Page 57 - 《中国药房》2025年12期

200 200 两 种 细 胞 的 活 力 均 显 著 降 低（P＜0.05）；与 同 浓 度
MWCNTs-EMD 相比，经 HA-MWCNTs-EMD 处理的两

细胞数 100 细胞数 100 种细胞的活力亦显著降低（P＜0.05）。
150
游离EMD组
MWCNTs-EMD组
0 0 100 HA-MWCNTs-EMD组
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
荧光强度 荧光强度 细胞活力/%
A.游离EMD组 B. MWCNTs-EMD组 50
200

0
0 10 20 30 40 50 60
细胞数 100 EMD浓度/（μmol/L）
A. MCF-7细胞
150
游离EMD组
MWCNTs-EMD组
0 HA-MWCNTs-EMD组
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 100
荧光强度
C. HA-MWCNTs-EMD组 细胞活力/%
红色：CD44阳性细胞；黑色：CD44阴性细胞。 50
图5 不同递药系统对MCF-7细胞表面CD44表达影响
的流式细胞图 0
0 10 20 30 40 50 60
表3 不同递药系统对MCF-7、MDA-MB-231细胞表面 EMD浓度/（μmol/L）
B. MDA-MB-231细胞
CD44表达的影响（x±s，n＝6）
a：与0 μmol/L EMD相比，P＜0.05；b：与同浓度游离EMD相比，
组别 MCF-7细胞 MDA-MB-231细胞 P＜0.05；c：与同浓度MWCNTs-EMD相比，P＜0.05。
游离EMD组 132.35±14.62 164.25±16.13 图6 不同递药系统对两种细胞活力的影响（x±s，
MWCNTs-EMD组 129.87±15.41 157.92±17.42
n＝6）
HA-MWCNTs-EMD组 65.30±11.59 ab 80.13±12.67 ab
a：与游离EMD组相比，P＜0.05；b：与MWCNTs-EMD组相比，P＜ 2.6 不同递药系统对乳腺癌细胞凋亡和LDH释放量的
0.05。 影响检测
2.5 不同递药系统对乳腺癌细胞活力的影响检测 采用 TUNEL 染色法检测细胞凋亡情况。取 MCF-

采用 SRB 法检测。取 MCF-7、MDA-MB-231 细胞， 7、MDA-MB-231细胞，按“2.3.1”项下条件培养，待传代2
按“2.3.1”项下条件培养，待传代2次后以1×10 个/孔接 次后将细胞分为空白对照组和游离EMD组、MWCNTs-
4
种于96孔板中，培养过夜；收集细胞，分别用相应浓度的 EMD 组、HA-MWCNTs-EMD 组，每组设置 6 个复孔。4
EMD、MWCNTs-EMD、HA-MWCNTs-EMD（终浓度以 组细胞分别以不含血清的专用培养基或EMD、MWCNTs-
[11]
EMD 计均分别为 0、10、20、40、60 μmol/L ）处理，并设 EMD、HA-MWCNTs-EMD溶液（以不含血清的专用培养
[11]
置不含细胞、不含药物的调零组，每浓度设置6个复孔。 基为溶剂，终浓度以EMD计均为40 μmol/L ）培养；24 h
培养 24 h 后，收集细胞，用预冷的 10% 三氯乙酸溶液固 后，收集细胞，经预冷的 PBS 清洗、4% 多聚甲醛溶液固
定，加入0.4%SRB溶液染色20 min，再以1%乙酸溶液清 定、TUNEL 染色、4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）复染
洗，使用全波长自动酶标仪检测各组细胞的吸光度，并 后，使用荧光显微镜观察各组细胞的凋亡情况（凋亡细
按下式计算细胞活力：细胞活力（%）＝（各浓度EMD处 胞呈绿色），并按下式计算细胞凋亡率：细胞凋亡率
理细胞的吸光度－调零组细胞的吸光度）/（0 μmol/L （%）＝凋亡细胞数/总细胞数×100%。
EMD 处理细胞的吸光度－调零组细胞的吸光度）× 采用比色法检测细胞的 LDH 释放量。取 MCF-7、

100%。 MDA-MB-231 细胞，按“2.3.1”项下条件培养，待传代 2
结果显示（图6），与0 μmol/L游离EMD、MWCNTs- 次后按前述 TUNEL 实验分组（每组设置 6 个复孔）、处
EMD、HA-MWCNTs-EMD相比，其余浓度的游离EMD、 理。培养 24 h 后，收集细胞上清液，离心（1 000 r/min，
MWCNTs-EMD、HA-MWCNTs-EMD 均可显著降低上 10 min），按照 LDH 检测试剂盒说明书方法检测上清液
述两种细胞的活力（P＜0.05）。与同浓度游离 EMD 相 中LDH水平，即为各组细胞的LDH释放量。
比，经 MWCNTs-EMD、HA-MWCNTs-EMD 处理的上述 结果显示（图7、表4；限于篇幅，MDA-MB-231细胞

中国药房 2025年第36卷第12期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 12 · 1467 ·