Page 53 - 《中国药房》2024年12期
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面积。结果显示,各共有峰的相对保留时间和相对峰面                             8 000
          积的 RSD 分别小于 0.45%(n=6)和 2.45%(n=6),表明
                                                               6 000
          方法重复性良好。
          2.2.5 指纹图谱的建立及相似度评价                                 mAU  4 000
              取样品(编号 S1~S12),按“2.1.1”项下方法制备供
          试品溶液,再按“2.2.1”项下色谱条件进样分析,记录                          2 000
          HPLC 色谱图。将所得色谱图导入《中药色谱指纹图谱
                                                                 0
          相似度评价系统(2012A版)》进行分析,以编号S11的样                           0          5          10         15         20          25           30         35          40          45            50           55          60
                                                                                     时间/min
          品图谱为参照图谱,时间窗宽度为 0.2 min,采用中位数                                   A. 12批消核糖浆的指纹图谱及对照图谱(R)
                                                                240
          法结合多点校正,进行色谱峰匹配,生成对照指纹图谱R
                                                                180
         (图 1)。结果,共标定出 33 个共有峰,指认出其中 10 个                       120
          色谱峰,分别为王不留行黄酮苷(8号峰)、芍药苷(11号                          mAU
                                                                60
          峰)、阿魏酸(16号峰)、柚皮苷(18号峰)、延胡索乙素(19
                                                                 0
          号峰)、新橙皮苷(21号峰)、迷迭香酸(23号峰)、丹酚酸                           0          5          10         15         20          25          30          35        40         45          50         55           60
                                                                                     时间/min
          B(24 号峰)、柴胡皂苷 A(31 号峰)、柴胡皂苷 D(33 号                                    B.混合对照品色谱图
          峰)。以对照指纹图谱为参照,进行相似度评价(表 1),                                  图1 消核糖浆的HPLC色谱图
          结果显示,12 批消核糖浆样品的相似度均大于 0.97,表                      对母离子进行定量,具体信息为:王不留行黄酮苷([M-
          明各批样品所含化学成分相似,一致性较高。                               H] ,tR=2.72 min,m/z 725.193 4)、芍药苷([M+HCOO] ,
                                                                                                           -
                                                               -
          2.3 消核糖浆多指标含量测定                                    tR=3.09 min,m/z 525.160 3)、阿魏酸([M-H] ,tR=3.41
                                                                                                    -
              根据“2.2.5”项下指纹图谱结果,通过UPLC-MS/MS                 min,m/z 193.050 6)、柚皮苷([M-H] ,tR=3.97 min,m/z
                                                                                            -
          法对指认出的10个成分进行多成分含量测定。                              579.171  9)、延 胡 索 乙 素([M-H] ,tR=4.51  min,m/z
                                                                                           -
                                                                                           -
          2.3.1 色谱和质谱条件                                      417.140  2)、新 橙 皮 苷([M-H] ,tR=4.27  min,m/z
                                                                                           -
              采用 ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱(100 mm×            609.182  4)、迷 迭 香 酸([M-H] ,tR=3.99  min,m/z
          2.1 mm,1.7 μm),以 0.01% 甲酸乙腈(A)-0.01% 甲酸水           359.077  2)、丹 酚 酸 B([M-H]    -  ,tR=4.28  min,m/z
         (B)为流动相进行梯度洗脱(0~4.3 min,5%A→30%A;                   717.146  1)、柴 胡 皂 苷 A([M-H] ,tR=6.38  min,m/z
                                                                                           -
                                                                                           -
          4.3~7.2  min,30%A→80%A;7.2~9.0  min,80%A→          825.463  1)、柴 胡 皂 苷 D([M-H] ,tR=6.96  min,m/z
          95%A);柱温为 50 ℃;流速为 0.4 mL/min;进样量为 2               825.463 1),其中tR为各离子的保留时间,m/z为质荷比。
          μL。                                                2.3.2 专属性试验
              采用 Xevo G2-XS QTof 型高分辨质谱仪,分别以电                    分别量取混合对照品溶液和消核糖浆供试品溶液
          喷雾离子源正离子和负离子模式采集数据,毛细管电压                          (编号 S11),按“2.3.1”项下色谱和质谱条件进样测定。
          为±3.0 kV,锥孔电压为±40 V,离子源温度为 110 ℃,                  结果显示,供试品溶液和混合对照品溶液中10个主要成
          加热器温度为 550 ℃,脱溶剂气流量为 900 L/h,扫描范                   分的保留时间一致,待测成分无其他干扰,分离效果与
          围m/z 100~900,以亮氨酸脑啡肽为内标进行实时校正。                     峰形良好。部分待测成分结果见图2。
                                         表1 12批消核糖浆样品相似度评价结果

          编号    S1     S2      S3     S4      S5     S6     S7      S8     S9     S10    S11     S12     R
          S1    1      0.986  0.986   0.991  0.988  0.988   0.988  0.991  0.988   0.977  0.979  0.987   0.991
          S2    0.986  1      0.999   0.994  0.993  0.993   0.992  0.993  0.993   0.988  0.982  0.990   0.996
          S3    0.986  0.999  1       0.993  0.991  0.992   0.991  0.993  0.992   0.993  0.980  0.990   0.996
          S4    0.991  0.994  0.993   1      0.998  0.999   0.998  0.999  0.998   0.986  0.991  0.997   0.999
          S5    0.988  0.993  0.991   0.998  1      0.999   1      0.999  1       0.979  0.989  0.997   0.998
          S6    0.988  0.993  0.992   0.999  0.999  1       0.999  0.999  0.999   0.984  0.988  0.997   0.999
          S7    0.988  0.992  0.991   0.998  1      0.999   1      0.999  1       0.979  0.990  0.997   0.998
          S8    0.991  0.993  0.993   0.999  0.999  0.999   0.999  1      0.999   0.985  0.991  0.998   0.999
          S9    0.988  0.993  0.992   0.998  1      0.999   1      0.999  1       0.980  0.991  0.998   0.999
          S10   0.977  0.988  0.993   0.986  0.979  0.984   0.979  0.985  0.980   1      0.970  0.984   0.988
          S11   0.979  0.982  0.980   0.991  0.989  0.988   0.990  0.991  0.991   0.970  1      0.990   0.991
          S12   0.987  0.990  0.990   0.997  0.997  0.997   0.997  0.998  0.998   0.984  0.990  1       0.998
          R     0.991  0.996  0.996   0.999  0.998  0.999   0.998  0.999  0.999   0.988  0.991  0.998   1


          中国药房  2024年第35卷第12期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 12    · 1459 ·
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