Page 37 - 《中国药房》2023年16期

水，浸泡4 h，煎煮2次（第1次煎煮2 h，第2次煎煮1 h）； 的 RSD 为 0.24%～2.77%（n＝6），表明供试品溶液在室
合并2次煎煮液，用纱布（8层）滤过，置于70 ℃水浴中浓 温下放置48 h内稳定性良好。
缩至近干，冷冻干燥，分别得朱砂根单煎冻干粉（编号为 2.4.2 指纹图谱建立
DZ1～DZ10）、山 豆 根 单 煎 冻 干 粉（编 号 为 DS1～ （1）分别取 10 批朱砂根、山豆根单煎冻干粉供试品
DS10），每克冻干粉约相当于生药量5～7 g。 溶液和合煎冻干粉供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进
2.2.2 朱砂根-山豆根药对的合煎冻干粉样品 样测定，记录色谱图。将图谱数据导入《中药色谱指纹
分别精密称取“1.2”项下10批朱砂根-山豆根药对， 图谱相似度评价系统（2012版）》，分别以DZ1、DS1、ZS1
按“2.2.1”项下方法操作，即得朱砂根-山豆根药对的合 为参照图谱，采用中位数法，以多点校正进行色谱峰自
煎冻干粉（编号为ZS1～ZS10），每克冻干粉约相当于生 动匹配，生成对应的叠加指纹图谱和对照图谱（ZR、SR、
药量6～8 g。
ZSR）。结果显示，10 批朱砂根单煎冻干粉样品图谱中
2.3 溶液的制备
有5个共有峰，10批山豆根单煎冻干粉样品图谱中有10
2.3.1 单一对照品溶液
个共有峰，10批合煎冻干粉样品图谱中有14个共有峰。
称取没食子酸、苦参碱、氧化苦参碱、岩白菜素、三
结果见图1。
叶豆紫檀苷对照品适量，精密称定，加入10%甲醇，制成
5 000 8
上述各成分质量浓度分别为 2.358、2.056、1.020、1.083、 4 800
4 400
1.010 mg/mL的单一对照品溶液。 4 000
3 600
mAU 3 200 1 2 3 12 ZR
2.3.2 混合对照品溶液 2 800
2 400
DZ9
分别吸取“2.3.1”项下各单一对照品溶液适量，加入 2 000 DZ10
DZ8
1 600
1 200 DZ7
DZ6
10% 甲醇，制成上述各成分质量浓度分别为 0.047、 800 DZ5
DZ4
400 DZ3
DZ2
0.123、0.122、0.303、0.024 mg/mL 的混合对照品溶液，于 0 DZ1
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 50
4 ℃冰箱中保存，备用。 t/min
A.朱砂根单煎冻干粉
2.3.3 供试品溶液 7
1 700 4 14
称取上述单煎冻干粉0.05 g、合煎冻干粉0.1 g，精密 1 600 5 6 9 10 11 12 13 SR
1 400 DS10
称定，分别置于具塞锥形瓶中，精密加入 10% 甲醇 20 1 200 DS9
mL，密塞，称重，超声（功率500 W、频率40 kHz）处理30 mAU 1 000 DS8
DS7
800
min；放冷，再次称重，用 10% 甲醇补足减失的重量，摇 600 DS6
DS5
匀；取上清液，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得 400 DS4
DS3
200
DS2
各供试品溶液。 0 DS1
2.4 HPLC指纹图谱的建立 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 50
t/min
2.4.1 方法学考察 B.山豆根单煎冻干粉
8
4 600
（1）取“2.3.3”项下合煎冻干粉供试品溶液（编号 4 200
3 800
ZS8），按“2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，以岩白菜素 3 400
3 200
峰为参照，计算得各共有峰相对保留时间的 RSD 为 mAU 2 800 1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 13 14 ZSR
2 400
ZS9
0.23%～1.02%（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 0.19%～ 2 000 ZS10
ZS8
1 600 ZS7
1 200 ZS6
1.75%（n＝6），表明方法精密度良好。（2）取“2.2.2”项下 800 ZS5
ZS4
400 ZS3
合煎冻干粉样品（编号ZS8），共6份，按“2.3.3”项下方法 0 ZS2
ZS1
制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，以 0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 50
t/min
岩白菜素峰为参照，计算得各共有峰相对保留时间的 C.合煎冻干粉
图1 单煎冻干粉、合煎冻干粉样品的 HPLC 叠加指纹
RSD 为 0.04%～0.33%（n＝6），相对峰面积的 RSD 为
图谱及对照图谱
0.99%～2.90%（n＝6），表 明 方 法 重 复 性 良 好 。（3）取
“2.3.3”项下合煎冻干粉供试品溶液（编号 ZS8），分别于 （2）采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012
室温下放置 0、3、6、12、24、48 h 时按“2.1”项下色谱条件 版）》对朱砂根、山豆根单煎冻干粉和合煎冻干粉样品的
进样测定，以岩白菜素峰为参照，计算得各共有峰相对 指纹图谱进行相似度评价。结果显示，朱砂根单煎冻干
保留时间的 RSD 为 0.12%～0.63%（n＝6），相对峰面积 粉、山豆根单煎冻干粉、合煎冻干粉样品色谱图与对照
中国药房 2023年第34卷第16期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 16 · 1951 ·