Page 89 - 《中国药房》2024年11期

·药物与临床·

LC-MS/MS法同时测定人乳汁中贝他斯汀和羟氯喹的浓度 Δ

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白梦如 ，申 潜 ，马志媛 ，王 刚 （1.杭州市第一人民医院药学部，杭州 310006；2.浙江省食品药品检验研
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究院国家药品监督管理局仿制药评价关键技术重点实验室，杭州 310052）
中图分类号 R969.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）11-1363-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.11.14

摘 要 目的 建立同时测定人乳汁中贝他斯汀和羟氯喹浓度的液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）方法并应用于临床。方法 向
50 μL 乳汁样品中加入 200 μL 含内标（100 ng/mL 氯喹）的甲醇，涡旋沉淀蛋白后离心取上清液进样分析。色谱柱为 Waters
ACQUITY UPLC HSS T3柱，流动相为0.1%甲酸-10 mmol/L乙酸铵溶液（A相）和甲醇（B相）（梯度洗脱），流速为0.35 mL/min，进
样量为2 μL，分析时间为4 min。采用电喷雾离子源，正离子多反应监测模式扫描，定量分析离子对分别为m/z 388.9→201.9（贝他
斯汀）、m/z 336.3→247.1（羟氯喹）和 m/z 320.2→247.2（氯喹）。对所建 LC-MS/MS 法进行方法学考察，并用于检测 1 例哺乳期患
者乳汁中的药物浓度。结果 贝他斯汀在2～200 ng/mL（r＝0.999）、羟氯喹在50～1 000 ng/mL（r＝0.998）范围内线性关系良好。

贝他斯汀和羟氯喹质控样本的批内、批间精密度均小于15%，准确度、提取回收率、基质效应和稳定性均符合生物样品定量分析方
法验证要求。哺乳期患者乳汁中的药物浓度检测结果显示，该患者服药 2 h 和 14 h 后乳汁中贝他斯汀的浓度分别为 34.95、5.72
ng/mL，羟氯喹分别为211.92、104.18 ng/mL，推算出相对婴儿剂量分别为1.83%、0.56%。结论 该方法操作简便、快速、灵敏度高，
适用于人乳汁中贝他斯汀和羟氯喹浓度的同时测定，可为临床哺乳期的安全用药提供参考。
关键词 贝他斯汀；羟氯喹；乳汁；哺乳期；药物浓度；液相色谱-质谱联用技术

Simultaneous determination of bepotastine and hydroxychloroquine concentrations in human breast milk
by LC-MS/MS

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BAI Mengru ，SHEN Qian ，MA Zhiyuan ，WANG Gang（1. Dept. of Pharmacy， Hangzhou First People’s
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Hospital， Hangzhou 310006， China；2. NMPA Key Laboratory for Core Technology of Generic Drug
Evaluation， Zhejiang Institute for Food and Drug Control， Hangzhou 310052， China）
ABSTRACT OBJECTIVE To establish a liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-MS/MS） method for the
simultaneous determination of bepotastine and hydroxychloroquine concentrations in human breast milk and apply it in clinical
practice. METHODS The milk samples （50 μL） were precipitated with 200 μL methanol containing the internal standard （100 ng/mL
chloroquine）， and the supernatant was taken for analysis after vortexing and centrifugation. The separation was performed on a
Waters ACQUITY UPLC HSS T3 column with mobile phase consisted of 0.1% formic acid-10 mmol/L ammonium acetate solution
（phase A） and methanol （phase B） at gradient elution of 0.35 mL/min. The injection volume was 2 μL， and the analysis time was
4 min. The detection of the analytes was performed by electrospray ionization in positive mode by multiple reaction monitoring with
the transition of m/z 388.9→201.9 （bepotastine）， m/z 336.3→247.1 （hydroxychloroquine）， and m/z 320.2→247.2 （chloroquine）.
The established LC-MS/MS method was researched in methodology and used to determine the drug concentrations in the breast milk
of 1 case of lactating patient. RESULTS The linear range of bepotastine was 2-200 ng/mL（r＝0.999）， and hydroxychloroquine

was 50-1 000 ng/mL（r＝0.998）. The intra-assay and inter-assay precisions were both ≤15%， and the accuracy， extraction

recovery， matrix effect， and stability all met the acceptance criteria for bioanalytical method validation. The concentration result of
bepotastine and hydroxychloroquine in the breast milk of the

Δ 基金项目 国家自然科学基金项目（No.82003838）；浙江省自然 lactating patient showed， after 2 h and 14 h， the concentrations
科学基金项目（No.LY22H310006）；浙江省卫生健康科技计划项目 of bepotastine in the breast milk of the patient were 34.95 ng/mL
（No.2021RC021）；杭州市医药卫生科技项目（No.A20210336） and 5.72 ng/mL； those of hydroxychloroquine were 211.92
＊第一作者 主管药师，硕士生导师，博士。研究方向：临床药学、
体内药物分析。E-mail：mengrbai@qq.com ng/mL and 104.18 ng/mL， respectively. The relative infant
# 通信作者 主 任 药 师 。 研 究 方 向 ：临 床 药 学 。 E-mail： doses were 1.83% and 0.56%， respectively. CONCLUSIONS
88485534@163.com The established method is simple， rapid， and sensitive. It is

中国药房 2024年第35卷第11期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 11 · 1363 ·