Page 50 - 《中国药房》2025年4期
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0.05 or P<0.01). In contrast, the inhibitor group showed comparable (P>0.05) or worse (P<0.05 or P<0.01) indicators
compared to the model group. Conversely, the addition of AMPK inhibitor could significantly reverse the improvement of high-
dose paconiflorin (P<0.01). CONCLUSIONS Paeoniflorin can repair intestinal epithelial cell damage in mice, improve tight
junctions between epithelial cells, upregulate the expression of related proteins, and promote the expression and secretion of
antioxidant-promoting molecules, thereby ameliorating UC; its mechanism may be associated with activating AMPK/Nrf2
antioxidant pathway.
KEYWORDS paeoniflorin; ulcerative colitis; oxidative stress; AMPK/Nrf2 pathway
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种反复发 多功能酶标仪(德国 BMG Labtech 公司),HT7700 型透
作的慢性炎症性肠病,可从远端开始向近端延伸直至累 射电子显微镜(日本Hitachi公司),RM2016型病理切片
及整个结肠,以腹泻、腹痛、里急后重、黏液脓血便和体 机(上海徕卡仪器有限公司),PowerPac 型电泳仪、小型
重减轻等为主要临床表现。近年来,UC 的患病率和复 电泳槽和转印槽(美国Bio-Rad公司),OI 600MF型全自
发率逐年上升,尽管其病因尚不清楚,但有研究证实, 动化学发光凝胶成像系统(广州光仪生物科技有限公
UC的发生与遗传因素、环境因素、个体因素(机体炎症、 司)等。
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氧化应激、免疫失衡)密切相关 。在UC炎症反应期,炎 1.2 主要药品与试剂
症细胞可募集到损伤部位,使得耗氧量增加、氧自由基 芍药苷对照品(批号 S31585,纯度>98%)、AMPK
生成增多;同时,炎症细胞还可分泌促炎因子,进一步刺 抑制剂 Compound C 的对照品(批号 S24HS195965,纯
激活性氧的产生,从而导致机体发生氧化应激反应,致 度>98%)均购自上海源叶生物科技有限公司;葡聚糖
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使肠道黏膜屏障受损 。腺苷一磷酸活化的蛋白激酶 硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS;批号S8634)购自美
(adenosine monophosphate-activated protein kinase, 国 MP 公司;丙二醛(malondialdehyde,MDA)酶联免疫
AMPK)/核转录因子红系 2 相关因子 2(nuclear factor- 吸附测定(ELISA)试剂盒(批号YX-130401M)购自上海
erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是重要的抗炎和抗氧化 优选生物科技有限公司;超氧化物歧化酶(superoxide
信号通路,激活此通路可减少促炎因子释放、减轻机体 dismutase,SOD)试剂盒(批号 S0101M)、谷胱甘肽过氧
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氧化应激损伤,从而缓解UC症状 。 化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒(批号
目前,临床治疗 UC 的常规药物效果有限且毒副作 S0059S)均购自上海碧云天生物技术股份有限公司;苏
用大,患者复发率极高,而天然植物及其单体具有疗效 木精-伊红(HE)染液(批号G1005)购自北京索莱宝科技
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好、副作用少的优点,备受学界关注 。芍药苷作为中药 有限公司;BCA蛋白质定量试剂盒(批号AR1110)、鼠源
白芍的主要活性成分,在多种治疗 UC 的方剂中广泛存 β-肌动蛋白(β-actin)抗体(批号 BM0627)均购自德国
在,具有抗炎、抗氧化、调节免疫等药理活性 。本课题 Boster Biological公司;兔源AMPK、Nrf2、血红素加氧酶
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组前期研究表明,芍药苷可降低 UC 小鼠血清中肿瘤坏 1(heme oxygenase-1,HO-1)、闭合蛋白(occludin)、密封
死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素 蛋白 1(claudin-1)抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的
6(interleukin-6,IL-6)等促炎因子水平,上调 AMPK、自 羊 抗 兔 、羊 抗 鼠 IgG 二 抗(批 号 分 别 为 10929-2-AP、
噬 相 关 蛋 白 Beclin-1、微 管 相 关 蛋 白 1 轻 链 3 16396-1-AP、 10701-1-AP、 27260-1-AP、 10305-1-AP、
(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3) SA00001-2、SA00001-1)均购自美国 Proteintech公司;兔
mRNA的表达,下调哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mamma‐ 源磷酸化 AMPK(phosphorylated AMPK,p-AMPK)抗体
lian target of rapamycin,mTOR)、p62 mRNA 的表达,增 (批号CY5608)购自美国Abways公司;高灵敏度ECL化
强细胞自噬,减轻 UC 小鼠的肠黏膜损伤,缓解 UC 症 学发光试剂盒(批号 20230406)购自南京建成生物工程
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状 。考虑到芍药苷具有较强的抗氧化作用,而氧化应 研究所;电镜固定液(批号G1102)购自武汉谷歌生物科
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激是UC发生发展的重要因素之一 ,故本研究拟从氧化 技有限公司。
应激角度探讨芍药苷对 UC 小鼠的影响及潜在机制,以 1.3 实验动物
期为芍药苷用于UC治疗及相关药物研发提供参考。 本研究选用 SPF 级雄性 BALB/c 小鼠 56 只,体重为
1 材料 (20±2)g,购自辽宁长生生物技术股份有限公司,动物
1.1 主要仪器 生产许可证号为 SCXK(辽)2020-0001。所有动物均在
本研究所用主要仪器包括2720 Thermal Cycler型聚 温度(20±5)℃、相对湿度30%~50%、每12 h自然光照/
合酶链式反应(PCR)仪、7300 型实时荧光定量 PCR 仪 黑暗循环条件下饲养。本实验方案已通过长春中医药
(美国 Applied Biosystems 公司),SPECTROstar Nano 型 大学实验动物伦理委员会审批(批准编号2023477)。
· 428 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 4 中国药房 2025年第36卷第4期