Page 54 - 《中国药房》2025年11期
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水飞蓟宾（silybin，Sy）是从菊科植物水飞蓟中提取                    2 方法与结果
                               [1]
          的黄酮木质素类化合物 ，具有保肝、抗癌、抗氧化、抗                           2.1 Sy纳米晶的制备
          炎、提高免疫力等生物活性，在临床上常用来治疗急慢                            2.1.1 Sy-NS-G的制备
          性肝炎、肝癌等      [2―3] ，但其溶解性较低 ，口服生物利用度                    采用高压均质法制备。称取 5 mg Soluplus 和 25
                                         [4]
              [5]
          不高 ，因此其在临床上的应用受限。                                   mg SDS 加入烧杯中，以 60 mL 去离子水搅拌至溶解作
              纳米混悬技术（如纳米混悬液、纳米晶）是一种常用                         为稳定剂，加入 300 mg Sy 原料药，继续搅拌混匀，在高
          于提高生物利用度的技术，粒径是影响样品溶解度和生                            速分散均质机上以 6 000 r/min 预分散 20 min 得初混悬
                             [6]
          物利用度的主要因素 。纳米晶的制备方法主要分为                             液；将初混悬液置于高压均质机 110 MPa 下均质 12
         “自上而下”和“自下而上”两种方法：“自上而下”法是利                          min，加入 5% 甘露醇后，冻干，即得 Sy-NS-G 。本研究
                                                                                                    [7]
          用物理破碎的方式将大颗粒粉碎成小粒径的样品，如高                            所制 Sy-NS-G 的理化性质良好，平均粒径为（421.0±
          压均质法、研磨法等；“自下而上”法则是利用化学析出                           10.64） nm，Zeta 电位为－（29.70±0.60） mV，多分散系
          的方法将大颗粒的药物溶解在有机溶剂中，然后通过受                            数为0.284±0.059。
          控沉淀或结晶，生产所需尺寸的纳米晶，如反溶剂沉淀                            2.1.2 Sy-NS-F的制备
          法。本课题组前期分别采用高压均质法和反溶剂沉淀                                 采用反溶剂沉淀法制备。称取 Sy 原料药 10 mg 于
          法制备得到粒径相同的 Sy 纳米晶，结果发现高压均质                          2 mL EP 管中，加入 1 mL 无水乙醇，超声（功率 300 W，
          法制备的 Sy 纳米晶（即 Sy-NS-G）的溶出度和口服生物                     频率 40 kHz，下同）溶解，作为有机相；称取 0.83 mg
          利用度均低于反溶剂沉淀法制备的 Sy 纳米晶（即 Sy-                        Soluplus和0.16 mg SDS溶于纯水中作为水相，在细胞超
               [7]
          NS-F） 。药物口服后吸收部位主要在小肠，且药物的吸                         声粉碎机作用下将有机相滴入水相，继续超声 30 min，
          收除了与本身性质有关外，还与肠道环境等有关，同时                            减压至无醇味，加入 5% 甘露醇后，冻干，即得 Sy-NS-
                                      [8]
          药物的药效还与其体内分布有关 。本研究在前期研究                            F 。本研究所制Sy-NS-F的理化性质良好，平均粒径为
                                                               [7]
          的基础上，拟进一步采用单向肠灌流模型和组织分布实                           （423.80±10.82） nm，Zeta电位为－（30.40±0.265） mV，
          验探讨上述两种纳米晶的在体肠吸收及组织分布差异，                            多分散系数为0.209±0.027。
          以期为Sy的制剂优化及临床应用提供选择依据。                              2.2 单向肠灌流实验测定Sy的肠吸收
          1 材料                                                2.2.1 色谱条件
          1.1 主要仪器                                                以 Athena C18-WP（150 mm×4.6 mm，5 µm）为色谱
              ABSCIEX 型质谱仪购自美国 AB Sciex 公司；Ac‐                柱，以甲醇-0.3%冰醋酸溶液（45∶55，V/V）为流动相进行
          quity 型超高效液相色谱仪购自美国 Waters 公司；1260                  等度洗脱，检测波长为287 nm，流速为1.0 mL/min，进样
          型液相色谱仪购自美国 Agilent 公司；ZEN3690 型激光                   量为10 μL，柱温为30 ℃。
          粒度仪购自英国Malvern公司；AG-254型电子分析天平                      2.2.2 溶液的制备
          购自瑞士Mettler Toledo公司；AH-2010型高压均质机购                    （1）对照品溶液：精密称取 Sy 对照品 3.00 mg，置于
          自加拿大ATS工业系统有限公司；VELOCITY14型高速                       10 mL容量瓶中，加适量甲醇超声溶解，放冷后定容，摇
          冷冻离心机购自英国Dynamica公司。                                匀即得。（2）阴性溶液：称取处方量的Soluplus和SDS 及
          1.2 主要药品和试剂                                         冻干保护剂（5%甘露醇）于容量瓶中，加Krebs-Ringer试
              Sy 对照品、大豆苷元（内标）对照品、Sy 原料药（批                     液（即 K-R 液）超声溶解，即得。（3）空白肠灌流液：取 K-
          号分别为 23091802、22120202、23091802，纯度分别为               R液适量，按下文“2.2.5”项下方法灌流，收集得空白肠灌
          99.15%、98.23%、98.68%）均购自成都普菲德生物技术有                  流液。（4）含药肠灌流液：分别称取适量 Sy-NS-F 和 Sy-
          限公司；聚乙烯己内酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇接枝                           NS-G，分别用含有 0.1% 羧甲基纤维素钠的 K-R 液分散
          共聚物（Soluplus）购自德国BASF公司；十二烷基硫酸钠                     得到质量浓度均分别为60、120、180 μg/mL（以Sy计）的
         （SDS）购自天津市光复精细化工研究所；羧甲基纤维素                           纳米晶肠灌流液；精密称取适量Sy原料药，加入适量乙
          钠购自湖州展望药业股份有限公司；甲醇、乙酸为液质                            醇溶解后，用K-R液稀释成质量浓度分别为60、120、180
          联用级，其他试剂为分析纯，水为超纯水。                                 μg/mL的Sy原料药肠灌流液。
          1.3 动物                                              2.2.3 样品预处理方法
              本研究所用动物为清洁级 SD 大鼠，雄性，体重                             吸取1 mL肠灌流液样品于EP管中，加入3 mL甲醇
         （240±20） g，购自北京华阜康有限责任公司，动物生产                        超声3 min溶解，经0.45 μm滤膜过滤后，待进样测定。
          许可证编号为 SCXK（京）2019-0008。大鼠饲养于温度                     2.2.4 方法学考察
         （22±2） ℃、湿度（55±5）%的环境中，自由饮食、饮水。                          参考 2020 年版《中国药典》分析方法验证指导原则
                                                                            [9]
          本研究符合科学技术部颁发的《关于善待试验动物的指                            进行方法学考察 。取对照品溶液、阴性溶液、空白肠灌
          导性意见》，并经承德医学院伦理委员会批准（批准号为                           流液、2 种含药肠灌流液[以质量浓度均为 21.30 μg/mL
          CDMUAC-20240321-010）。                              （以 Sy 计）的 Sy-NS-F 和 Sy-NS-G 按“2.2.3”项下方法制


          · 1336 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 11                            中国药房  2025年第36卷第11期
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