   摇；分别于0.5、1、2、4、8、12、24、36、48 h时于透析袋内取
           （ W/g ）  －5  2         2.0×10 6 6            1    样200 μL，同时补足等温等体积的释放介质。取各取样
           热流/  －10  3            强度 1.5×10 6           2    液，采用紫外-可见分光光度计于 233 nm 波长处测定其
                                  1.0×10
                                                        3
           －15  4                 0.5×10 6                   中 DOX 的量，按下式计算累积释放量：累积释放量
                                      0                 4           n
              0     50   100  150  200  250  300  0    20   40   60   80  ∑ c ´ V
                     温度/℃                     衍射角/°                   i   i
                   A. DSC分析                 B. XRD分析        （%）＝   i = 1 M  ×100%（式中，ci为第 i 个时间点测得的
             1：DOX原料药；2：物理混合物；3：RGD-LPNs；4：RGD@DOX-                    0
         LPNs。                                               DOX 的量，V i为第 i 个时间点的取样体积，M0为 DOX 的
                 图2 相关制剂的DSC、XRD分析图谱                         总量）。每样品平行测定3次，取平均值。结果（图3）显


          中国药房  2025年第36卷第16期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 16    · 2019 ·
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