Page 56 - 《中国药房》2024年15期

improve lung function， Th17/Treg immune imbalance and inflammatory response， and alleviate pathological injury and fibrosis of
lung tissue in asthmatic mice by inhibiting the Notch signaling pathway.
KEYWORDS vitexin； Notch signaling pathway； asthma； lung fibrosis； Th17/Treg immune imbalance； inflammation

哮喘是支气管哮喘的简称，作为一种慢性气道炎症 氧化铝（批号 A7130）、高效 RIPA 裂解液（批号 R0010）、
疾病，其可引起气道高反应及呼吸气流受限，导致胸闷 苏木素-伊红（HE）染色试剂盒（批号 G1120）、红细胞裂
气短、咳嗽喘息等症状。近年来，全球范围内哮喘发生 解液（批号 R1010）、二喹啉甲酸（BCA）试剂盒（批号
率与病死率均逐渐升高，已成为当前公共健康的主要威 PC0050）、Masson 染色试剂盒（批号 G1340）均购自北京
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胁之一 。研究表明，多种炎症细胞、细胞组分、细胞信 索莱宝科技有限公司；异硫氰酸荧光素（fluorescein iso‐
号共同参与哮喘的发病过程，其中辅助性 T 细胞 17（T thiocyanate，FITC）标记的抗小鼠 CD4 抗体（批号 11-
helper cell 17，Th17）/调节性 T 细胞（T regulatory cell， 0041-82）、藻红蛋白（phycoerythrin，PE）标记的抗小鼠
Treg）免疫失衡引发的强烈炎症是哮喘的重要致病基 IL-17 抗体（批号 12-9171-80）均购自美国 Invitrogen 公
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础 。而Notch信号通路可调节免疫功能，介导免疫T细 司；小鼠 IL-18 酶联免疫吸附检测（enzyme-linked immu‐
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胞分化，影响Th17/Treg免疫平衡 。由此可知，Notch信 nosorbent assay，ELISA）试剂盒（批号 ab216165）、IL-6
号通路是哮喘的一个重要治疗靶点。 ELISA试剂盒（批号ab222503）、IL-17 ELISA试剂盒（批
吸入糖皮质激素、行支气管热成形术、给予靶向生 号 ab100702）、IL-10 ELISA 试剂盒（批号 ab255729）、兔
物制剂为哮喘的临床常用治疗手段，但其疗效不够确 源 Notch1 一 抗（批 号 ab52627）、兔 源 Delta 样 配 体 4
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切，且部分患者对糖皮质激素不敏感 。因此，探寻哮喘 （Delta-like ligand 4，DLL4）一抗（批号 ab245848）、兔源
的中医药治疗手段具有重要的临床意义。牡荆素是一 发状分裂相关增强子 1（hairy and enhancer of split 1，
种天然黄酮类化合物，提取自牡荆叶和牡荆子，具有较 Hes1）一抗（批号 ab108937）、兔源 β-肌动蛋白（β-actin）
好的消炎止痛、祛痰止咳功效，其不仅可通过抑制细胞 一抗（批号ab115777）、羊抗兔二抗（批号ab150077）均购
外调节蛋白激酶信号通路的激活而减弱脂多糖诱导的 自美国Abcam公司。
人牙髓干细胞炎症因子[如白细胞介素 1β（interleukin- 1.3 动物
1β，IL-1β）、IL-6、IL-8]的表达、释放，还可舒张气管平滑 本研究所用动物为 SPF 级雄性 BALB/c 小鼠，共 60
肌，对哮喘小鼠具有明显的平喘作用 [5―6] 。但牡荆素是 只，6～8周龄，体重19～22 g，购自常州卡文斯实验动物
否可通过调节 Notch 信号通路发挥上述药理功效，目前 有限公司，生产许可证号为SCXK（苏）2021-0013。小鼠
尚未有明确报道。鉴于此，本研究通过建立哮喘小鼠模 饲养于本院动物实验房内，环境为 12 h 明/12 h 暗交替、
型，探究牡荆素是否可通过调控 Notch 信号通路调节 温度（20±3） ℃、湿度（54±4）%。本研究经东南大学附
Th17/Treg免疫失衡，从而改善哮喘小鼠症状，为阐明牡 属中大医院伦理委员会批准，批准号为动物伦理 2023-
荆素治疗哮喘的机制提供参考。 07-08号。
1 材料 2 方法
1.1 主要仪器 2.1 哮喘模型建立及动物分组、给药
WBP 型动物肺功能检测仪购自上海赞德医疗器械 参照文献[7]方法建立哮喘模型：将 100 μg OVA 和
有限公司；NIB900-FL 型光学显微镜、Sunrise 型酶标仪 1 mg 氢氧化铝配制成 0.2 mL 的混悬液，实验第 0、7、14
均购自江苏睿捷生物科技有限公司；CtoFLEX S型流式 天，对小鼠分别腹腔注射上述混悬液；自第21天起将小
细胞仪购自上海新领生物科技发展有限公司；Mini- 鼠置于雾化箱中，向其中充入50 g/L的OVA雾化液进行

PROTEAN 型蛋白电泳仪、SH-Compact 523 型化学发光 激发，隔天进行1次，每次30 min，持续6周后，若小鼠出
成像系统均购自美国Bio-Rad公司。 现呼吸急促、呼吸困难、喘息、烦躁不安、抓耳挠鼻等症
1.2 主要药品与试剂 状时，表明哮喘模型构建成功 。将48只哮喘模型小鼠
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牡荆素原料药（批号 D0956，纯度≥98%）购自上海 随机分为模型组、牡荆素组、Notch 激活剂组、牡荆素+
宝曼生物科技有限公司；Notch 激活剂 Jagged1 标准品 Notch 激活剂组，每组 12 只。另取 12 只小鼠，在第 0、7、
（批号 HY-P1846，纯度≥99%）购自美国 MedChemEx‐ 14 天腹腔注射等量生理盐水，并自第 21 天起以等量生
press 公司；卵清蛋白（ovalbumin，OVA；批号 A8041）、氢 理盐水雾化激发，持续相同时间，设为对照组。

· 1850 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 15 中国药房 2024年第35卷第15期