Page 89 - 《中国药房》2024年24期
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1.4 基因检测方法                                         表2 阿片类镇痛药药效及 ADR 强相关的 SNP 位点及
              以患者口腔脱落细胞作为检测样本 ，采用荧光原                              其推荐强度
                                             [6]
          位杂交法进行 SNP 位点分析。具体检测方法如下：（1）                                                                  PharmGKB
                                                              SNP位点         位点类型 基因多态性与药效及ADR的相关性
          使用咽拭子采集待检患者口腔脱落细胞；（2）将 400 μL                                                                 推荐强度
                                                              CYP2D6*10（rs1065852，C＞T） 代谢相关 其快代谢型对吗啡等阿片类镇痛药的需求量可能减  1A级
          CQ-ENH 型样本萃取液加至咽拭子管中；（3）充分振荡
                                                                                 少，超快代谢型容易增加可待因毒性；可能与胃肠系
          混匀后将萃取液移至 1.5 mL 离心管中；（4）以 12 000                                      统损害、神经系统损害、呼吸系统损害等毒性反应有
          r/min 离心 5 min 后待检；（5）取 1.0 μL 上层样本液上机                                 关，其中与可待因、曲马多的相关性更密切 [7]
          检测；（6）采用双Z型探针进行荧光原位杂交，即由两个                          CYP3A5*3（rs776746，A＞G） 代谢相关 其基因多态性可能导致CYP3A5酶活力下降，引起羟  3级
                                                                                 考酮等阿片类镇痛药的镇痛效果增强；可导致ADR
          独立的Z型探针通过串联方式与靶序列特异性杂交，随
                                                                                 发生率升高；可能与胃肠系统损害、神经系统损害、呼
          后使信号放大前体序列能够与双 Z 型探针上游区域的                                              吸系统损害等毒性反应有关 [8―9]
          28 个碱基特异性结合，从而引发序列立体构型的变化，                          ABCB1（rs1045642，C＞T）  转运相关 其基因多态性与吗啡缓解疼痛的疗效可能相关，其中  3级
          最终实现信号的放大；（7）输出检测位点信息。上述检                                              TT型对吗啡的需求量减少；与阿片类镇痛药引起的
                                                                                 呼吸抑制有关，也可能与其他系统损害的增加有关 [10]
          测通过Fascan 48S型多通道荧光定量分析仪（西安天隆                       OPRM1（rs1799971，A＞G）  作用靶点 其基因多态性与阿片类镇痛药的镇痛效果相关；与胃  3级
          科技有限公司）进行，基因检测通用试剂购自济南广音                                          相关   肠系统损害、呼吸系统损害等毒性反应有关 [11]
          医疗科技有限公司。                                          意义（P＞0.05），具有可比性。具体信息见表3。
          1.5 统计学方法
                                                                表3 ADR评价组两亚组入组患者一般资料比较
              采用 SPSS 21.0 软件对检测结果进行数据统计分
                                                              项目           试验亚组（n＝126）  对照亚组（n＝128）       t/χ  2  P
          析。计量资料若服从正态分布，以 x±s 表示，组间比较                         年龄（x±s）/岁      66.20±5.30  65.30±6.40  1.058  0.403
          行t检验；若服从偏态分布，则以M（Xmin，Xmax ）表示，组间                   性别（男性/女性）/例（%）  66（52.38）/60（47.62）  63（49.22）/65（50.78）  0.881  0.614
                                                                     2
          比较行秩和检验。计数资料以例数或占比表示，组间比                            BMI（x±s）/（kg/m）  17.97±4.12  18.12±4.64  0.198  0.917
                                                              NRS评分（x±s）/分   6.46±1.14   6.29±1.10  －1.498  0.135
                2
          较行χ 检验。检验水准α＝0.05。
                                                              镇痛药物日剂量（x±s）/mg  70.05±10.25  67.80±9.50  1.521  0.131
              使 用 SNPStats 工 具（https：//www. snpstats. net/
                                                             2.2.2 药物需求量评价组
          snpstats/start.htm）对组间比较有差异的 SNP 位点进行                  为进行用量比较，本研究将患者所使用的盐酸羟考
          Logistic 回归分析，同时应用 Kolmogorov-Smirnov 检验
                                                             酮缓释片/胶囊及盐酸吗啡缓释片/注射液均统一换算为
          进行遗传模型校准验证，若校准后的P＜0.05，则认为该                        口服吗啡的用量——以口服吗啡日剂量100 mg为界，高
          位点与 ADR 或阿片类镇痛药需求量存在明显的相
                                                             剂量组为试验亚组（日剂量≥100 mg），低剂量组为对照
          关性。
                                                             亚组（日剂量＜100 mg）。按照纳排标准筛选入组患者，
          2 结果                                               最终两亚组各纳入 60 例。两亚组患者在本研究持续期
          2.1 基因位点筛选结果
                                                             间其电子病历中均无使用阿片类镇痛药发生严重 ADR
              本研究共检索到 9 个相关 SNP 位点。根据证据级
          别和研究质量对9个SNP位点进行初步评价，评价结果                          的记录，且在性别、年龄、BMI、初始 NRS 评分方面的差
                                                             异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。具体信息
          为强相关和可能相关。最终将 CPIC 评级为 B 级及以
                                                             见表4。
          上、PharmGKB 评级为 3 级及以上以及偏倚风险低的 4
                                                             表4 药物需求量评价组两亚组入组患者一般资料比较
          个 SNP 位点列为阿片类镇痛药药效及 ADR 强相关位
                                                              项目            试验亚组（n＝60）   对照亚组（n＝60）      t/χ  2  P
          点，其分别为：CYP2D6*10（rs1065852，C＞T）、CYP3A5*3
                                                              年龄（x±s）/岁      62.20±10.10  61.50±9.40  1.621  0.105
         （rs776746，A＞G）、ABCB1（rs1045642，C＞T）、OPRM1            性别（男性/女性）/例（%）  31（51.67）/29（48.33）  30（50.00）/30（50.00）  0.002  1.005
         （rs1799971，A＞G）。具体信息见表2。                             BMI（x±s）/（kg/m）  17.80±5.20  18.20±3.60  －1.581  0.114
                                                                     2
          2.2 患者入组情况                                          NRS评分（x±s）/分    7.20±2.10   6.90±2.50  1.127  0.263
          2.2.1 ADR评价组                                       2.3 基因多态性与阿片类镇痛药ADR的相关性分析
              因吗啡、可待因等其他阿片类镇痛药使用较少，故                             对ADR评价组中两亚组患者的检出基因型分布情
          本研究按照纳排标准筛选使用药物均为盐酸羟考酮缓                            况和等位基因分布频率进行统计分析，结果见表 5。由
          释片/胶囊的患者进入 ADR 评价组。最终 ADR 评价组                      表5可知，试验亚组与对照亚组患者的等位基因分布频
          的试验亚组纳入患者 126 例，其 ADR 具体表现包括：便                     率均符合 Hardy-Weinberg 遗传平衡，具有群体代表性。
          秘、尿潴留 68 例，恶心、呕吐、腹胀 43 例，皮疹或皮肤瘙                    试验亚组中，OPRM1（rs1799971，A＞G）AA 型占比为
          痒25例，胸闷、憋喘或窒息感9例（部分患者存在多个临                         56.35%，AG+GG型占比为43.65%；对照亚组中，OPRM1
          床表现）；对照亚组纳入患者128例，在本研究持续期间                        （rs1799971，A＞G）AA 型占比为 38.28%，AG+GG 型占
          其电子病历中无使用羟考酮后发生ADR的记录。两亚                           比为 61.72%。与对照亚组比较，试验亚组中 OPRM1
          组患者在性别、年龄、体重指数（body mass index，BMI）、              （rs1799971，A＞G）AA 型占比更高（P＜0.05）。两组间
          初始NRS评分、镇痛药物日剂量方面的差异均无统计学                          其余基因型分布的差异均无统计学意义（P＞0.05）。


          中国药房  2024年第35卷第24期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 24    · 3043 ·
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