Page 91 - 《中国药房》2024年11期

于 10 mL 容量瓶中，得质量浓度为 0.91 mg/mL（经纯度
6×10 4 201.9 校正）的内标储备液，于－20 ℃保存。取内标储备液适
相对丰度 4×10 4 4 169.9 量，进一步用甲醇稀释至100 ng/mL，作为本研究的内标
2×10
0 84.387.1 124.3 185.9 388.8
60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 溶液。
m/z
A.贝他斯汀 2.3 乳汁样品前处理
精密吸取乳汁样品50 μL，置于1.5 mL离心管中，加
247.1 入“2.2”项下内标溶液 200 μL，涡旋 3 min，于 15 ℃下以
3×10
5
相对丰度 2×10 5 5 90.2 102.3 158.0 179.0 191.1 336.3 12 000 r/min 离心 10 min，取上清液按“2.1”项下条件进
1×10
0
60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
m/z 样分析。
B.羟氯喹
2.4 分析方法的验证
根据2020年版《中国药典》（四部）通则“生物样品定
247.2
5
相对丰度 2×10 5 69.0 86.3 142.4 164.1 179.0 191.0 320.0 量分析方法验证指导原则” ，对本方法的专属性、标准
[11]
1×10
0
60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 曲线、准确度、精密度、提取回收率、基质效应和稳定性
m/z 进行验证。
C.氯喹（内标）
图1 各化合物的二级碎片全扫描质谱图 2.4.1 专属性考察
取6份来自不同健康志愿者的空白乳汁，各吸取50
取上述储备液各适量，按一定比例混合后，用甲醇稀释
μL作为空白乳汁样本；另取空白乳汁48 μL加入贝他斯
成系列质量浓度的混合标准曲线工作溶液，其中贝他斯
汀的质量浓度分别为 50（定量下限）、250、500、1 250、 汀、羟氯喹定量下限混合标准曲线工作溶液 2 μL，作为
2 500、5 000 ng/mL，羟氯喹的质量浓度分别为1.25（定量 定量下限质控乳汁样本；再取患者乳汁样本 50 μL。上
下限）、2.50、5.00、12.50、18.75、25.00 μg/mL。 述样本均按“2.3”项下方法前处理后，按“2.1”项下条件
同法配制贝他斯汀质量浓度分别为 125、1 000、 进样分析，所得图谱见图2。
4 000 ng/mL，羟氯喹质量浓度分别为3.75、10、20 μg/mL 图2结果显示，不同来源的乳汁样本中，内源性物质
的低、中、高浓度质控工作液。 对贝他斯汀、羟氯喹以及氯喹（内标）的测定均无干扰，
精密称取氯喹对照品 9.40 mg，用甲醇溶解并定容 色谱峰峰形较好，表明方法专属性良好。
1
90 1.4×10 4 1 1
3×10 5
60
相对丰度 30 相对丰度 8×10 3 相对丰度 2×10 5

2×10 3 1×10 5
0 0 0
1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 2.7 2.9 3.1 1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 2.7 2.9 3.1 1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 2.7 2.9 3.1
t/min t/min t/min
2
120 2.5×10 5 2 1×10 6 2
相对丰度 80 相对丰度 1.5×10 5 相对丰度 6×10 5
40
0.5×10 5 2×10 5
0 0 0
0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4
t/min t/min t/min
3
90 2.5×10 6 3 2.5×10 6 3
相对丰度 60 相对丰度 1.5×10 6 相对丰度 1.5×10 6
30
0.5×10 6 0.5×10 6
0 0 0
0.7 0.9 1.1 1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 0.7 0.9 1.1 1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 0.7 0.9 1.1 1.3 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5
t/min t/min t/min
A.空白乳汁样本 B.定量下限质控乳汁样本 C.患者乳汁样本
1：贝他斯汀；2：羟氯喹；3.氯喹（内标）。
图2 不同乳汁样本中各化合物的提取离子色谱图

中国药房 2024年第35卷第11期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 11 · 1365 ·