Page 43 - 《中国药房》2024年8期
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β受体拮抗剂类药物包括普萘洛尔、阿替洛尔、美托                        180903，规格 10 mg）和企业 D（批号 190101、190110，规
          洛尔、艾司洛尔、卡维地洛、比索洛尔、阿罗洛尔、卡替洛                         格 10 mg）；酒石酸美托洛尔片分别来自企业 E（批号
          尔、噻吗洛尔和拉贝洛尔等，用于高血压、心绞痛、心律                          20200401、20200402，规 格 50  mg）和 企 业 F（批 号
          失常、心肌梗死、青光眼和甲状腺功能亢进等疾病的临                           2107129，规格 50 mg；批号 2109A25，规格 25 mg）；阿替
                [1]
          床治疗 。该类药物具有相似的结构片段，且含有易发                           洛尔片来自企业G（批号220801，规格12.5 mg）；盐酸艾
          生亚硝化反应的二级胺（即与烷基或芳香环连接的氮），                          司洛尔注射液来自企业H（批号2C0092C04，规格2 mL∶
          故在生产、储存和使用过程中可能产生相应的N-亚硝基                          0.2 g）；富马酸比索洛尔片来自企业 I（批号 2301094，规
                [2]
          类杂质 。研究指出，β 受体拮抗剂类药物的 N-亚硝基                        格 5 mg）；N-亚硝基普萘洛尔对照品（批号 BNP30-09-
          类杂质由于潜在的基因毒性而备受学界关注，有多种药                           02，纯度 96.99%）、N-亚硝基美托洛尔对照品（批号
          物因该类杂质超标而被召回            [3―4] 。考虑到 β 受体拮抗剂         BNM02-01-01，纯度98.10%）、N-亚硝基阿替洛尔对照品
          类药物是一线降压药物，临床用量大，且患者需长期使                          （批号 BNA40-01-01，纯度 98.70%）、N-亚硝基艾司洛尔
          用，故有必要对其中的N-亚硝基类杂质进行控制。                            对照品（批号 BNA16-01-02，纯度 95.40%）、N-亚硝基比
              目前，对药物中N-亚硝基类杂质的定量检测方法包                        索洛尔对照品（批号BNB02-01-01，纯度99.04%）均购自
          括高效液相色谱（HPLC）法、电位滴定法、气质联用法、                        佛山宝诺生物科技有限公司；乙酸铵（批号C1388730，纯
          液质联用法和纳米分子印迹聚合膜电位滴定法                     [5―7] 等。  度 98%）购自上海麦克林生化科技有限公司；甲醇和甲
          超高效液相-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱（ultra per‐                   酸为质谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯净水。
          formance  liquid  chromatography-quadrupole/electrostatic   2 方法与结果
          field orbitrap high-resolution mass spectrometry，UPLC-Q/  2.1 色谱与质谱条件
          Orbitrap HRMS）技术可准确提供待测成分的精确分子                     2.1.1 色谱条件
          量，具有前处理简便、快捷，灵敏度和专属性优于现有方                              以ACE Excel 3 C18-AR（150 mm×4.6 mm，3 μm）为
          法等优点，被广泛用于药物中基因毒性杂质的检测。基                           色谱柱，以含0.01 mol/L乙酸铵的0.2%甲酸溶液为流动
          于此，本研究拟利用 UPLC-Q/Orbitrap HRMS 技术建立                相 A、甲醇为流动相 B 进行梯度洗脱[程序Ⅰ（用于普萘

          同时测定 5 种 β 受体拮抗剂类药物（普萘洛尔、美托洛                       洛尔、美托洛尔、艾司洛尔、比索洛尔及对应杂质）：0～
          尔、阿替洛尔、艾司洛尔、比索洛尔）中 N-亚硝基类杂质                        10 min，55%B；10～13 min，55%B→85%B；13～25 min，
         （N-亚硝基普萘洛尔、N-亚硝基美托洛尔、N-亚硝基阿替                        85%B；25～25.1  min，85%B→55%B；25.1～30  min，
          洛尔、N-亚硝基艾司洛尔、N-亚硝基比索洛尔）含量的方                        55%B。程序Ⅱ（用于阿替洛尔及对应杂质）：0～10 min，
          法，对市售样品进行测定，并对上述 N-亚硝基类杂质进                         45%B；10～13 min，45%B→85%B；13～15 min，85%B；
          行毒性预测和关注阈值估算，以期为该类药物的质量控                           15～15.1 min，85%B→45%B；15.1～20 min，45%B]；流
          制和安全性评价提供参考。                                       速为0.60 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为5 μL。
          1 材料                                               2.1.2 质谱条件
          1.1 主要仪器及软件                                            离子源为可加热的电喷雾离子源，在正离子模式下
              本研究所用主要仪器包括 Q Exactive Focus 型四极               进行检测；鞘气压力为55 arb；辅助气流速为5 L/min，压
          杆/高分辨静电场轨道阱液质联用仪、UltiMate 3000型超                   力为15 arb；吹扫气流速为3 L/min（3 units）；喷雾电压为
          高效液相色谱仪、MultifugeX3R 型离心机（美国 Thermo                3.5  kV；离 子 传 输 管 温 度 为 275  ℃ ；干 燥 器 温 度 为
          Fisher Scientific 公司）；MS105DU 型十万分之一电子天            450 ℃；扫描模式为全扫描-选择离子监测（full mass
          平（瑞士 Mettler Toledo 公司），MS 3 Digital 型漩涡振荡         spectra-selected ion monitoring，full MS-SIM）模式，扫描
          器（德国IKA公司），KQ-500GDV型超声波清洗器（昆山                     范围为 m/z 50～750，分辨率为 70 000；自动增益控制目
                                                                            6
          市超声仪器有限公司），Discovery Studio 毒性预测软件                 标离子数为3×10 。
         （美国CambridgeSoft公司）等。                               2.2 溶液的制备
          1.2 主要药品与试剂                                        2.2.1 盐酸普萘洛尔原料药供试品溶液
              盐酸普萘洛尔原料药分别来自企业 A（批号 CP07-                         取盐酸普萘洛尔原料药约 50 mg，精密称定，置 5
          190101，纯 度 99.8%）和 企 业 J（批 号 171201，纯 度            mL容量瓶中，用溶剂[含0.01 mol/L乙酸铵的0.2%甲酸
          99.7%）；盐 酸 普 萘 洛 尔 片 分 别 来 自 企 业 B（批 号             溶液与甲醇的混合溶液（体积比40∶60），下同]溶解并稀
          5190601、5190602，规格 10 mg）、企业 C（批号 180901、          释至刻度，混匀，即得。


          中国药房  2024年第35卷第8期                                                 China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 8    · 937 ·
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