Page 54 - 《中国药房》2025年4期

胞黏附的调节和细胞信号的接收、传递；claudin-1 与 oc‐
Nrf2 120 kDa
cludin结构类似，也是一种跨膜蛋白，参与构成肠道渗透
p-AMPK 62 kDa
[10]
性屏障，两者均是肠道上皮屏障完整性的标志物 。本
AMPK 62 kDa
研究结果显示，与对照组比较，模型组小鼠结肠长度显
HO-1 28 kDa
著缩短，体重有所减轻，结肠组织病理学评分显著升高，
β-actin 42 kDa 结肠组织中occludin、claudin-1蛋白的表达均显著下调；
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ 经芍药苷干预后，小鼠结肠长度有所恢复，体重有所增
A. Nrf2、p-AMPK、AMPK、HO-1
加，结肠病理学损伤得以减轻且组织病理学评分显著降
occludin 59 kDa
低，occludin、claudin-1 蛋白的表达均显著上调。透射电
claudin-1 23 kDa
子显微镜观察结果也显示，经芍药苷干预后，小鼠肠上
β-actin 42 kDa
皮细胞间紧密连接的受损情况得以明显改善，连接紧密
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ 度增加，细胞间隙缩窄，微绒毛排列整齐，提示芍药苷能
B. occludin、claudin-1
Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：抑制剂组；Ⅳ：芍药苷高+抑制剂组； 修复结肠组织中肠上皮细胞的紧密连接。
Ⅴ：芍药苷高剂量组；Ⅵ：芍药苷中剂量组；Ⅶ：芍药苷低剂量组。 AMPK/Nrf2 是调控机体氧化还原稳态的重要信号
图6 芍 药 苷 对 小 鼠 结 肠 组 织 中 p-AMPK、AMPK、 通路。当机体发生氧化应激时，作为氧化还原感应器的
Nrf2、HO-1、occludin、claudin-1 蛋白表达影响的 Nrf2 与 Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白 1 迅速解离，然后
电泳图 转移至细胞核并与抗氧化相应元件结合，促进抗氧化分
[11]
表4 芍 药 苷 对 小 鼠 结 肠 组 织 中 p-AMPK、AMPK、 子（HO-1、SOD 和 GSH-Px 等）的合成和释放 。其中，
Nrf2、HO-1、occludin、claudin-1 蛋白表达的影响 HO-1 作为抗氧化酶类的重要一员，主要参与催化血红
（x±s，n＝6） 素的分解代谢，由此产生的胆绿素、胆红素具有清除活
组别 p-AMPK/AMPK Nrf2/β-actin HO-1/β-actin occludin/β-actin claudin-1/β-actin 性氧的作用；MDA是脂质过氧化产物，其水平的高低可
对照组 0.93±0.02 1.28±0.10 1.41±0.04 1.30±0.04 1.46±0.04 反映细胞氧化应激损伤的严重程度；SOD作为一种重要
模型组 0.45±0.01 a 0.57±0.00 a 0.95±0.07 a 0.89±0.08 a 0.74±0.01 a
抑制剂组 0.26±0.01 b 0.32±0.03 b 0.51±0.03 b 0.46±0.05 b 0.61±0.02 b 的内源性抗氧化剂，可保护组织免受活性氧的损伤；
芍药苷低剂量组 0.64±0.01 b 0.65±0.01 b 1.04±0.02 b 1.24±0.04 b 1.06±0.05 b GSH-Px 作为一种体内广泛存在的过氧化物分解酶，其
芍药苷中剂量组 0.76±0.03 b 0.65±0.01 b 1.25±0.06 b 1.24±0.02 b 0.97±0.02 b 能催化有毒的谷胱甘肽转变为无毒的氧化型谷胱甘肽，
芍药苷高剂量组 0.84±0.01 b 0.78±0.02 b 1.38±0.03 b 1.42±0.07 b 1.27±0.02 b [12―13]
芍药苷高+抑制剂组 0.50±0.01 c 0.63±0.02 c 1.38±0.09 1.06±0.05 c 1.18±0.03 c 从而使细胞膜的结构和功能免受过氧化物的损伤 。
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与芍药苷 本研究结果显示，与对照组比较，模型组小鼠结肠组织
高剂量组比较，P＜0.01。 中MDA含量显著升高，SOD、GSH-Px活性均显著降低，
4 讨论 Nrf2、HO-1蛋白及Nrf2 mRNA的表达均显著下调；经芍
UC 是一种常见的消化系统疾病，近年来随着人们 药苷干预后，小鼠结肠组织中 MDA 含量显著降低，
饮食结构的变化，其患病率逐年增加。由于 UC 具有病 SOD、GSH-Px 活性均显著升高，Nrf2、HO-1 蛋白和 Nrf2
因复杂和病情反复发作的特征，现有药物难以将其有效 mRNA 的表达均显著上调，提示芍药苷可增加 UC 小鼠
治愈，因此迫切需要开发安全有效的新药物。本研究基 的抗氧化能力，减轻氧化应激。相关研究表明，激活
于 AMPK/Nrf2 信号通路初步探讨了芍药苷对 UC 小鼠 Nrf2、HO-1等抗氧化应激蛋白可有效缓解UC的病情进
[2]
氧化应激的影响及潜在机制，旨在为芍药苷的应用和 展 ，本研究上述结果也支持这一观点。
UC治疗药物的研发提供参考。 AMPK 是细胞能量稳态的调节器，参与代谢、氧化
DSS 自由饮用法具有操作简便、重复性好、成功率 应激、炎症、凋亡和自噬等生理病理过程的调节。已有
高、病变与人类UC相似的优点，已被广泛应用于UC相 研究表明，芹菜素、芍药苷等多种活性成分可通过激活
关研究领域 。研究指出，DSS 可通过损伤肠上皮细胞 AMPK（即使其磷酸化）来促进 Nrf2 核易位，增加核内
[8]
间的紧密连接和基底膜，从而增加肠道渗透性，使病原 Nrf2的积累，促进抗氧化酶的表达，减轻氧化应激，从而
[14]
[2]
体进入肠道壁内，激活免疫炎症反应，最终诱导 UC 。 治疗哮喘和脓毒症等多种疾病 。基于此，本研究采用
研究证实，肠道上皮功能障碍是 UC 发生和复发的重要 AMPK 抑制剂 Compound C 进行干预，考察芍药苷缓解
因素，而紧密连接则是决定肠道上皮屏障功能能否正常 UC 小鼠氧化应激的作用是否与调节 AMPK/Nrf2 通路
[9]
发挥的关键 。紧密连接涉及 occuludin、claudin-1、闭锁 有关。结果显示，当腹腔注射抑制剂后，小鼠结肠组织
小带蛋白及连接黏附分子等结构蛋白。其中，occludin 病理改变、肠上皮细胞间紧密连接程度及各定量指标与
是一种跨膜蛋白，不仅参与肠上皮渗透性屏障的形成、 模型组相当或更差；在灌胃高剂量芍药苷的基础上联用
小分子物质运输的调节、细胞极性的维持，而且参与细 抑制剂后，芍药苷对 UC 小鼠氧化应激的改善作用则被

· 432 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 4 中国药房 2025年第36卷第4期