Page 42 - 《中国药房》2024年12期

0 h

24 h

A.对照组 B.小檗碱10 μmol/L组 C.小檗碱20 μmol/L组 D. 小檗碱40 μmol/L组
注：红色箭头代表焦亡细胞。
图7 小檗碱对肿瘤干细胞焦亡形态影响的显微图
3.3.2 小檗碱对肿瘤干细胞LDH释放的影响 GSDME 55 kDa
LDH释放检测结果显示，与小檗碱10、20 μmol/L组 caspase-3 35 kDa
[ （15.93±0.87）% 、（18.16±0.87）% ] 比 较 ，小 檗 碱 40 GSDME-N 37 kDa
μmol/L 组肿瘤干细胞的 LDH 释放率[（23.80±3.10）%] cleaved-caspase-3 17 kDa

显著增加（P＜0.05）。 GAPDH 36 kDa
3.3.3 小檗碱对肿瘤干细胞焦亡相关蛋白表达的影响 对照组 小檗碱10 小檗碱20 小檗碱40
μmol/L组 μmol/L组 μmol/L组
Western blot 检测结果显示，与对照组比较，小檗碱 A.电泳图
1.0 对照组
20、40 μmol/L组的GSDME-N、cleaved-caspase-3蛋白表 0.8 小檗碱10 μmol/L组 ab ab
小檗碱20 μmol/L组
达水平均显著增加（P＜0.05），而GSDME、caspase-3（小 蛋白表达水平 0.6 小檗碱40 μmol/L组 a a
ab
檗碱 20 μmol/L 组除外）蛋白表达水平均显著下降（P＜ 0.4 ab a
0.2
0.05）。 与 小 檗 碱 10 μmol/L 组 比 较 ，小 檗 碱 20、40 0
GSDME caspase-3 GSDME-N cleaved-caspase-3
μmol/L 组的 GSDME 蛋白表达水平均显著下降（P＜ B.柱状图
0.05），小 檗 碱 40 μmol/L 组 的 GSDME-N、cleaved- a：与对照组比较，P＜0.05；b：与小檗碱10 μmol/L组比较，P＜
caspase-3 蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。结果 0.05。
见图8。 图8 小檗碱对肿瘤干细胞焦亡相关蛋白表达的影响
3.4 斑马鱼胚胎毒性实验结果 （x±s，n＝3）

与对照组比较，ATRA 可在 24 h 内诱导斑马鱼受精 细胞凋亡率显著升高。细胞分化实验中，小檗碱显著降
卵凝固，胚胎死亡率为100%。相反，经小檗碱处理的斑 低了肿瘤干细胞特征蛋白 CD44 /CD133 细胞比例和
+
+
马鱼胚胎发育几乎未受影响，胚胎存活率达到100%，且 SOX2 阳性细胞率，但与同等剂量的分化诱导剂 ATRA
未观察到明显畸形。结果见图9、图10。 比较，差异无统计学意义（P＞0.05），表明小檗碱可能具
4 讨论 备与ATRA相似的诱导分化效应。肿瘤球破坏实验中，
肿瘤干细胞是肿瘤中极小一群具有高度自我更新 与 ATRA 组比较，肿瘤球对小檗碱表现更敏感，球体积
与致瘤特性的群体，在体内以极少数量即可形成肿瘤， 变小，部分细胞死亡。以上结果提示，小檗碱可能具有
并且涉及肿瘤细胞的异质性、侵袭性和对治疗的耐受性 比ATRA更强的体内抗肿瘤干细胞活性。同时，经过不
等 [1，12] ，这些特性使得肿瘤干细胞成为启动、维持肿瘤并 同剂量小檗碱处理后，肿瘤干细胞表现出细胞膜肿胀和

使其进一步恶化的关键参与者。 气泡状突出物特征。LDH释放检测及Western blot实验
本研究结果显示，在进行抗肿瘤干细胞活性评价过 进一步表明，小檗碱对肿瘤干细胞具有焦亡诱导作用，
程中，小檗碱对肿瘤干细胞的体外增殖抑制作用较 且在一定浓度范围内，小檗碱的焦亡诱导作用随着浓度
ATRA 更强。细胞凋亡实验中，ATRA 对肿瘤干细胞的 的增大而增强；同时，小檗碱处理后细胞内 cleaved-
凋亡诱导作用较弱，而经小檗碱处理后的肿瘤干细胞， caspase-3、GSDME-N 蛋白表达均上调，GSDME、cas‐

· 1448 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 12 中国药房 2024年第35卷第12期