Page 22 - 《中国药房》2024年6期

3 结果
3.1 差异表达基因筛选及验证结果
经对比模型组与假手术组大鼠双侧海马组织的测
序结果发现，GSNOR 编码基因在差异表达基因中（图
1A）；PCA分析结果显示，假手术组和模型组大鼠样本的
离散程度高，两者存在明显差异（图 1B）；进一步的
ELISA 检测结果显示，模型组大鼠海马组织中 GSNOR
含量显著高于假手术组，GSNO含量显著低于假手术组
（P＜0.01，图1C）。
下调 无明显变化 上调 A.去甲丹参酮与GSNOR B.鼠尾草酚酮与GSNOR
假手术组
模型组 图2 血必净注射液活性成分与GSNOR的分子对接图
30
25
GSNOR
评分均为 0 分；模型组大鼠各时间点的 mNSS 评分均显
20 0
－lgP PC2 著高于同期假手术组（P＜0.05），且有随时间延长而逐
10
－25 渐降低的趋势；血必净组、抑制剂组、血必净+抑制剂组
0 大鼠的mNSS评分均显著低于同期模型组（P＜0.05），且
－6 －3 0 3 6 －50 0 50 血必净组显著低于同期抑制剂组，血必净+抑制剂组显著
log 2 FC PC1
A.火山图 B. PCA图 低于同期血必净组及抑制剂组（P＜0.05）。结果见表2。
a GSNO 表2 不同时间点各组大鼠 mNSS 评分比较（x±s，n＝
（ pg/mg ） 2.0 a GSNOR 组别 10，分） 给药后3 h 给药后24 h 给药后3 d
2.5
GSNO或GSNOR含量/ 1.5 假手术组 7.05±0.80 a b 4.46±0.30 a b 3.84±0.75 a b
0
0
0
1.0
模型组
0.5
5.90±0.45
2.98±0.58
4.31±0.24
抑制剂组
0
1.17±0.16
4.29±0.82
1.88±0.47
血必净+抑制剂组
假手术组 模型组 血必净组 5.21±0.36 bc bcd 2.86±0.41 bc bcd 2.12±0.62 bc bcd
C. ELISA检测结果（x±s，n＝5）
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与抑制
a：组间比较，P＜0.01。
剂组比较，P＜0.05；d：与血必净组比较，P＜0.05。
图1 差异表达基因筛选及验证结果
假手术组没有大鼠死亡，模型组在给药后3 h、24 h、
3.2 血必净注射液活性成分筛选结果 3 d时分别有1、3、7只大鼠死亡，共死亡11只；血必净组
根据“2.3”项下标准，本研究最终筛选出degree排前 在上述时间点分别有1、1、2只大鼠死亡，共死亡4只；抑
10 位的活性成分，包括木犀草素、异欧前胡素等，具体 制剂组在上述时间点分别有1、2、3只大鼠死亡，共死亡
见表1。 6只；血必净+抑制剂组仅在首次给药后24 h时有1只大
表1 血必净注射液中degree排前10位的活性成分 鼠死亡。各组大鼠的生存率曲线见图3。
序号 TCMSP编号 中文名称 英文名称 degree 来源药材
1.0
1 MOL000006 木犀草素 luteolin 9 丹参
2 MOL001942 异欧前胡素 isoimperatorin 8 丹参 0.8
3 MOL007049 去甲丹参酮 4-methylenemiltirone 7 丹参
4 MOL007145 鼠尾草酚酮 salviolone 6 丹参 0.6
5 MOL000449 豆甾醇 stigmasterol 6 当归、红花 生存率
6 MOL007122 丹参新酮 miltirone 6 丹参 0.4
7 MOL001601 四氢丹参酮 1，2，5，6-tetrahydrotanshinone 6 丹参 假手术组
0.2 模型组
8 MOL000422 山柰酚 kaempferol 5 赤芍 抑制剂组
血必净组
9 MOL002135 杨梅酮 myricanone 4 川芎 0 血必净+抑制剂组
10 MOL007088 隐丹参酮 cryptotanshinone 4 丹参 0 20 40 60
时间/h
3.3 分子对接验证结果
图3 各组大鼠的生存率曲线
异欧前胡素、去甲丹参酮、鼠尾草酚酮、豆甾醇与
GSNOR 具有较强的结合活性，结合能分别为－8.0、 3.4.2 大鼠海马组织中GSNOR、GSNO含量
－9.2、－8.5、－8.1 kcal/mol，以氢键连接为主。结果见 给药后 3 h、24 h、3 d 时，模型组大鼠海马组织中
图2（以去甲丹参酮、鼠尾草酚酮为例）。 GSNOR 含量均较同期假手术组显著升高，GSNO 含量
3.4 动物实验验证结果 均较同期假手术组显著降低（P＜0.05）；血必净组、抑制
3.4.1 大鼠神经功能和生存情况 剂组、血必净+抑制剂组大鼠海马组织中GSNOR含量均
首次给药后3 h、24 h、3 d时，假手术组大鼠的mNSS 较同期模型组显著降低，GSNO含量均较同期模型组显

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