Page 26 - 《中国药房》2024年6期

MB and LDH were increased significantly in DOX group （P＜0.05）； compared with DOX group， the serum levels of the above
indicators （except for CK-MB） were decreased significantly in GDOX group （P＜0.05）. PCA and OPLS-DA showed that
myocardial tissue samples of CON group， DOX group and GDOX group were isolated completely. After database matching， 37
common DEMs were identified， among which 17 DEMs were significantly up-regulated in the DOX group and significantly down-
regulated in the GDOX group， and 8 DEMs were significantly down-regulated in the DOX group and significantly up-regulated in
the GDOX group； pathway enrichment involved the biosynthesis of unsaturated fatty acids， arachidonic acid metabolism， linoleic
acid metabolism， taurine and hypotaurine metabolism； the key metabolites in the above pathways included docosahexaenoic acid，
arachidonic acid， phosphatidylcholine （16∶0/18∶3） and taurine. CONCLUSIONS GA may regulate the biosynthesis of unsaturated
fatty acids， arachidonic acid metabolism and other metabolic pathways by acting on the core metabolites such as docosahexaenoic
acid and arachidonic acid， thus alleviating the cardiotoxic effects of DOX.
KEYWORDS ginkgo flavonoid aglycone； doxorubicin； cardiotoxicity； metabolomics

多柔比星（doxorubicin，DOX）又称阿霉素，是一种 1 材料
具有抗肿瘤活性的蒽环类抗生素，抗癌谱较广，能抑制 1.1 主要仪器
肿瘤细胞RNA和DNA的合成，可用于恶性淋巴瘤、乳腺 本研究所用主要仪器包括配备Q Exactive Plus型高
[1]
癌、肺癌、膀胱癌等的临床治疗 。然而临床实践显示， 分 辨 质 谱 仪 的 Vanquish 型 UHPLC 系 统 、Forma 905-
DOX具有心脏毒性、骨髓造血功能障碍等毒副作用，且 ULTS1490型医用低温冰箱、Variskan Lux型多功能酶标
以心脏毒性最为显著，严重时会引发心力衰竭（heart 仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司），ALLEGRA X-
failure，HF）。研究指出，蒽环类药物的心脏毒性与药物 30R型离心机（美国Beckman Coulter公司），6KQ-300DE
2
累积剂量密切相关：当累积剂量为 400 mg/m 时，HF 的 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）等。
2
发生风险为3%～5%；当累积剂量为550 mg/m 时，HF的 1.2 主要药品与试剂
[2]
发生风险可达 7%～26%，严重影响患者预后 。因此， 盐酸多柔比星原料药（批号 NO625A，纯度＞98%）
购自大连美仑生物科技有限公司；GA（槲皮素、山柰酚、
降低蒽环类药物的心脏毒性、开发更安全高效的保护剂
具有重要临床意义。 异鼠李素含量分别为 47.28%、43.42%、1.93%）由贵州省
生化工程中心何珺副教授惠赠；羧甲基纤维素钠（CMC-
银杏黄酮苷元（ginkgo flavone aglycone，GA）是一
Na）购自北京索莱宝科技有限公司；天冬氨酸转氨酶
种银杏黄酮苷类提取物，可通过酶水解法获取，主要包
（aspartate aminotransferase，AST）、乳酸脱氢酶（lactate
括槲皮素、山柰酚和异鼠李素等成分。研究表明，上述
dehydrogenase，LDH）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、
成分均具有抗肿瘤、抗氧化和保护心脑血管系统等多种
肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）试
药理活性 [3―4] 。本课题组前期体内、体外实验初步证实，
剂检测盒（批号分别为 20210708、20210722、20210710、
GA 对 DOX 具有“增效减毒”作用，并可明显减轻 DOX
20210709）均购自南京建成生物工程研究所；甲醇、乙腈
[5]
的心脏毒性 ，但相关机制尚不清楚。
为质谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
代谢组学（metabolomics）可反映生物体内所有小分
1.3 实验动物
子（分子量＜1 000 Da）物质在外界干预或病理条件下的
SPF级雄性ICR小鼠，体重18～22 g，购自长沙市天
动态变化规律，进而有助于阐释药物代谢物与疾病之间
勤生物技术有限公司，动物生产许可证号为SCXK（湘）
[6]
的调控关系 。因该技术能全面监测内源性代谢物的变
2022-0011。所有动物均饲养于温度 18～25 ℃、相对湿
化，并将代谢紊乱与生物表型变化相互关联，与中药多
度 50%～70% 的环境中，适应性饲养 1 周后进行实验。
成分、多靶点的治疗特征相符，故被广泛应用于中医药 本研究严格遵循动物实验的相关要求及规则，具体实验
研究领域 。基于此，在初步证实 GA 能显著减轻 DOX 方案经贵州医科大学实验动物伦理委员会审核批准（编
[7]
心脏毒性这一作用的基础上，本研究拟采用具有扫描范 号2101200）。
围广、灵敏度和分辨率高、专属性强等优点的超高效液 2 方法
相色谱-四极杆静电场轨道阱串联质谱（UHPLC-Q- 2.1 药效学研究
Exactive Orbitrap HRMS，以下简称“UHPLC-MS/MS”） 将小鼠随机分为对照组（CON 组）、模型组（DOX
技术检测小鼠心脏组织的代谢物，筛选差异代谢物（dif‐ 组）、GA+DOX 组（GDOX 组），每组 12 只。根据前期研
ferentially expressed metabolites，DEMs）并分析相关代谢 究 ，CON 组小鼠尾静脉注射生理盐水 0.25 mL，隔天 1
[5]
通路，以期阐明 GA 减轻 DOX 心脏毒性的可能机制，为 次；DOX组小鼠尾静脉注射DOX药液（以生理盐水为溶
GA的开发应用奠定基础。 剂）3 mg/kg，隔天 1 次，累积剂量为 21 mg/kg；GDOX 组

· 660 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 6 中国药房 2024年第35卷第6期