Page 56 - 《中国药房》2025年12期
P. 56

SPSS 26.0 软件进行统计学分析。实验数据以 x±s 表                     显著升高(P<0.05);与 MWCNTs-EMD 组相比,HA-
          示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较                            MWCNTs-EMD 组两种细胞的 EMD 摄取量亦显著升高
          采用SNK-q检验;检验水准α=0.05(统计方法下同)。                      (P<0.05)。

              结果显示(图 3),与游离 EMD 相比 ,MWCNTs-
          EMD、HA-MWCNTs-EMD 在 2~24 h 各时间点的累积
          释放量均显著降低(P<0.05),而HA-MWCNTs-EMD在                     游离EMD组
          上述时间点的累积释放量均显著高于同期 MWCNTs-
          EMD(P<0.05)。
                   150          游离EMD
                                MWCNTs-EMD
                                HA-MWCNTs-EMD
                   EMD累积释放量/%  100                             MWCNTs-EMD组


                    50

                     0
                      0     5    10   15   20    25
                                  时间/h                         HA-MWCNTs-EMD组
             a:与游离EMD相比,P<0.05;b:与同期HA-MWCNTs-EMD相比,
          P<0.05。
              图3 不同递药系统中EMD的累积释放量比较
                                                                      EMD          Hoechst33258      合并
          2.3 乳腺癌细胞对不同递药系统内 EMD 的摄取情况                         图4 经不同递药系统处理后 MCF-7 细胞的激光共聚
          检测                                                       焦图
          2.3.1 细胞培养                                          表2 两种细胞对各递药系统中 EMD 的摄取量比较
              取 MCF-7 细胞,接种于 MCF-7 专用培养基中;取                       (x±s,n=6)
          MDA-MB-231 细胞,接种于 MDA-MB-231 专用培养基                  组别                 MCF-7细胞         MDA-MB-231细胞
                                                              游离EMD组               1                 1
         (Leibovitz’s L-15 基础培养基+1% 青-链霉素双抗+10%               MWCNTs-EMD组        2.94±0.48 a       3.05±0.43 a

          胎牛血清)中,于 37 ℃、5%CO2、相对湿度 95% 条件下                    HA-MWCNTs-EMD组     5.03±0.57 ab      6.12±0.56 ab
                                                                 a:与游离EMD组相比,P<0.05;b:与MWCNTs-EMD组相比,P<
          培养。
                                                              0.05。
          2.3.2 细胞摄取情况检测
                                                              2.4 不同递药系统对乳腺癌细胞表面 CD44 表达的影
              采用细胞摄取实验检测。取MCF-7、MDA-MB-231
                                                              响检测
          细胞,按“2.3.1”项下条件培养,待传代 2 次后,接种于激
                                                                  采用流式细胞实验检测。取MCF-7、MDA-MB-231
          光共聚焦专用24孔板内,培养24 h后吸弃培养液,细胞
                                                              细胞,按“2.3.1”项下条件培养,待传代2次后按“2.3.2”项
          经 PBS 漂洗 3 次后随机分为游离 EMD 组、MWCNTs-
                                                              下方法分组(每组设置6个复孔)、处理。培养3 h后,收集
          EMD 组、HA-MWCNTs-EMD 组,每组设置 6 个复孔。3
                                                              各组细胞,以预冷的 70% 乙醇固定并制成 1×10 个/mL
                                                                                                       6
          组细胞分别以EMD、MWCNTs-EMD、HA-MWCNTs-EMD
                                                              的单细胞悬液;将上述悬液平分为两份,一份加入 10
          溶液(药液以不含血清的专用培养基为溶剂,终浓度以
                                                              μg/mL FITC 荧光标记的 CD44 抗体,另一份加入 10
                              [11]
          EMD 计均为 40 μmol/L )培养;3 h 后,收集细胞,以预
          冷的PBS清洗,经4%多聚甲醛溶液固定、Hoechst33258                    μg/mL FITC 荧光标记的免疫球蛋白 G 抗体,避光孵育
          染色后,使用激光共聚焦显微镜观察,采集各组细胞图                            20 min;收集细胞,以 PBS 清洗后,使用流式细胞仪检

          像并定量分析各组细胞的 EMD 摄取量(即实验组细胞                          测,以CD44抗体的荧光强度表示其表达水平。
          荧光强度与游离EMD组细胞荧光强度的比值)。                                  结果显示(图5、表3;限于篇幅,MDA-MB-231细胞
              结果显示(图4、表2;限于篇幅,MDA-MB-231细胞                    的相关结果可扫描本文首页二维码链接页面中“增强出
          的相关结果可扫描本文首页二维码链接页面中“增强出                            版”板块查看附图 2),与游离 EMD 组、MWCNTs-EMD
          版”板块查看附图 1),与游离 EMD 组相比,MWCNTs-                     组相比,HA-MWCNTs-EMD组两种细胞表面CD44的表
          EMD、HA-MWCNTs-EMD组两种细胞的EMD摄取量均                      达均显著下调(P<0.05)。


          · 1466 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 12                            中国药房  2025年第36卷第12期
   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61