Page 28 - 《中国药房》2023年19期

本研究对预测的最优提取工艺进行了微调，即得乙醇体 培养 24 h，以平板内菌落个数小于 4 的最小质量浓度为
积分数90%，液料比15∶1，以80 ℃回流提取2 h；在此条 MBC。结果见表4。
件下，预测艾纳香素的得率为1.98 mg/g。 表4 艾纳香素体外抗菌活性考察结果（µg/mL）
响应面图 等高线图 头孢呋辛钠组 艾纳香素组
得率/（mg/g） 菌种
3.0 MIC MBC MIC MBC
2.0 金黄色葡萄球菌 3.13 12.50 200.00 1 600.00
（ mg/g ） 1.9 2.5 变异链球菌 12.50 100.00 400.00
1.8
得率/ 1.7 B/h 2.0 藤黄微球菌 25.00 200.00 1 600.00
6.25
400.00
25.00
1.6
无乳链球菌
1.5
1.5 枯草芽孢杆菌 25.00 200.00 800.00
3.0 95 化脓链球菌 12.50 100.00 50.00 400.00
2.5 90 1.0
2.0 85
B/h 1.5 80 A/% 75 80 85 90 95
1.0 75 A/% 由表4可知，上述几种菌株对艾纳香素的敏感度为：
A.因素A与因素B的交互作用 化脓链球菌＞金黄色葡萄球菌＞无乳链球菌＝变异链
得率/（mg/g） 球菌＞枯草芽孢杆菌＞藤黄微球菌；其中，艾纳香素对
20
2.0 18 化脓链球菌的MIC值达50 µg/mL，仅比头孢呋辛钠对化
（ mg/g ） 1.9 16 脓链球菌的MIC值高37.50 µg/mL。
1.8
得率/ 1.7 （ mL/g ） 14 2.5 艾纳香素的消炎活性评价
1.6
1.5 C/
12 2.5.1 对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
20 95
18 90 将 50 只昆明小鼠随机分为 5 组，即阳性对照组（地
16 85 10
C/（mL/g） 14 12 80 A/% 75 80 85 90 95
10 75 A/% 塞米松，10 mg/kg），空白对照组，艾纳香素（自提）低、中、
B.因素A与因素C的交互作用 高剂量组（7.5、15、30 mg/kg），每组10只。各给药组按上
得率/（mg/g） 述剂量腹腔注射给药，空白对照组给予等量生理盐水。
20
2.0 18 在给药 5 h 后，每只小鼠右耳涂抹 30 µL 二甲苯致炎，左
（ mg/g ） 1.8 16 耳不涂任何药物。30 min 后处死小鼠，以 6 mm 打孔器
1.9
1.7
得率/ 1.6 （ mL/g ） 14 打下耳片并称重，以左右耳片的差值为耳廓肿胀度 ，并
[8]
1.5
1.4 C/ 计算肿胀抑制率：肿胀抑制率（%）＝（空白对照组平均
12
20 3.0
18 2.5 耳廓肿胀度－药物组平均耳廓肿胀度）/空白对照组平均
16 14 2.0 10
C/（mL/g） 12 1.5 B/h 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0
10 1.0 B/h 耳廓肿胀度×100%。平行2次实验。
C.因素B与因素C的交互作用 结果显示，与空白对照组比较，阳性对照组和艾纳
图3 各因素交互作用对艾纳香素得率影响的等高线及 香素各剂量组小鼠的耳廓肿胀度均显著降低（P＜0.05
响应面图 或 P＜0.01），但随着艾纳香素剂量的升高，其肿胀抑制
2.3.2 验证实验 率反而下降。与阳性对照组比较，艾纳香素中、高剂量
取艾纳香干燥茎叶粉末40 g，按上述最优提取工艺 组小鼠的耳廓肿胀度均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。
结果见表5。
平行操作3次进行验证实验，所得艾纳香素的得率分别
表5 艾纳香素对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀影响的结果
为 1.95、1.96、2.00 mg/g，平均得率为 1.97 mg/g（RSD＝
（x±s，n＝10）
1.34%），与预测值基本相符，说明提取工艺稳定可靠。
2.4 艾纳香素的体外抗菌活性考察 组别 肿胀度/mg 肿胀抑制率/%
空白对照组 7.28±2.99 －
采用微量稀释法进行抗菌活性考察 。取艾纳香素 阳性对照组 1.27±0.89 a 82.92
[7]
（自提）与头孢呋辛钠（阳性对照）以 10% 二甲基亚砜溶 艾纳香素低剂量组 1.82±0.61 a 75.03
解配制为适宜浓度梯度的溶液，分别取稀释好的化脓链 艾纳香素中剂量组 3.44±1.25 ab 52.69
艾纳香素高剂量组 5.10±1.38 cd 29.94
球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、变异链球菌、枯草
－：无相应数据；a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与阳性对照组
芽孢杆菌、藤黄微球菌的菌液180 µL与药液20 µL加入
比较，P＜0.05；c：与空白对照组比较，P＜0.05；d：与阳性对照组比较，
5
96 孔板中，菌液终浓度为 10 CFU/mL，药物终浓度为 P＜0.01。
1.56～1 600 µg/mL；于 37 ℃恒温培养箱中培养 24 h，裸 2.5.2 对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的影响
眼观察，以孔内液体澄清无沉淀的最小质量浓度为最低 取50只昆明小鼠，分组及给药同“2.5.1”项下。在给
抑菌浓度（minimum inhibitory concentration，MIC）。选 药5 h后，于小鼠尾静脉注入0.5%伊文思蓝生理盐水溶
择艾纳香素 MIC 值较小的化脓链球菌与金黄色葡萄球 液 10 mL/kg，腹腔注射 0.6% 醋酸生理盐水溶液 0.20
菌测定最低杀菌浓度（minimum bactericidal concentra‐ mL，20 min 后处死小鼠，开腹用生理盐水洗涤腹腔，收
tion，MBC），即取上述两种菌2MIC、4MIC、8MIC质量浓 集洗涤液后加入生理盐水至 10 mL，以 2 000 r/min 离心
度的孔内液体接种于琼脂平板，于 37 ℃恒温培养箱中 15 min，取上清液用酶标仪在590 nm波长处检测吸光度

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