Page 53 - 《中国药房》2024年12期
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面积。结果显示,各共有峰的相对保留时间和相对峰面 8 000
积的 RSD 分别小于 0.45%(n=6)和 2.45%(n=6),表明
6 000
方法重复性良好。
2.2.5 指纹图谱的建立及相似度评价 mAU 4 000
取样品(编号 S1~S12),按“2.1.1”项下方法制备供
试品溶液,再按“2.2.1”项下色谱条件进样分析,记录 2 000
HPLC 色谱图。将所得色谱图导入《中药色谱指纹图谱
0
相似度评价系统(2012A版)》进行分析,以编号S11的样 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
时间/min
品图谱为参照图谱,时间窗宽度为 0.2 min,采用中位数 A. 12批消核糖浆的指纹图谱及对照图谱(R)
240
法结合多点校正,进行色谱峰匹配,生成对照指纹图谱R
180
(图 1)。结果,共标定出 33 个共有峰,指认出其中 10 个 120
色谱峰,分别为王不留行黄酮苷(8号峰)、芍药苷(11号 mAU
60
峰)、阿魏酸(16号峰)、柚皮苷(18号峰)、延胡索乙素(19
0
号峰)、新橙皮苷(21号峰)、迷迭香酸(23号峰)、丹酚酸 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
时间/min
B(24 号峰)、柴胡皂苷 A(31 号峰)、柴胡皂苷 D(33 号 B.混合对照品色谱图
峰)。以对照指纹图谱为参照,进行相似度评价(表 1), 图1 消核糖浆的HPLC色谱图
结果显示,12 批消核糖浆样品的相似度均大于 0.97,表 对母离子进行定量,具体信息为:王不留行黄酮苷([M-
明各批样品所含化学成分相似,一致性较高。 H] ,tR=2.72 min,m/z 725.193 4)、芍药苷([M+HCOO] ,
-
-
2.3 消核糖浆多指标含量测定 tR=3.09 min,m/z 525.160 3)、阿魏酸([M-H] ,tR=3.41
-
根据“2.2.5”项下指纹图谱结果,通过UPLC-MS/MS min,m/z 193.050 6)、柚皮苷([M-H] ,tR=3.97 min,m/z
-
法对指认出的10个成分进行多成分含量测定。 579.171 9)、延 胡 索 乙 素([M-H] ,tR=4.51 min,m/z
-
-
2.3.1 色谱和质谱条件 417.140 2)、新 橙 皮 苷([M-H] ,tR=4.27 min,m/z
-
采用 ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱(100 mm× 609.182 4)、迷 迭 香 酸([M-H] ,tR=3.99 min,m/z
2.1 mm,1.7 μm),以 0.01% 甲酸乙腈(A)-0.01% 甲酸水 359.077 2)、丹 酚 酸 B([M-H] - ,tR=4.28 min,m/z
(B)为流动相进行梯度洗脱(0~4.3 min,5%A→30%A; 717.146 1)、柴 胡 皂 苷 A([M-H] ,tR=6.38 min,m/z
-
-
4.3~7.2 min,30%A→80%A;7.2~9.0 min,80%A→ 825.463 1)、柴 胡 皂 苷 D([M-H] ,tR=6.96 min,m/z
95%A);柱温为 50 ℃;流速为 0.4 mL/min;进样量为 2 825.463 1),其中tR为各离子的保留时间,m/z为质荷比。
μL。 2.3.2 专属性试验
采用 Xevo G2-XS QTof 型高分辨质谱仪,分别以电 分别量取混合对照品溶液和消核糖浆供试品溶液
喷雾离子源正离子和负离子模式采集数据,毛细管电压 (编号 S11),按“2.3.1”项下色谱和质谱条件进样测定。
为±3.0 kV,锥孔电压为±40 V,离子源温度为 110 ℃, 结果显示,供试品溶液和混合对照品溶液中10个主要成
加热器温度为 550 ℃,脱溶剂气流量为 900 L/h,扫描范 分的保留时间一致,待测成分无其他干扰,分离效果与
围m/z 100~900,以亮氨酸脑啡肽为内标进行实时校正。 峰形良好。部分待测成分结果见图2。
表1 12批消核糖浆样品相似度评价结果
编号 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 R
S1 1 0.986 0.986 0.991 0.988 0.988 0.988 0.991 0.988 0.977 0.979 0.987 0.991
S2 0.986 1 0.999 0.994 0.993 0.993 0.992 0.993 0.993 0.988 0.982 0.990 0.996
S3 0.986 0.999 1 0.993 0.991 0.992 0.991 0.993 0.992 0.993 0.980 0.990 0.996
S4 0.991 0.994 0.993 1 0.998 0.999 0.998 0.999 0.998 0.986 0.991 0.997 0.999
S5 0.988 0.993 0.991 0.998 1 0.999 1 0.999 1 0.979 0.989 0.997 0.998
S6 0.988 0.993 0.992 0.999 0.999 1 0.999 0.999 0.999 0.984 0.988 0.997 0.999
S7 0.988 0.992 0.991 0.998 1 0.999 1 0.999 1 0.979 0.990 0.997 0.998
S8 0.991 0.993 0.993 0.999 0.999 0.999 0.999 1 0.999 0.985 0.991 0.998 0.999
S9 0.988 0.993 0.992 0.998 1 0.999 1 0.999 1 0.980 0.991 0.998 0.999
S10 0.977 0.988 0.993 0.986 0.979 0.984 0.979 0.985 0.980 1 0.970 0.984 0.988
S11 0.979 0.982 0.980 0.991 0.989 0.988 0.990 0.991 0.991 0.970 1 0.990 0.991
S12 0.987 0.990 0.990 0.997 0.997 0.997 0.997 0.998 0.998 0.984 0.990 1 0.998
R 0.991 0.996 0.996 0.999 0.998 0.999 0.998 0.999 0.999 0.988 0.991 0.998 1
中国药房 2024年第35卷第12期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 12 · 1459 ·