Page 43 - 《中国药房》2025年16期
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HPAH 的病理生理机制复杂，其中缺氧诱导的氧稳                       购自成都正能生物技术有限责任公司；辣根过氧化物酶
          态失衡是其重要发病机制之一。在低氧环境下，肺血管                           标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白 G 二抗（货号 AS003）购
          内皮细胞中低氧诱导因子 1α（hypoxia-inducible factor-           自武汉爱博泰克生物科技有限公司；HIF-1α、NF-κB p65
          1α，HIF-1α）蛋白异常累积，再通过上调血管内皮生长因                      抗体（货号分别为 bs-0737R、bs-0465R）均购自北京博奥
          子和内皮素1等因子促进血管收缩，同时激活核因子κB                          森生物技术有限公司；β-肌动蛋白（β-actin）抗体（货号
         （nuclear factor κB，NF-κB）介导的炎症级联反应，共同               81115-1-RR）购自武汉三鹰生物技术有限公司；TRIzol总
          驱动肺血管重塑       [3―4] 。研究表明，HIF-1α/NF-κB 信号通         RNA提取试剂、第一链cDNA合成试剂盒和SYBR Green
          路的交叉激活是连接缺氧刺激与血管重塑的关键环                             预混液（货号分别为DP424、KR202、FP207-01）均购自天
            [5]
          节 ，但针对该通路的药物干预研究仍显不足。                              根生化科技（北京）有限公司；BCA蛋白定量试剂盒（货号
              利舒康胶囊源自藏医经典《四部医典》中的“抗山岚                        KTD3001）购自武汉艾美捷科技有限公司；脱脂奶粉（货
          瘴气”古方，由手参（甘、平，补益气血）、甘青青兰（苦、                        号 025B1050）购自雅酶生物科技有限公司；ECL 化学发
          凉，清热解毒）、红景天（甘、寒，抗缺氧）、烈香杜鹃（辛、                       光底物（货号WLA006a）购自万类生物科技有限公司。
          温，化痰止咳）、黄柏（苦、寒，清热燥湿）、甘草（甘、平，调                      1.3 动物
                                                       [6]
          和诸药）6 味藏药组成，具有温胃升阳、养隆宁心之效 ，                            60只SPF级雄性SD大鼠，体重（161±10）g，购自北
          临床可用于治疗脾肾不足、精血亏虚所致头晕目眩、心                           京华阜康生物科技股份有限公司，生产许可证编号为
          悸气短、动辄喘乏、食少纳差、腰膝酸软，以及高原红细                          SCXK（京）2024-0008。 实 验 动 物 饲 养 在 温 度（23±
          胞增多症见上述证候者。现代研究证实，红景天苷可通                           1）℃、相对湿度 50%±10% 的环境中，自由饮水。本研
          过抑制HIF-1α改善缺氧损伤，而黄柏碱具有抑制NF-κB                      究经青海省人民医院科研伦理委员会批准，批件号为科
          的作用   [7―8] 。由此推测，利舒康胶囊可能对HPAH具有一                  研伦审（2024）-099。
          定治疗作用。为了验证上述推测，本研究基于 HIF-1α/                       2 方法
          NF-κB 信号通路，以西地那非为阳性对照药物，考察了                        2.1 分组、建模与给药
          利舒康胶囊对HPAH大鼠的影响，旨在阐明利舒康胶囊                              60 只大鼠适应性喂养 7 d 后，采用随机数字表法分
          对大鼠HPAH的保护作用，丰富藏药方剂治疗 HPAH的                        为对照组、模型组、阳性对照组（西地那非 30 mg/kg，用
          科学内涵。                                              药剂量参考人与动物体表面积折算的等效剂量比率表
          1 材料                                               换算而得）和利舒康低、中、高剂量组（利舒康胶囊6、12、
          1.1 主要仪器                                           18 g/kg，用药剂量参考人与动物体表面积折算的等效剂
                                              TM
              本研究所用主要仪器包括QuantStudio  3型实时荧                  量比率表换算而得），每组 10 只。对照组大鼠常规饲
          光定量聚合酶链式反应（qPCR）仪和 DXR3 型光学显微                      养，其余各组大鼠采用间歇性低氧法，使用低氧低压环
          镜（美国Thermo Fisher Scientific公司）、KZ-Ⅲ-F型高速          境舱模拟 5 000 m 海拔[氧浓度 10.8%，大气压力 405
          低温组织研磨仪（武汉塞维尔生物科技有限公司）、                            mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa），温度（23±1）℃，相对湿度
          RM2016 型切片机（上海徕卡仪器有限公司）、VS200 型                    50%±10%] 建 立 HPAH 模 型 。 低 氧 暴 露 方 案 ：每 天
          数字切片扫描仪（日本 Olympus 公司）、5200 Multi 型荧               8：00－20：00 进行低氧暴露，20：00－次日 8：00 返回常
          光图像分析系统（上海天能科技有限公司）、LP-1500S型                      压环境，连续 28 d。所有大鼠建模同时进行药物干预，
          低氧低压环境舱（上海玉研科学仪器有限公司）、MP160                        每日低氧暴露结束后（20：00）统一给药，药物组大鼠灌
          型多导生理仪（北京质研科技有限公司）。                                胃相应药物，对照组和模型组大鼠灌胃等体积的生理盐
          1.2 主要药品与试剂                                        水，灌胃体积为10 mL/kg，每天给药1次，连续给药28 d。
              利舒康胶囊（国药准字 Z20025932，规格 0.5 g）购自               2.2 平均肺动脉压和右心室肥厚指数测定
          青海益欣药业有限责任公司；西地那非（货号 S6070，纯                           于末次给药后24 h内，麻醉大鼠后分离其颈部肌肉
          度≥98%）购自北京索莱宝科技有限公司；牛血清白蛋                          和血管，暴露颈外静脉并结扎其远端，近端行“V”形切口
          白和异硫氰酸荧光素标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二                          后植入导管，经右心室插入肺动脉，通过多导生理仪测
          抗（货号分别为 GC305010、GB21303）均购自武汉赛维                   定 平 均 肺 动 脉 压（mean  pulmonary  artery  pressure，
          尔生物科技有限公司；α 平滑肌肌动蛋白（α-smooth                       MPAP）。测量结束后处死大鼠，分离心脏组织和周围血
          muscle  actin，α -SMA）抗 体（货 号 ab5694）购 自 英 国        管，沿室间隔边缘剪取右心室游离壁（right ventricle free
          Abcam公司；RNA提取试剂盒（货号19221ES50）购自上                   wall，RV），称定RV和左心室加室间隔（left ventricle plus
          海翌圣生物科技股份有限公司；反转录试剂盒和高特异                           septum，LV+S）的质量，按下述公式计算右心室肥厚指数
          性 qPCR 试剂（货号分别为 RR047A、RR820A）均购自北                （right ventricle hypertrophy index，RVHI）：RVHI＝RV 质
          京宝日医生物技术有限公司；ECL 发光液（货号 17046）                     量/（LV+S）质量。


          中国药房  2025年第36卷第16期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 16    · 1989 ·
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