Page 37 - 《中国药房》2025年6期
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          HYP 干预前先用 10 mmol/L 的 GW6471 干预 24 h 。随            见表2。
          后，按相应试剂盒说明书方法进行操作：经油红 O 染色                               表2 各组小鼠生化指标比较（x±s，n＝8）
          后使用显微镜观察细胞内的脂滴蓄积情况，用 Image J                        组别    血清AST/（U/L）  血清ALT/（U/L）  血清TAG/（mmol/L） 肝组织TAG/（mmol/g prot）
                                                              NFD组   52.77±7.34  5.94±2.85  1.32±0.29  9.04±3.25
          软件分析单位面积内的脂滴，并计算相对脂滴面积占
                                                              HFD组   67.56±14.73 a  39.58±14.66 a  2.38±0.28 a  25.20±5.04 a
          比；检测细胞内TAG含量。                                       HYP组   46.75±12.12 b  23.16±10.96 b  1.76±0.33 b  10.51±2.88 b
          2.8 统计学方法                                             a：与NFD组比较，P＜0.05；b：与HFD组比较，P＜0.05。
              采用GraphPad Prism 8软件进行统计学分析和图表                 3.4 各组小鼠脂质代谢差异分析结果
          绘制。符合正态分布的计量资料以x±s表示，多组间比                              正交偏最小二乘判别分析结果显示，NFD组与HFD
          较采用单因素方差分析，方差齐时组间两两比较采用                            组、HFD组与HYP组组间区分明显，说明各组间肝脏脂
          LSD-t检验，方差不齐时组间两两比较则采用Tamhane’s                    质组成存在差异，结果见图2。
          T2检验。检验水准α＝0.05。                                              Scores Plot             Scores Plot
          3 结果                                                  100                HFD组  60                HFD组
                                                                                   NFD组
                                                                                                           HYP组
          3.1 各组小鼠体重和肝脏质量测定结果                                 （ 41% ）  50              （ 39.9% ）  40
              与 NFD 组比较，HFD 组小鼠的体重和肝脏质量均                                                20
          显著升高（P＜0.05）；与HFD组比较，HYP组小鼠的体重                      Orthogonal T score[1]  0  Orthogonal T score[1]  －20 0
          差异无统计学意义，肝脏质量显著降低（P＜0.05）。结                          －50                     －40
          果见表1。                                                                        －60
                                                              －100
            表1 各组小鼠体重和肝脏质量比较（x±s，n＝8）                              －20            0            20           40  －30     －10            0      10           30
                                                                      T score[1]（14.2%）      T score[1]（13.8%）
          组别                 体重/g             肝脏质量/g                A. NFD组与HFD组            B. HFD组与HYP组
          NFD组              30.84±1.70        1.17±0.17      图2 各组小鼠肝脏脂质组学的正交偏最小二乘判别分
          HFD组              36.78±1.76 a      1.45±1.14 a
          HYP组              36.61±2.38        1.14±0.16 b         析结果
             a：与NFD组比较，P＜0.05；b：与HFD组比较，P＜0.05。                  分析各组之间的差异脂质代谢物发现，NFD 组和
          3.2 各组小鼠肝组织病理形态学及脂质堆积观察结果
                                                             HFD组共有139个差异脂质代谢物，其中73个脂质代谢
              HE 染色结果显示，与 NFD 组比较，HFD 组小鼠肝
                                                             物上调，66 个脂质代谢物下调；HFD 组和 HYP 组共有
          脏可见较多的脂肪空泡和炎症细胞浸润，肝索不清晰，
                                                             199个差异脂质代谢物，其中13个脂质代谢物上调，186
          肝小叶结构模糊；与HFD组比较，HYP组小鼠的病理形
                                                             个脂质代谢物下调。评估脂质代谢物不同组别的贡献
          态学变化均有所缓解，脂肪空泡数量明显减少。油红O
                                                             程度发现，HFD 组上调的脂质类型涉及 TAG、鞘磷脂
          染色结果显示，与NFD组比较，HFD组小鼠肝脏中的脂
                                                            （sphingomyelin，SM）、二酰甘油（diacylglycerol，DAG）
          质堆积明显增加；与HFD组比较，HYP组小鼠肝脏中的
                                                             等；HYP组下调的脂质代谢物类型主要涉及TAG、DAG
          脂质堆积明显减少。结果见图1。
                                                             等。结果见图3。
                                                                 对 NFD 组、HFD 组和 HYP 组差异脂质代谢物的交
           HE染色                                              集进行分析发现，HFD组主要上调了TAG、DAG等脂质

                                                             代谢物的相对水平；而HYP组能够降低TAG、DAG等脂
                                                             质代谢物的相对水平，从而改善肝脏脂质堆积。
           油红O染色                                             3.5 各组小鼠肝组织中PPARα蛋白表达检测结果
                                                                 与 NFD 组比较，HFD 组小鼠肝组织中 PPARα 蛋白

                                                             表达水平显著降低（1.00 vs. 0.59±0.07，P＜0.05）；与
               A. NFD组         B. HFD组        C. HYP组
                                                             HFD 组比较，HYP 组小鼠肝组织中 PPARα 蛋白表达水
             黑色箭头：脂肪空泡；蓝色箭头：脂滴。
          图1 各组小鼠肝脏病理显微图（HE染色和油红O染色）                         平显著升高（0.59±0.07 vs. 1.11±0.04，P＜0.05）。结果
          3.3 各组小鼠生化指标检测结果                                   见图4。
              与NFD组比较，HFD组小鼠血清中AST、ALT、TAG                   3.6 HYP介导PPARα调控脂质合成的机制验证结果
          含量和肝组织中 TAG 含量均显著升高（P＜0.05）；与                      3.6.1 HYP干预浓度筛选结果
          HFD组比较，HYP组小鼠血清中AST、ALT、TAG含量和                         HepG2细胞用0、10、100、1 000 μmol/L HYP干预后
          肝 组 织 中 TAG 含 量 均 显 著 降 低（P＜0.05）。 结 果             其 细 胞 活 力 分 别 为（1.00±0.11）% 、（1.02±0.48）% 、


          中国药房  2025年第36卷第6期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 6    · 671 ·
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