Page 98 - 《中国药房》2025年6期
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主要来自西方人群，且各因素对度洛西汀血药浓度的影                            1.2.2 血清样本采集及血药浓度测定方法
          响情况存在争议        [5―7] 。本研究基于治疗药物监测技术，                    待患者连续服用度洛西汀维持剂量达 5 个半衰期、
          探讨了患者的一般资料和用药情况对度洛西汀血药浓                             血药浓度达稳态后，采集谷浓度静脉血4 mL，离心后取
          度的影响，以期为度洛西汀的个体化用药提供科学                              100 µL 血清转移到 1.5 mL 离心管中，依次加入度洛西
          依据。                                                 汀-d7（内标，质量浓度 50 ng/mL）200 µL 和蛋白沉淀剂
          1 资料与方法                                             200 µL沉淀蛋白，再次离心，取100 µL上清液，采用高效
          1.1 一般资料                                            液相色谱-串联质谱仪对度洛西汀血药浓度进行检测。
              回顾性收集 2022 年 1 月至 2024 年 4 月在河北医科               度洛西汀血药浓度参考范围为 30～120 ng/mL，＞240
                                                                               [9]
          大学第一医院精神卫生科服用度洛西汀治疗并进行血                             ng/mL表示超警戒值 。
          药浓度监测的 434 例抑郁障碍住院患者的相关资料，包                             色谱柱为 ACQUITY UPLC BEH C18，以水（含 0.1%
          括患者性别、年龄、体重指数（body mass index，BMI）、日                甲酸）-甲醇（含 0.1% 甲酸）为流动相进行梯度洗脱（0～
                                                              0.5  min，20%B；0.5～0.6  min，20%B→45%B；0.6～1.8
          剂量、合并用药、药品类型（原研/仿制）、CYP2D6 和
                                                              min，45%B→80%B；1.8～1.9 min，80%B→95%B；1.9～
          CYP1A2基因型等。本研究方案经河北医科大学第一医
                                                              2.5  min，95%；2.5～2.6  min，95%B→20%A）。 流 速 为
          院临床研究伦理委员会批准，伦理审查批号：[2024]研审
                                                              0.4 mL/min，柱温为 40 ℃，进样量为 5 µL。采用电喷雾
         （099）号；本研究豁免患者知情同意。
                                                              离子源正离子扫描多反应监测模式，用于定量分析的离
              合并用药纳入了对 CYP2D6 和 CYP1A2 酶活性有
                                                              子对分别为 m/z 298.2→154.1（度洛西汀）、m/z 305.2→
          潜在影响的药物，如CYP2D6酶抑制剂氟西汀、奋乃静、
                                                              154.0（度洛西汀-d7）。
          舍曲林、安非他酮，CYP2D6和CYP1A2酶抑制剂氟伏沙
                                                                  经考察，度洛西汀和度洛西汀-d7 的保留时间均为
          明。其余无潜在相互作用的药物在临床治疗中正常使
                                                              1.67 min；度洛西汀的线性范围为 2.5～640.0 ng/mL，定
          用，不纳入本研究。
                                                              量下限为 2.5 ng/mL。度洛西汀血药浓度测定方法符合
              患者的纳入标准包括：（1）符合美国精神医学学会
                                                              2020年版《中国药典》（四部）通则“生物样品定量分析方
          编著的《精神疾病诊断与统计手册（第5版）》中抑郁症的
                                                              法验证指导原则”的要求。为消除剂量与其他因素间的
                  [8]
          诊断标准 ；（2）年龄 8～75 周岁，男女均可；（3）口服相
                                                              交 互 效 应 ，本 研 究 引 入 剂 量 校 正 后 血 药 浓 度
          同剂量度洛西汀（≥3 d）且采血时血药浓度已达稳态；
                                                             （concentration-to-dose，C/D）辅助分析各影响因素对度
         （4）进行了抗抑郁药物相关基因位点检测。
                                                              洛西汀血药浓度的影响。
              患者的排除标准包括：（1）对度洛西汀过敏或有禁
                                                              1.3 CYP2D6和CYP1A2的基因多态性检测
          忌证者；（2）肝、肾、心、肺等功能严重受损或合并疾病可
                                                                  采集患者空腹静脉血2 mL置于乙二胺四乙酸抗凝
          能妨碍本研究者；（3）孕妇、哺乳期及可能妊娠者；（4）因
                                                              管中，混匀，取 120 µL 使用核酸提取仪提取 DNA，并用
          药物依赖等其他原因影响本研究顺利开展者。
                                                              荧光计测定 DNA 浓度（要求不低于 10 ng/µL）。加入特
          1.2 血药浓度测定
                                                              异性引物对提取的 DNA 进行 PCR 扩增、延伸。经芯片
          1.2.1 主要药品与仪器
                                                              识读仪扫描后，应用 MassARRAY 微列阵分析软件判定
              盐酸度洛西汀肠溶胶囊仿制药（规格按 C18H19NOS                     所检测基因的基因型。所检测分析的相关位点为符合
          计 20、30、60  mg，国 药 准 字 H20203350、H20203351、         亚洲人群分布频率的CYP2D6基因相关位点（rs72549352、
          H20203352）购自石药集团欧意药业有限公司；盐酸度洛                       rs72549349、rs5030865、rs5030655、rs3892097、rs35742686、
          西汀肠溶胶囊原研药（规格按C18H19NOS计30、60 mg，国                   rs28371725、rs16947、rs1135840、rs1135822、rs1065852）
          药准字 H20150284、H20150287）购自美国 Eli Lilly and          和CYP1A2基因相关位点（rs762551、rs2069514）的分型。
          Company。                                            依据不同单核苷酸多态性（single nucleotide polymor‐
              ACQUITIY-X 型高效液相色谱-串联质谱仪购自美                     phism，SNP）突变的分型结果定义不同的等位基因类型，
          国 Waters 公司，DP-TOF 型飞行时间质谱仪购自杭州迪                    如 CYP2D6*2 为 rs1135840  C＞G 和 rs16947  G＞A；
          普科技股份有限公司，NP968-C型核酸提取仪购自苏州                         CYP2D6*4 为 rs3892097 C＞T，CYP2D6*10 为 rs1135840
          天 隆 生 物 科 技 有 限 公 司 ，Qubit 型 荧 光 计 购 自 美 国          C＞G、rs1065852 G＞A 等   [10―12] 。其中，CYP2D6 基因涉
          Thermo Fisher Scientific 公司，A200 型聚合酶链反应            及拷贝数变异，根据药物基因组学知识库（Pharmacoge‐
         （PCR）仪购自杭州朗基科学仪器有限公司，DP-TOF 型                        nomics  Knowledge  Base，PGKB）中 CYP2D6 基 因 功 能
          飞行时间质谱检测系统专用芯片购自浙江迪谱诊断技                             表，通过分型结果计算活性评分进而得到基因表型
                                                                  [13]
          术有限公司。                                              结果 。

          · 728 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 6                               中国药房  2025年第36卷第6期
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