Page 32 - 《中国药房》2023年19期

2.2.4 化合物鉴定结果 2.3.3 稳定性考察
正、负离子模式下 EPDM 的总离子流图见图 1。结 按“2.1.2”项下方法制备EPDM供试品溶液（样品编
果显示，共鉴定出11个化合物，其具体信息见表1。 号 S1），于制备后 0、2、4、8、12、24 h，分别按“2.2.1”项下
色谱条件进样测定，以8号峰为参照峰，计算得各共有峰
100
80 相对保留时间的RSD均小于0.23%、相对峰面积的RSD
相对丰度/% 60 7 均小于 3.17%（n＝6），表明供试品溶液在制备后 24 h 内
40
20 11 10 9 8 6 5 4 3 2 1 稳定性良好。
0 2.3.4 HPLC指纹图谱的建立
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
t/min 取10批EPDM样品，分别按“2.1.2”项下方法制备供
A.负离子模式下
试品溶液，再分别按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，收
100
80 集色谱图。将10批供试品的色谱图导入《中药色谱指纹
相对丰度/% 60 7 4 1 图谱相似度评价系统（2004A 版）》，以样品 S1 的图谱为
40
20 11 10 9 8 6 5 3 2 参照图谱，设置时间窗宽度为 0.1 min，采用自动匹配方
0 法经多点校正后生成指纹图谱，并以中位数法生成对照
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
t/min 图谱 R，详见图 2。结果，10 批样品共标定出了 10 个共
B.正离子模式下
有峰。
图1 正、负离子模式下EPDM的总离子流图
8
表1 EPDM中化合物鉴定结果 4
75.64 1 2 3 5 6 7 9 10
保留时 实测值 误差/ R
编号 化合物名称 分子式 母离子 主要二级碎片离子（m/z） 53.70 S10
间/min （m/z） ppm S9
S8
1 金合欢素-7-（6-丙二 C 25H 24O 13 99.261 67 [M+H] + 533.129 03 1.38 285.075 84，153.018 46 mAU 31.76 S7
酰基葡萄糖苷） [6] 9.82 S6
S5
2 咖啡酸甲酯-2-迷迭 C 28H 24O 12 89.768 33 [M－H] － 551.119 93 －2.41 359.077 27，197.045 44， S4
S3
－12.12
香酸酯 [6] 161.024 19 S2
S1
3 金合欢素-7-O-（6-甲 C 23H 24O 10 86.000 67 [M+H] + 461.107 61 1.67 285.075 78 0 15.94 31.89 47.83 63.78 79.72 95.67 111.61
基葡萄糖苷） [6] t/min
4 TL [6] C 22H 22O 10 82.133 33 [M+H] + 447.128 36 1.58 285.075 74 图2 10批EPDM的HPLC指纹图谱和对照图谱R
5 丹酚酸B [6] C 36H 30O 16 81.385 00 [M+H] + 719.159 00 0.78 323.054 60，295.059 69，
181.049 48 2.3.5 共有峰的指认
6 DG [6] C 22H 20O 12 57.271 67 [M+H] + 477.102 72 1.52 301.070 62 将对照图谱R与混合对照品的图谱（取“2.1.1”项下
7 RA C 18H 16O 8 55.423 33 [M－H] － 359.077 39 －1.99 161.024 31
8 APG [6] C 21H 18O 11 54.448 33 [M+H] + 447.092 10 1.61 271.060 03 混合对照品溶液①按“2.2.1”项下色谱条件进样测定后
9 丹酚酸 E [6] C 36H 30O 16 50.341 67 [M－H] － 717.147 03 －0.89 519.092 35，475.103 21， 所得）进行对比，共指认出 5 个共有色谱峰，其中 1 号峰
339.050 84，295.060 91 为 LG、3 号峰为 APG、4 号峰为 RA、5 号峰为 DG、8 号峰
10 LG [6] C 21H 18O 12 47.313 33 [M+H] + 463.086 94 1.54 287.054 99
41.710 00 [M－H] － 279.050 87 －6.83 119.049 95，163.039 81 为TL。结果见图3。
11 （E）-cinnamyl-（Z）-p- C 9H 8O 3
coumarate [6]
80
2.3 EPDM的HPLC指纹图谱建立 60 8
2.3.1 精密度考察 mAU 40 1 4
取“2.1.2”项下EPDM供试品溶液（样品编号S1），按 20 3 5
0
“2.2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，以 8 号峰为参照峰 －20
0 20 40 60 80 100
（该色谱峰分离度较好，且有较大的峰面积），计算得各 t/min
A.对照图谱R
共有峰相对保留时间的RSD均小于0.04%、相对峰面积 RA
的RSD均小于0.48%（n＝6），表明该方法精密度良好。 80
60 TL
2.3.2 重复性考察 mAU 40 LG DG
按“2.1.2”项下方法配制 6 份 EPDM 供试品溶液（样 20 APG
0
品编号S1），按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，以8号峰 －20
为参照峰，计算得各共有峰相对保留时间的RSD均小于 0 20 40 60 80 100
t/min
0.15%、相对峰面积的RSD均小于4.67%（n＝6），表明该 B.混合对照品溶液①
方法重复性良好。 图3 对照图谱R和混合对照品溶液①的HPLC图

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