Page 41 - 《中国药房》2025年6期
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非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty live di-        （日本 Olympus 公司）、Milli-Q EQ 7008 型超纯水机（美
          sease，NAFLD）是以肝细胞脂质蓄积为主要病理改变的                      国Millipore公司）等。
          肝脏代谢性疾病 。研究表明，肝脏代谢功能紊乱可使                           1.2 主要药品与试剂
                        [1]
                                                       [2]
          大量脂质蓄积于肝细胞内，从而引发一系列病理改变 。                              三 七 丹 参 片 [ 滇 字 制 药（A）20091965A，专 利 号
          当肝脏受到损伤而发生脂质代谢紊乱时，脂质将在肝内                           89113176.4，批号 20230320，规格 0.26 g]由我院药学部
          蓄积，当脂质积累到一定程度可导致脂肪变性，进而诱                           提供；辛伐他汀片（批号A23011403，规格20 mg）购自浙
          发炎症反应和氧化应激反应，进一步加重脂质在肝脏中                           江京新药业股份有限公司；饱和油红 O 染色液（批号
          的积累，最终引发NAFLD        [3―4] 。                       G1206）购自北京索莱宝科技有限公司；苏木精-伊红
              美国肝病研究学会发布的《NAFLD 临床评估和管                      （HE）染色液（批号 MB9898）购自大连美仑生物科技有
          理指南》和中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病                           限公司；TC、TG、AST、ALT、超氧化物歧化酶（supero-
          学组等发布的《非酒精性脂肪性肝病防治指南（2018 更                        xide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）
          新版）》均指出，NAFLD 的主要治疗手段包括生活方式
                                                             试 剂 盒（批 号 分 别 为 A111-1-1、A110-1-1、C010-2-1、
          干预、手术治疗及药物干预等            [5―6] 。其中，生活方式干预
                                                             C009-2-1、A001-3、A003-1）均购自南京建成生物工程研
          仅对少部分患者有效，仅有不足10%的肥胖患者在1年
                                                             究所；肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、
                      [5]
          内能减重10% ；手术治疗具有侵入性强、费用昂贵的特
                                                             白细胞介素17（interleukin-17，IL-17）酶联免疫吸附测定
          点，主要适用于经其他手段治疗无效的或终末期患者；
                                                            （ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为 CSB-E11987r、CSB-
          同时，上述指南均未推荐用于NAFLD治疗的特效药物，
                                                             E0745r）均购自武汉华美生物工程有限公司。
          仅推荐了用于NAFLD相关合并症（如肥胖、高血压、2型
                                                             1.3 实验动物与饲料
          糖尿病、血脂紊乱、痛风等）的治疗药物，主要包括降糖
                                                                 本 研 究 所 用 动 物 为 SPF 级 雄 性 SD 大 鼠 ，体 重
          药（二甲双胍、吡格列酮、利拉鲁肽）、降脂药（贝特类、他
                                                            （180±20）g，购自昆明医科大学实验动物学部，生产许
          汀类）以及保肝药（双环醇、多烯磷脂酰胆碱、水飞蓟素）
                                                             可证号为 SCXK（滇）K2020-0004。所有大鼠均饲养于
          等 [6―7] 。可见，研发有效、安全的 NAFLD 治疗药物成为
                                                             SPF级动物房[温度（22±2）℃、相对湿度55%、每12 h光
          当前学界亟待解决的问题。
                                                             照/黑暗循环]内，自由摄食、饮水。普通饲料和60%高脂
              三七丹参片由三七、丹参、香附组成，是昆明医科大
                                                             饲料（蛋白质、脂肪、碳水化合物热量分别占20%、60%、
          学第一附属医院（以下简称“我院”）研发的院内制剂。
                                                             20%）均购自江苏省协同医药生物工程有限公司。本研
          该药的主要成分包括三七总皂苷、丹参酮ⅡA等，其中三
                                                             究方案获昆明医科大学动物实验伦理审查委员会批准，
          七总皂苷可通过抑制血清总胆固醇（total cholesterol，
                                                             批准号为kmmu20231490。
          TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、天冬氨酸转氨酶（as‐
                                                             2 方法与结果
          partate transaminase，AST）、丙氨酸转氨酶（alanine tran-
                                                             2.1 网络药理学研究
          saminase，ALT）及肝脏指数的异常升高来减轻 NAFLD
          大鼠的肝脂肪变性，从而发挥肝脏保护作用                  [8―9] ；丹参酮    2.1.1 三七丹参片治疗NAFLD的潜在作用靶点筛选
          ⅡA 可通过抑制肝细胞铁死亡、下调肝组织中活性氧                               首先，采用 TCMSP 数据库（http：//lsp.nwu.edu.cn/
         （reactive oxygen species，ROS）表达、减少肝组织中脂质            tcmsp.php）检索三七丹参片主要药材三七、丹参、香附中
                          [10]
          蓄积来改善NAFLD 。此外，本课题组前期开展的前瞻                         的有效成分，以口服利用度≥30%和类药性≥0.18为条
                                                               [12]
          性真实世界研究结果显示，三七丹参片可改善 NAFLD                         件 ，筛选出三七丹参片的活性成分，共 78 种。利用
          患者的肝功能，调节其血脂水平，疗效显著 ，但具体作                          TCMSP数据库进一步检索所得活性成分对应的目标蛋
                                              [11]
          用机制不明确。基于此，本研究拟采用网络药理学方法                           白，即活性成分的预测靶点，共 249 个。然后，以“non-
          预测三七丹参片治疗 NAFLD 的潜在靶点，再通过动物                        alcoholic fatty liver disease”“NAFLD”为关键词，在Gene-
          实验进行初步验证，旨在明确三七丹参片改善 NAFLD                         Cards 数据库（https：//www.Genecards.org）、OMIM 数据
          的潜在机制，为该药的合理安全应用及 NAFLD 相关治                        库（https：//omim.org/）和 DrugBank 数据库（https：//www.
          疗药物的研发提供参考。                                        drugbank.com/）中检索疾病靶点，对检索结果进行整合，
          1 材料                                               获得 NAFLD 相关靶点，共 1 128 个。最后，将上述所得
          1.1 主要仪器                                           三七丹参片活性成分靶点和NAFLD相关靶点进行映射
              本研究所用主要仪器包括Feyond-A300型酶联免疫                    取交集，即得三七丹参片活性成分治疗 NAFLD 的潜在
          分析仪（杭州奥盛仪器有限公司）、CX23 型光学显微镜                        作用靶点，共99个。


          中国药房  2025年第36卷第6期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 6    · 675 ·
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