Page 45 - 《中国药房》2025年7期

吴门枳壳甘草汤调控HIF-1α/VEGF/Ang信号轴抑制退变椎间盘

病理性血管新生的机制研究
Δ

1， 3
1
1
1
黄泽灵 ，朱在师 ，李宇卫 ，徐 波 ，陈俊名 ，张宝飞 ，陆斌杰 ，蔡学峰 ，陈 华 （1.南京中医药大学附
1
1＊
1
1， 2 #
1， 2
属苏州市中医医院骨伤科，江苏 苏州 215009；2.苏州市吴门医派研究院骨伤研究所，江苏 苏州 215009；
3.曲阜市中医院骨伤科，山东 曲阜 273100）
中图分类号 R285；R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2025）07-0807-08
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.07.07
摘 要 目的 探讨枳壳甘草汤对退变椎间盘病理性血管新生的影响及机制。方法 动物实验设置假手术组（生理盐水）、模型组
（生理盐水）、缺氧诱导因子 1α（HIF-1α）抑制剂（YC-1）组[2 mg/（kg·d），尾静脉注射]和枳壳甘草汤低、中、高剂量组[3.06、6.12、
12.24 g/（kg·d），灌胃]，每组8只。除假手术组外，其余各组均构建椎间盘退变大鼠模型。造模成功后，每天给药1次，连续3周。
末次给药后，观察大鼠椎间盘组织病理改变及血管新生情况，检测大鼠椎间盘组织中炎症因子[白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤
坏死因子 α（TNF-α）]水平以及血管生成相关蛋白[HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）、VEGF 受体 2（VEGFR2）、血管紧张素 1
（Ang 1）、Ang 2]表达水平。细胞实验中，提取并培养大鼠原代髓核细胞，以 50 ng/mL TNF-α 诱导细胞退变。设置空白对照组
（10%空白对照血清）、TNF-α组（10%空白对照血清）、YC-1组（10%空白对照血清+0.2 mmol/L YC-1）和5%、10%、15%含药血清组
（5%、10%、15% 含药血清），干预 24 h 后，将髓核细胞与人脐静脉内皮细胞（HUVEC）共培养。检测髓核细胞中Ⅱ型胶原蛋白
（Collagen Ⅱ）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）表达，检测HUVEC增殖、迁移、成管能力，检测HUVEC中HIF-1α/VEGF/Ang信号轴及
血管生成相关蛋白（在动物实验基础上新增MMP-2、MMP-9）表达水平。结果 动物实验结果显示，与模型组比较，各药物组大鼠
椎间盘组织中 CD31 阳性表达减少（P＜0.05），炎症因子及血管生成相关蛋白表达均显著下调（P＜0.05），椎间盘病理改变减轻。
细胞实验结果显示，与 TNF-α 组比较，各药物组髓核细胞中 Collagen Ⅱ表达均显著上调、MMP-3 表达均显著下调（P＜0.05），
HUVEC增殖、迁移及成管能力显著减弱（P＜0.05），HUVEC中HIF-1α、VEGF、Ang 2 mRNA及蛋白和血管生成相关蛋白（除5%含
药血清组的Ang 2 mRNA及HIF-1α、VEGFR2、Ang 2蛋白）表达均显著下调（P＜0.05）。结论 枳壳甘草汤可能通过抑制HIF-1α/
VEGF/Ang 信号轴，减弱血管内皮细胞的血管生成能力，改善椎间盘病理性血管新生，延缓椎间盘退变。
关键词 枳壳甘草汤；椎间盘退变；病理性血管新生；HIF-1α/VEGF/Ang信号轴；髓核细胞退变；炎症因子

Mechanism of Wumen Zhiqiao gancao decoction inhibiting pathological angiogenesis in degenerative
intervertebral discs by regulating HIF-1α/VEGF/Ang signal axis
HUANG Zeling ，ZHU Zaishi ，LI Yuwei ，XU Bo ，CHEN Junming ，ZHANG Baofei ，LU Binjie ，CAI
1， 2
1
1
1
1
1， 3
1
1
1， 2
Xuefeng ，CHEN Hua （1. Dept. of Orthopedics and Traumatology， Suzhou Hospital of TCM Affiliated to
Nanjing University of Chinese Medicine， Jiangsu Suzhou 215009， China；2. Orthopaedic Traumatology Institute，
Suzhou Academy of Wumen Chinese Medicine， Jiangsu Suzhou 215009， China；3. Dept. of Orthopedics and
Traumatology， Qufu Hospital of Traditional Chinese Medicine， Shandong Qufu 273100， China）
ABSTRACT OBJECTIVE To explore the effect and mechanism of Zhiqiao gancao decoction （ZQGCD） on pathological
angiogenesis of degenerative intervertebral disc. METHODS The rats were randomly divided into sham operation group （normal
saline）， model group （normal saline）， hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α） inhibitor （YC-1） group [2 mg/（kg·d）， tail vein
injection]， and ZQGCD low-dose， medium-dose and high-dose groups [3.06， 6.12， 12.24 g/（kg·d）]， with 8 rats in each group.
Except for sham operation group， lumbar disc degeneration model of rat was constructed in all other groups. After modeling， they
were given relevant medicine once a day， for consecutive 3
Δ 基金项目 国家自然科学基金项目（No.82174399）；苏州市科技
weeks. After the last medication， pathological changes and
发展计划项目（No.SKYD2023150，No.SYWD2024148）；江苏省研究生
angiogenesis of the intervertebral disc tissue in rats were
实践创新计划项目（No.SJCX24_1023）；第七批全国老中医药专家学
observed； the levels of inflammatory factors [interleukin-1β
术经验继承工作项目（No.国中医药人教函〔2022〕76号）
（IL-1β）， IL-6， tumor necrosis factor-α （TNF-α）] and the
＊第一作者 博士研究生。研究方向：中西医结合治疗骨伤科疾病
的临床与基础研究。E-mail：1127062302@qq.com expressions of angiogenesis-related proteins [HIF-1α， vascular
# 通信作者 副主任中医师，硕士生导师，硕士。研究方向：中西医 endothelial growth factor （VEGF） ， VEGF receptor 2
结合治疗骨伤科疾病的临床与基础研究。E-mail：chen20168@sina. （VEGFR2） ， angiotensin 1 （Ang 1） ， Ang 2] in the
com intervertebral disc tissue in rats were all determined. In cell

中国药房 2025年第36卷第7期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 7 · 807 ·