Page 54 - 《中国药房》2025年12期
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by the two types of breast cancer cells were significantly higher than their uptake of free EMD (P<0.05). Compared with the free
EMD group, the MWCNTs-EMD and MWCNTs-EMD groups showed significantly higher apoptosis rate and LDH release,
significantly lower surface CD44 expression (except for the MWCNTs-EMD group) and cell viability in both cell types, and the
effect of HA-MWCNTs-EMD was more pronounced (P<0.05). CONCLUSIONS A novel drug delivery system HA-MWCNTs-
EMD loaded with EMD is developed successfully; the drug delivery system has a certain slow-release effect, which can
significantly reduce the activity of breast cancer cells, promote their apoptosis and increase the release of LDH, and the above anti-
breast cancer effect is significantly stronger than that of free EMD and MWCNTs-EMD.
KEYWORDS emodin; multi-walled carbon nanotubes; hyaluronic acid; drug delivery system; breast cancer; inhibitory effect
乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤,其发病率居高不 Tecnai F20 型透射电子显微镜(美国 FEI 公司),Nano-
下,位于我国妇科恶性肿瘤前列,且呈年轻化趋势,严重 ZS90 型激光纳米粒度仪(英国 Malvern 公司),UV 2550
威胁女性的身心健康和生命安全 [1―2] 。目前,中医药在 型紫外分光光度计(日本 Shimadzu 公司),EClassical
[3]
乳腺癌治疗领域的应用备受学者重视 。大黄素(emo‐ 3200L型超高效液相色谱(UPLC)仪(大连依利特分析仪
din,EMD),又称1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌,是提取自传 器有限公司),OLS5100-LAF型激光共聚焦显微镜(日本
统中药大黄的天然蒽醌类衍生物,具有显著的抗癌活 Olympus 公司),VCX2500 型超声波破碎仪(美国 Sonics
性,能够抑制乳腺癌细胞的生长、增殖、侵袭 [4―5] 。然而, 公司),HH.CP-01T型细胞培养箱(上海川昱实验仪器有
[6]
该成分对肿瘤细胞的靶向性较弱,且生物利用度不高 , 限公司)等。
故有必要设计并构建能提升 EMD 抗癌效果的递药 1.2 主要药品与试剂
系统。 EMD 对照品(批号 110756-201913,纯度 96.0%)购
碳纳米管(carbon nanotubes,CNTs)是一种新型递 自中国食品药品检定研究院;氨基化 MWCNTs(批号
药系统,根据石墨烯层数分为单壁碳纳米管、双壁碳纳 XFM62,外径 8~15 nm,长度 50 μm,纯度>95%)购自
米管和多壁碳纳米管(multi-walled carbon nanotubes, 南京先丰纳米材料科技有限公司;HA 对照品(批号
MWCNTs)3 种类型,其中 MWCNTs 较其余类型具有更 LM1078,纯度≥95.0%)购自上海联迈生物工程有限公
大的比表面积及更好的分散性。研究表明,CNTs 能将 司;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂
药物分子递送至肿瘤细胞,且其表面存在的不同官能团 盒、磺酰罗丹明 B(sulforhodamine B,SRB)检测试剂盒、
有助于靶向肿瘤细胞,从而明显提升药物的生物利用度 TUNEL 检测试剂盒、FITC 荧光标记的鼠抗 CD44 抗体、
并延长药物的半衰期 [7―8] 。透明质酸(hyaluronic acid, FITC荧光标记的山羊抗人免疫球蛋白G抗体(批号分别
HA)是一种高级多糖,具有低毒性、低免疫反应、可生物 为ab102526、ab235935、ab66108、ab30405、ab81051)均购
降解、可吸收等特性,能选择性地结合高表达于乳腺癌 自英国Abcam公司;MCF-7细胞专用培养基、Leibovitz’s
等多种实体瘤细胞表面的糖蛋白分化群 44(cluster of L-15 基础培养基、青-链霉素双抗、胎牛血清(批号分别
differentiation 44,CD44),被广泛用于抗癌药物 CNTs 主 为 CM-0149、PM151010、PB180120、164210-50)均购自
[9]
动靶向递药系统的研发领域 。鉴于现有 EMD 相关递 武汉普诺赛生命科技有限公司。
药系统的研发成果 [9―10] ,本课题组推测 HA 修饰的负载 1.3 实验细胞
EMD的MWCNTs主动靶向递药系统可能有助于进一步 人乳腺癌细胞 MCF-7、MDA-MB-231(批号分别为
增强 EMD 对乳腺癌的抗癌活性。基于此,本研究拟制 CL-0149、CL-0150)均购自武汉普诺赛生命科技有限
备 HA 修饰的负载 EMD 的 MWCNTs 递药系统(以下简 公司。
称“HA-MWCNTs-EMD”),并探究其对乳腺癌细胞的体 2 方法与结果
外抑制作用,以期为提升 EMD 相关制剂在乳腺癌治疗 2.1 递药系统的制备与表征
中的递药效率提供参考。 2.1.1 负载EMD的MWCNTs递药系统的制备
1 材料 取 EMD 对照品和氨基化 MWCNTs 各 10 mg,分散
1.1 主要仪器 于10 mL无水乙醇中,超声(功率400 W,频率40 kHz)处
本研究所用主要仪器包括 Attune NxT 型流式细胞 理 6 h;经截留分子量为 100 kDa 的超滤膜,离心(9 000
仪、Multiskan SkyHigh型全波长自动酶标仪、EVOS型荧 r/min,30 min),过滤;收集固体,于室温下真空干燥 30
光倒置显微镜(美国 Thermo Fisher Scientific 公司), min后,分散于10 mL水中,再次超声(功率400 W,频率
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