Page 94 - 《中国药房》2023年17期

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3.6 Andro 对 大 鼠 创 面 组 织 中 HIF-1α、VEGF 及 特点 。糖尿病足患者伤口愈合延迟的关键因素是局
Hippo-YAP信号通路相关蛋白表达的影响 部新生毛细血管生成和外周血流的减少。因此，促进血
与 Control 组比较，Model 组大鼠创面组织中 HIF- 管新生及创面愈合、改善并恢复足部血流是治疗糖尿病
1α、VEGF 蛋白表达水平，MST1、LATS1、YAP 蛋白的磷 足的关键。大量研究表明，二甲双胍可通过减少炎症、
酸化水平均显著降低（P＜0.05）；与Model组比较，Andro 氧化应激、减轻局部胰岛素抵抗和促进血管生成等促进
低、中、高剂量组大鼠创面组织中HIF-1α、VEGF蛋白表 创面愈合，但也有研究表明二甲双胍能通过抑制角质细
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达水平，MST1、LATS1、YAP 蛋白的磷酸化水平均显著 胞增殖延长创面愈合时间 。此外，尚未有研究表明二
升高，且呈剂量依赖性（P＜0.05）；与 Andro 高剂量组比 甲双胍可以通过调节 Hippo-YAP 信号通路促进糖尿病
较，抑制剂组大鼠创面组织中 HIF-1α、VEGF 蛋白表达 足大鼠血管生成，因此本研究未用二甲双胍作为阳性对
水平，MST1、LATS1、YAP 蛋白的磷酸化水平均显著降 照药物进行研究。
低（P＜0.05）。结果见图3和表4。 Andro是从草本植物穿心莲中分离出来的一种二萜
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类化合物，具有广泛的药理活性 。近年来研究发现，
HIF-1α 105 kDa Andro 能够通过抑制氧化应激与炎症反应，改善糖尿病
肾病、糖尿病心肌病 [6―7] 。此外有研究发现，Andro 具有
VEGF 151 kDa
一定的糖代谢调节能力，与没食子酸联用可显著降低链
脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的血糖 [17―18] 。本研究发现，
MST1 55 kDa
Andro 能有效降低糖尿病足大鼠 FBG、FINS、TC、TG、
p-MST1 56 kDa LDL-C 含量，显著增加 HDL-C 含量，表明 Andro 具有降
低糖尿病足大鼠血糖、血脂的作用。由此推测，Andro可
LATS1 150 kDa
能对糖尿病足创面愈合有一定的积极作用。
HIF-1α/VEGF 轴功能受损是糖尿病相关血管生成
p-LATS1 150 kDa
障碍的主要机制。HIF-1是一种由翻译后调控的α-亚基
YAP 75 kDa 和组成型表达的β-亚基组成的异源二聚体，被广泛认为
是氧稳态的主要调节因子。在缺氧组织条件下，HIF-1α
p-YAP 73 kDa
的羟基化作用减弱，导致HIF-1α蛋白不稳定，并启动多个
对血管生成至关重要的基因表达，最明显的是VEGF 。
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GAPDH 36 kDa
糖尿病患者 HIF-1α 的功能活性降低，这种变化导致
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
Ⅰ：Control组；Ⅱ：Model组；Ⅲ：Andro低剂量组；Ⅳ：Andro中剂量 VEGF 不能上调以应对软组织缺血，使血管生成和伤口
组；Ⅴ：Andro高剂量组；Ⅵ：抑制剂组。 愈合受损。研究已经证明，上调HIF-1α/VEGF轴可有效
图3 各组大鼠创面组织中 HIF-1α、VEGF 及 Hippo- 促进糖尿病足大鼠血管生成及伤口愈合 。EPCs 既能
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YAP信号通路相关蛋白表达的电泳图
分化为内皮细胞，又能分泌生长因子、细胞因子和血管
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表4 各组大鼠创面组织中 HIF-1α、VEGF 及 Hippo- 活性物质，促进血管生成，维持血管稳态 。EPCs 的数
YAP信号通路相关蛋白表达情况比较（x±s，n＝6） 量和功能异常是判断糖尿病血管病变严重程度的一种
分组 HIF-1α/GAPDH VEGF/GAPDH p-MST1/MST1 p-LATS1/LATS1 p-YAP/YAP 可靠指标，也是导致患者伤口不愈合的关键因素 。本
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Control组 0.98±0.11 1.23±0.14 0.89±0.07 0.95±0.09 0.92±0.07 研究发现，糖尿病足大鼠创面组织中 HIF-1α、VEGF 蛋
Model组 0.11±0.02 a 0.19±0.03 a 0.10±0.01 a 0.07±0.01 a 0.15±0.02 a
Andro低剂量组 0.29±0.03 b 0.52±0.05 b 0.27±0.02 b 0.28±0.03 b 0.26±0.04 b 白表达水平，创面愈合率，毛细血管数和外周血中EPCs
Andro中剂量组 0.57±0.06 bc 0.84±0.07 bc 0.58±0.06 bc 0.59±0.08 bc 0.58±0.05 bc 比例均明显降低，而给予Andro后则显著提高了糖尿病
Andro高剂量组 0.88±0.09 bcd 1.12±0.10 bcd 0.84±0.08 bcd 0.92±0.10 bcd 0.87±0.09 bcd
抑制剂组 0.24±0.03 e 0.37±0.04 e 0.23±0.02 e 0.27±0.04 e 0.31±0.03 e 足大鼠创面组织中 HIF-1α、VEGF 蛋白表达水平，创面
a：与Control组比较，P＜0.05；b：与Model组比较，P＜0.05；c：与 愈合率，毛细血管数和外周血中 EPCs 比例，提示 Andro
Andro低剂量组比较，P＜0.05；d：与Andro中剂量组比较，P＜0.05；e： 具有促进糖尿病足大鼠血管生成及伤口愈合的作用。
与Andro高剂量组比较，P＜0.05。 Hippo-YAP 信 号 通 路 包 含 MST1/2、调 节 蛋 白 和
4 讨论 LATS1/2。YAP 和带有 PDZ 结合基序的转录辅激活因
糖尿病足是糖尿病的严重并发症，也是糖尿病患者 子是 Hippo 通路的主要下游效应物。MST1/2 磷酸化并
住院的最常见原因之一。糖尿病足发生的常见危险因 激活 LATS1/2，LATS1/2 在 Ser-127 或 Ser-381 位点磷酸
素包括血糖控制不良、周围神经病变、外周血管疾病和 化 YAP，导致其细胞质保留和降解，并随后抑制其靶基
免疫抑制等，具有伤口极易感染、较难愈合、反复发作等 因转录。研究发现，中性粒细胞胞外陷阱可抑制Hippo-

· 2132 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 17 中国药房 2023年第34卷第17期