Page 23 - 《中国药房》2023年19期

Bax

Bcl-2

A.空白组 B. NAFLD-HCC组 C. DOX组 D. LGZG组 E. DOX+LGZG组
图4 各组小鼠肝脏组织中Bax、Bcl-2蛋白免疫组化染色图

本研究造模后肉眼观察发现，NAFLD-HCC 组小鼠
LC3Ⅰ/LC3Ⅱ 14/16 kDa
肝脏有灰白色肿瘤结节。病理形态学染色可见肝组织
Beclin1 60 kDa 细胞体积增大、脂肪变性，炎症细胞大量浸润，部分细胞
出现气球样变，有小细胞性增生；肝脏组织中可见大量
P62 62 kDa 蓝色胶原纤维表达。AFP与肝癌细胞的增殖密切相关，
是原发性肝癌特异性最高的肿瘤标志物，CEA是一种广
GAPDH 37 kDa
谱性的肿瘤标志物，AFP、CEA 的联合检测是诊断原发
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 性肝癌的重要指标 。本研究检测发现，NAFLD-HCC
[10]
A.蛋白表达电泳图
组小鼠血清中AFP和CEA含量明显升高。Ki-67又称为
2.0
核增殖抗原，是细胞增生指数的一种标志，其阳性表达
bc 空白组
1.5 bc b NAFLD-HCC组 率越高，肿瘤恶性程度越高 。本研究免疫组化结果显
[11]
蛋白表达水平 1.0 b b a b b b DOX组 示，NAFLD-HCC 组小鼠肝脏组织中 Ki-67 蛋白表达水
LGZG组
0.5 bc DOX+LGZG组 平明显升高。上述结果均提示 NAFLD-HCC 模型建立
成功。本文对 DOX、LGZG 及 LGZG 联合 DOX 干预
NAFLD-HCC 效果的影响进行了研究，结果显示，以
0
LC3Ⅱ/LC3Ⅰ Beclin1 P62 DOX、LGZG 及 LGZG 联合 DOX 干预后，小鼠上述指标
B.蛋白表达水平的检测结果（n＝3）
Ⅰ：空白组；Ⅱ：NAFLD-HCC组；Ⅲ：DOX组；Ⅳ：LGZG组；Ⅴ： 均有不同程度的改善，且 LGZG 联合 DOX 的改善作用
DOX+LGZG组；a：与空白组比较，P＜0.05；b：与NAFLD-HCC组比较， 更明显。然而，LGZG联合DOX化疗的增效减毒作用机
P＜0.05；c：与DOX组比较，P＜0.05。 制仍有待进一步探讨。
图5 各组小鼠肝脏组织中自噬相关蛋白的表达结果 化疗药物可通过诱导细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞，肿

4 讨论 瘤细胞对化疗耐药的实质是药物不能活化其凋亡途径，
NAFLD-HCC 发病较为隐匿，多数患者确诊时已是 因此，凋亡耐受的肿瘤细胞是多种化疗药物产生耐药性
的主要原因 。研究发现，自噬介导的细胞死亡可增强
[12]
中晚期，丧失手术治疗的时机，因此治疗上以化疗为主。
NAFLD-HCC 化疗敏感性 。因此，自噬可能是 LGZG
[13]
虽然化疗可以杀灭肝癌细胞，但其特异性差，长时间的
增效减毒、逆转DOX肿瘤耐药性的重要靶点。
化疗有很大毒性，易损伤脾胃运化功能。因此，脾虚亦
Beclin1 是自噬体形成启动复合物 Class Ⅲ PI3K 的
是肝癌化疗后的重要病机，NAFLD-HCC 治疗应采取扶
[14]
关键组分，在自噬的发生过程中发挥着重要作用 。
正兼顾祛邪的原则。中药联合化疗，能增加肿瘤细胞对
LC3 是自噬过程的标志物，主要参与了自噬小体的形
化疗药物的敏感性、提高机体对化疗的耐受力、延长生
成，其合成后立即被自噬相关基因4剪切掉羧基端，形成
[9]
存期 。LGZG为健脾温阳化浊的代表方，其中茯苓为君 胞浆型 LC3 即 LC3Ⅰ；随后 LC3Ⅰ会酶解掉一小段多
药，健脾以化痰湿；桂枝为臣药，温通阳气；白术为佐药，健 肽，偶联磷脂酰乙醇胺形成膜型 LC3Ⅱ，因此，LC3Ⅱ/
脾燥湿，又可补益脾阳；甘草为使药，补中益气，调和诸药； LC3Ⅰ比值在一定程度上反映了自噬的程度 。自噬体
[15]
四药合用可使脾气健运。故应用 LGZG 作为 NAFLD- 形成过程中，P62 作为链接 LC3 和聚泛素化蛋白之间的
HCC治疗或辅助化疗用药，符合中医治病求本的治则。 桥梁，被选择性地包裹进自噬体，之后被自噬溶酶体中

中国药房 2023年第34卷第19期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 19 · 2321 ·