Page 50 - 《中国药房》2025年12期

血清的RPMI-1640培养基培养24 h。吸弃培养基，分别 空白靶向纳米粒子中。不同质量浓度TP标准溶液的紫
加入含不同质量浓度 TP@PLGA-PEG-FA、TP@PLGA- 外光谱图（图 2B）显示，217 nm 波长处的吸光度值与 TP
PEG、游离 TP（TP 质量浓度均分别为 250、125、62.5、 质量浓度呈正相关。以TP质量浓度为横坐标（x）、吸光
31.25、15.63、7.82 ng/mL，质量浓度根据其半数抑制浓度 度值为纵坐标（y），经最小二乘法拟合得到的回归方程
31.25 ng/mL 设置）的 RPMI-1640 培养基，作为实验组； 为 y＝0.120 6x+1.006 1（R ＝0.993 7），TP 检测质量浓度
2
另设只加细胞、不加药物的对照组和不加细胞、不加药 的线性范围为 2.5～30 μg/mL；该方法的精密度、稳定
物的空白组。每组设置 3 个复孔。培养 24 h，每孔加入 性、重复性、回收率试验结果均符合 2020 年版《中国药
[14]
CCK-8 溶液 10 μL，于 37 ℃下避光孵育 30 min 后，使用 典》（四部）的相关要求 。根据“2.3”项下公式计算得
酶标仪于450 nm波长处检测各孔的吸光度值，并按下式 TP@PLGA-PEG-FA 中 TP 的载药量和包封率分别为
计算细胞存活率：细胞存活率（%）＝（As－Ab ）/（Ac－ （7.78±0.05）%和（68.62±0.03）%（n＝3）。
Ab ）×100%（式中，As、Ac、Ab分别为实验组、对照组、空白 5 5
PLGA-PEG-FA空白 30 μg/mL
组细胞的吸光度值）。 4 靶向纳米粒子 4 20 μg/mL
TP@PLGA-PEG-FA
2.9 统计学方法 吸光度值 3 TP标准溶液 吸光度值 3 10 μg/mL
5 μg/mL
采用 GraphPad Prism 5.0 软件对数据进行统计分 2 2 2.5 μg/mL
- 1 1
析。所有实验数据均以x±s表示，组间比较采用单因素
0 0
方差分析，进一步两两比较采用 LSD-t 检验。检验水准 200 220 240 260 280 300 200 220 240 260 280 300
波长/nm 波长/nm
α＝0.05。 A. TP@PLGA-PEG-FA B. TP标准溶液
3 结果与讨论 图2 纳米粒子和TP标准溶液的紫外可见光谱图
3.1 TP@PLGA-PEG-FA的表征
3.3 TP@PLGA-PEG-FA的累积释放量
扫描电子显微镜结果（图1）显示，PLGA-PEG-FA空
体外释药实验结果（图3）显示，TP@PLGA-PEG-FA
白靶向纳米粒子和TP@PLGA-PEG-FA均呈球形，且分布
的释药行为具有明显的 pH 依赖性，且随着 pH 值的下
均匀；两者的平均粒径分别为（106.20±0.03）、（122.60±
降，药物释放速率明显加快。其中，TP@PLGA-PEG-FA
0.02）nm，Zeta 电位分别为（－18.3±0.5）、（－17.6±0.6）
在 pH5.5 的磷酸盐缓冲液中 72 h 时的累积释放量为
mV，PDI 分别为 0.28±0.04、0.26±0.02（n＝3）。研究指
（84.83±0.29）%，较pH7.4、6.5磷酸盐缓冲液中72 h时的
出，＜200 nm的纳米粒子更容易逃避网状内皮系统的捕
累积释放量[分别为（42.37±0.35）%、（63.83±0.29）%]
获，并可借助由肿瘤血管渗漏引起的渗透增强及保留效
显著升高（P＜0.05）。分析原因可能是，PLGA的降解可
应而在肿瘤部位累积，而 RA 的病理特性使其病变组织
影响聚合物纳米粒子的释药性能，在水环境中，聚合链
[12]
存 在 与 肿 瘤 部 位 相 似 的“ 渗 漏 ”血 管 系 统 ，故
的缠绕程度将随着纳米粒子的膨胀而发生变化，使水溶
TP@PLGA-PEG-FA 可能借助渗透增强及保留效应在
性降解产物浓度增加，而 TP@PLGA-PEG-FA 中含有亲
RA 关节炎症组织中累积。此外，由 Zeta 电位检测结果
水基团 PEG，导致其亲水性更强、释药更快；此外，酸性
可知，TP@PLGA-PEG-FA荷负电，且此荷电特性不仅可
条件可影响聚合物纳米粒子中酸性低聚物的均匀度，从
避免纳米粒子聚集，而且可以减少与带负电荷细胞膜间
[15]
而加速PLGA的降解 。
[13]
的非特异性相互作用 ，有利于 TP@PLGA-PEG-FA 与
100
细胞膜表面的FR结合，从而发挥主动靶向性。 pH5.5
80 pH6.5
pH7.4 a a
累积释放量/% 60 a
40
20
0
0 20 40 60 80
时间/h
A. PLGA-PEG-FA空白靶向纳米粒子 B. TP@PLGA-PEG-FA a：72 h时组间比较，P＜0.05。
图1 纳米粒子的扫描电子显微镜图 图3 TP@PLGA-PEG-FA的释放曲线（x±s，n＝3）

3.2 TP@PLGA-PEG-FA的载药量和包封率 3.4 TP@PLGA-PEG-FA的溶血率
紫外光谱图（图 2A）显示，TP@PLGA-PEG-FA 具有 血液相容性考察结果（图 4）显示，与阴性对照样品
TP 特征吸收峰，说明 TP 被成功包载入 PLGA-PEG-FA 相比，即便是 400 µg/mL 的 TP@PLGA-PEG-FA 也未引

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