Page 30 - 《中国药房》2024年1期

400 通过与对照图谱 R 与混合对照品溶液图谱（图 4B）的保
300
mAU 200 留时间及光谱信息进行比对，分别指认了松柏苷（峰4）、紫
100 丁香苷（峰 5）、绿原酸（峰 7）、（+）-syringaresinol-O-β-D-
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 glucopyranoside（峰11）、丁香脂素（峰15）5个成分。
t/min
5
A.空白溶剂 1 800
1 700 8
400 5 1 600
1 500
300 1 400 2 7 10 16
mAU 200 1 300 1 3 4 6 9 11 12 13 14 15
1 200
100 7 15 1 100 R
4 11 1 000 S11
0 U/mV 900 S10
0 10 20 30 40 50 60 70 80 800 S9
S8
700
t/min 600 S7
B.混合对照品溶液 500 S6
S5
400
300 S4
800 5 200 S3
100 S2
600 0 S1
mAU 400 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64 68 72 76 80
200 4 7 11 15
0 t/min
0 10 20 30 40 50 60 70 80 图5 11批水冬瓜根及茎药材的叠加指纹图谱和对照图
t/min
C.供试品溶液 谱R
4：松柏苷；5：紫丁香苷；7：绿原酸；11：（+）-syringaresinol-O-β-D- 2.5 含量测定
glucopyranoside；15：丁香脂素。 2.5.1 线性关系考察
图4 专属性考察的HPLC图
精密量取“2.4.2”项下的混合对照品溶液 0.062 5、
2.4.6 稳定性试验 0.125、0.25、0.5、1、2 mL于2 mL容量瓶中，用甲醇定容，
取“2.4.3”项下供试品溶液（编号 S11）适量，分别于 摇匀后，得系列质量浓度的对照品溶液，分别按“2.4.1”
室温下放置 0、3、6、9、12、24 h 时，按“2.4.1”项下色谱条 项下色谱条件进行检测，记录峰面积。以质量浓度为横
件进样测定，记录峰面积。以紫丁香苷（峰5）为参照，计 坐标（x）、峰面积为纵坐标（y）绘制标准曲线并进行回归
算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示， 分析，结果见表 3。结果显示，松柏苷、紫丁香苷、绿原
各共有峰相对保留时间的RSD均小于0.19%，相对峰面 酸、（+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside、丁香脂素
积的RSD均小于1.89%（n＝6），说明供试品溶液在室温 5 个待测成分在其对应质量浓度范围内线性关系均
下放置24 h内稳定性良好。 良好。
2.4.7 重复性试验 表3 线性关系考察结果
取水冬瓜根及茎药材（编号 S11）粉末，按“2.4.3”项 待测成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL）
下方法平行制备 6 份供试品溶液，再按“2.4.1”项下色谱 松柏苷 y＝0.527 2x+0.128 6 0.999 6 1.40～44.90
紫丁香苷 y＝0.745 0x+2.658 5 0.999 8 32.94～1 054.00
条件进样测定，记录峰面积。以紫丁香苷（峰5）为参照，
绿原酸 y＝0.385 3x－1.223 9 0.999 6 17.38～556.00
计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显 （+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside y＝0.439 1x－0.075 4 0.999 8 2.00～63.90
示，各共有峰相对保留时间的 RSD 均小于 0.08%，相对 丁香脂素 y＝0.807 4x－1.257 6 0.999 6 2.89～92.50
峰面积的RSD均小于2.85%（n＝6），表明本方法重复性 2.5.2 精密度试验
良好。 取“2.4.3”项下供试品溶液（编号 S11），按“2.4.1”项
2.4.8 HPLC指纹图谱的建立与相似度评价 下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果显示，
取11批水冬瓜根及茎药材，按照“2.4.3”项下方法制 松柏苷、紫丁香苷、绿原酸、（+）-syringaresinol-O-β-D-
备供试品溶液，按“2.4.1”项下色谱条件进样检测，得到 glucopyranoside、丁香脂素峰面积的 RSD 分别 1.44%、
不同批次水冬瓜根及茎药材的 HPLC 图。将色谱图导 0.48%、0.64%、0.44%、0.76%（n＝6），表明仪器具有良好
入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》进行 的精密度。
分析：以编号S1样品的色谱图为参照图谱，采用中位数 2.5.3 稳定性试验
法，设置时间窗宽度为0.2 min，经多点校正建立11批样 取“2.4.3”项下供试品溶液（编号 S11），于室温下分
品的HPLC叠加指纹图谱和对照图谱R（图5），并进行相 别放置 0、3、6、9、12、24 h 时，按“2.4.1”项下色谱条件进
似度评价。结果显示，共确立了水冬瓜根及茎药材的16 样测定，记录峰面积。结果显示，松柏苷、紫丁香苷、绿
个共有峰；11批样品的指纹图谱与对照图谱R的相似度 原酸、（+）-syringaresinol-O-β-D-glucopyranoside、丁香脂
分 别 为 0.936、0.876、0.928、0.960、0.951、0.960、0.873、 素峰面积的 RSD 分别为 1.70%、1.31%、1.69%、1.89%、
0.912、0.893、0.856、0.861，说明各药材样品相似度良好。 0.24%（n＝6），表明供试品溶液在室温下24 h内稳定。

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