Page 31 - 《中国药房》2024年1期

2.5.4 重复性试验 70%、100%甲醇）以及提取时间（15、30、60、90 min）进行
取同一批水冬瓜根及茎药材（编号 S11）6 份，分别 考察，结果表明，以 45% 甲醇对水冬瓜根及茎药材超声
按“2.4.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.4.1”项下色 提取30 min时，提取率、色谱峰数目和分离度均较好，故
谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品 选择该提取条件制备供试品溶液。
中松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、（+）-syringaresinol-O-β-D- 3.2 色谱条件优化
glucopyranoside、丁香脂素成分的含量。结果显示，5 个 前期研究中笔者在不同检测波长下对供试品溶液
待 测 成 分 含 量 的 RSD 分 别 为 1.80%、2.40%、2.82%、 进行检测，发现当检测波长为220 nm时，基线较平整、峰
1.43%、1.90%（n＝6），表明该方法重复性良好。 吸收度较高、峰数目较多；通过考察乙腈-0.1% 甲酸溶
2.5.5 加样回收率试验 液、甲醇-0.1% 甲酸溶液、乙腈-0.1% 磷酸溶液等流动相
取已知含量的水冬瓜根及茎药材（编号S11）粉末约 对分离效果及峰形的影响，发现当流动相为乙腈-0.1%
0.5 g，精密称定，按药材中已知成分含量的 50% 加入松 磷酸溶液时的分离效果最好、峰形尖锐对称、拖尾现象
柏苷对照品，其余成分按已知含量的 100% 加入相应对 较少。同时，笔者还考察了柱温（25、30、35、40 ℃）和流
照品，然后按“2.4.3”项下方法制备供试品溶液，平行制 速（0.6、0.8、1.0、1.2 mL/min）对分离效果的影响，发现当
备 6 份。按“2.4.1”项下色谱条件进样测定，计算加样回 柱温为35 ℃、流速为0.8 mL/min时，分离效果最佳。据
收 率 。 结 果 显 示 ，松 柏 苷 、紫 丁 香 苷 、绿 原 酸 、 此，最终确定了文中的最优色谱条件。
（+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside、丁香脂素的 3.3 指纹谱图及含量测定结果分析
平 均 加 样 回 收 率 分 别 为 100.90%、99.27%、101.05%、 笔者前期比较了水冬瓜不同部位——根皮、根芯、
101.16%、104.65%，RSD 分 别 为 1.90%、1.36%、1.06%、 根、茎的主要化学成分，发现水冬瓜根及茎与根皮的色
2.66%、1.55%（n＝6），表明该方法准确度良好。 谱峰数量相差较小，主成分基本一致，可见对水冬瓜根
2.5.6 样品含量测定 及茎进行研究也具有重要意义。指纹图谱结果表明，各
分别取 11 批水冬瓜根及茎药材粉末各约 1 g，精密 色谱峰保留时间稳定，该方法具有良好的稳定性和重复
称定，按“2.4.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.4.1” 性。11 批水冬瓜根及茎药材中共有 16 个共有峰，相似
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲线法计 度为 0.856～0.960，可见各批次药材有较好的相似度。
算样品中松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、（+）-syringaresinol- 本研究从11批水冬瓜根及茎的16个共有峰中指认出了
O-β-D-glucopyranoside、丁香脂素成分的含量。平行进 松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、（+）-syringaresinol-O-β-D-
样3次，取平均值，结果见表4。考虑到质量标准制定的 glucopyranoside、丁香脂素 5 个成分，这对后续其质量控
适用性和药材来源的差异性，本研究以略低于含量最低 制和谱效关系的研究具有重要意义。
值设限，初步拟定本品中松柏苷含量不得少于 0.04 研究表明，松柏苷具有良好的免疫调节作用 ，紫
[13]
mg/g，紫丁香苷含量不得少于 0.83 mg/g，绿原酸含量不 丁香苷抗炎、镇痛作用明显 ，绿原酸具有良好的抗炎
[14]
得少于 1.24 mg/g，（+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyra- [15]
活性 ，（+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside 具有
noside含量不得少于0.13 mg/g，丁香脂素含量不得少于 [16]
一定的类风湿性关节炎治疗作用 ，丁香脂素能缓解关
0.01 mg/g。 [17]
节炎模型大鼠的关节炎症状 。上述成分的药理活性
表4 样品中含量测定结果（mg/g，n＝3） 与水冬瓜药材功效一致，因此，本研究对以上成分进行
编号 松柏苷 紫丁香苷 绿原酸 （+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside 丁香脂素 了含量测定。结果显示，不同批次药材中各成分的含量
S1 0.147 4 2.701 0 3.265 1 0.188 0 0.109 9
S2 0.047 2 3.419 1 2.176 3 0.266 2 0.045 4 存在差异。其中，批次S3、S4、S5样品的产地相同、采收
S3 0.195 3 4.604 0 4.293 9 0.347 0 0.470 9 季节不同，各成分含量差异较为明显，这提示采收时间
S4 0.068 8 2.600 8 2.232 8 0.377 4 0.635 3 对水冬瓜根及茎药材质量影响较大，需严格把控药材采
S5 0.397 3 8.697 9 8.362 2 0.350 3 0.081 8
S6 0.252 7 4.467 0 3.378 4 0.369 7 0.016 4 收期。
S7 0.049 3 0.836 8 1.245 3 0.254 5 0.143 6 综上，本研究通过对水冬瓜根及茎药材的性状进行
S8 0.401 6 4.052 9 10.950 0 0.437 8 0.105 6 观察，对其进行显微鉴别以及水分、总灰分、酸不溶灰
S9 0.192 5 6.635 2 4.413 9 0.356 6 0.067 5
S10 0.182 0 1.765 9 4.445 0 0.139 0 0.026 8 分、浸出物的测定，并采用 HPLC 法进行指纹图谱建立
S11 0.303 9 6.261 7 2.802 1 0.346 0 0.320 5 及多指标含量测定，建立了水冬瓜根及茎药材质量控制
平均值 0.203 5 4.185 7 4.324 1 0.312 0 0.184 0
方法，为进一步开发利用该药材资源提供了依据。
3 讨论 参考文献
3.1 供试品溶液制备方法的考察 [ 1 ] 贵州省药品监督管理局. 贵州省中药材、民族药材质量
本研究通过对供试品溶液的提取方式（超声、回 标准：2003年版[M].贵阳：贵州科技出版社，2003：107.
流）、提取溶剂（30%、45%、70%、100%乙醇或30%、45%、 Guizhou Medical Products Administration. Quality stan‐

中国药房 2024年第35卷第1期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 1 · 25 ·