Page 51 - 《中国药房》2025年12期

起溶血现象，而且上清液澄清透明。100、200、300、400 200
µg/mL 的 TP@PLGA-PEG-FA 的溶血率分别为 0.77%、 4 ℃ 37 ℃
150
0.92%、1.34%、1.63%，均低于3%，表明TP@PLGA-PEG-
粒径/nm
[16]
FA具有良好的血液相容性 ，可用于体内注射。 100
50

0
0 d 2 d 4 d 6 d 8 d 10 d 12 d 14 d 0 h 2 h 4 h 6 h 8 h 10 h 12 h
取样时间
阴性对照 阳性对照 100 μg/mL 200 μg/mL 300 μg/mL 400 μg/mL A.粒径
样品 样品 0.4
不同质量浓度的供试样品
图4 不同质量浓度TP@PLGA-PEG-FA血液相容性考 4 ℃ 37 ℃
0.3
察实验的实拍图
3.5 TP@PLGA-PEG-FA的稳定性 PDI 0.2
稳定性考察结果（图5）显示，TP@PLGA-PEG-FA在
0.1
4 ℃水中放置 14 d 和在 37 ℃、含有 10% 胎牛血清的
DMEM培养基中放置12 h的粒径、PDI、Zeta电位均无明 0
0 d 2 d 4 d 6 d 8 d 10 d 12 d 14 d 0 h 2 h 4 h 6 h 8 h 10 h 12 h
显变化，表明 TP@PLGA-PEG-FA 具有良好的稳定性。
取样时间
这可能归因于该纳米粒子表面的负电荷和 PEG 对纳米 B. PDI
0
[17]
粒子表面的空间保护作用 。
3.6 细胞对TP@PLGA-PEG-FA的摄取情况
－10
结果（图 6）显示，在激活的 RAW264.7 细胞中，经
Cy3.5@PLGA-PEG-FA 处理的细胞核周围出现明显的 Zeta电位/mV
红色荧光，而经游离 FA 预处理后再经 Cy3.5@PLGA- －20
PEG-FA 处理的细胞核周围红色荧光明显减弱，且后者 4 ℃ 37 ℃
与 Cy3.5@PLGA-PEG 处理细胞比较未见明显差异。在 －30
0 d 2 d 4 d 6 d 8 d 10 d 12 d 14 d 0 h 2 h 4 h 6 h 8 h 10 h 12 h
未 激 活 的 RAW264.7 细 胞 中 ，经 Cy3.5@PLGA-PEG、 取样时间
Cy3.5@PLGA-PEG-FA+ 游 离 FA、Cy3.5@PLGA-PEG- C. Zeta电位
图5 TP@PLGA-PEG-FA 的稳定性考察结果（x±s，
FA 处理的细胞核周围均有较弱的红色荧光，但三者无
n＝3）
明显差异。上述结果显示，激活的巨噬细胞能更有效地
摄取Cy3.5@PLGA-PEG-FA；若提前使用FA预处理，FA
则可先与激活的RAW264.7细胞表面的FR结合，从而导
致 Cy3.5@PLGA-PEG-FA 的靶向作用减弱，表明 FA 修 未激活细胞
饰可明显提高纳米粒子的主动靶向性。
3.7 TP@PLGA-PEG-FA的体外细胞毒性
针对未激活 RAW264.7 细胞的体外毒性实验结果
（图 7A）显 示 ，当 TP 质 量 浓 度 ≥62.5 ng/mL 时 ，
TP@PLGA-PEG-FA 组、TP@PLGA-PEG 组未激活细胞 激活细胞
的平均存活率均小于 50%；而当 TP 质量浓度≥15.63
ng/mL，游离TP组未激活细胞的平均存活率均小于50%；
当TP质量浓度≥15.63 ng/mL时，游离TP组的细胞存活 Cy3.5@PLGA-PEG Cy3.5@PLGA-PEG-FA+游离FA Cy3.5@PLGA-PEG-FA
图6 激活与未激活RAW264.7细胞对纳米粒子摄取的
率 均 显 著 低 于 同 质 量 浓 度 TP@PLGA-PEG-FA 组 和
激光共聚焦显微图
TP@PLGA-PEG组（P＜0.05）。这主要归因于游离TP可
通过扩散作用直接作用于细胞；而TP@PLGA-PEG-FA、 针对激活 RAW264.7 细胞的体外毒性实验结果（图
TP@PLGA-PEG则是通过细胞内吞作用将药物送入未激 7B）显示，当 TP 质量浓度≥15.63 ng/mL 时，TP@PLGA-
活的巨噬细胞中，从而导致细胞对纳米粒子的摄入量不 PEG-FA组激活细胞的存活率均显著低于同质量浓度游
足、药物毒性减弱。 离 TP 组（P＜0.05）。这主要是因为 TP@PLGA-PEG-FA

中国药房 2025年第36卷第12期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 12 · 1461 ·