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2.8 大鼠肝组织中 FXR 信号通路相关蛋白和 NF-κB 组大鼠血清中 MDA、GSH 水平均显著逆转(P<0.05),
p65蛋白表达检测 HBF-L组大鼠血清中仅MDA水平显著逆转(P<0.05或
采用Western blot法进行检测。取-80 ℃下保存的 P<0.01)。结果见表3。
肝组织适量,经裂解、研磨、静置后,以12 000 r/min离心 表3 HBF 对大鼠血清中氧化应激指标的影响(x±s,
10 min,取上清液,测定蛋白浓度后煮沸变性;取变性蛋 n=6)
白样品适量,经电泳分离后转膜,封闭;加入 FXR、 组别 MDA/(μmol/L) GSH/(μmol/L) SOD/(U/mL)
control组 3.93±0.26 13.64±1.97 269.43±17.21
MRP2、BSEP、NTCP、β-tubulin 和 NF-κB p65 一抗(稀释
model组 16.87±2.29 a 6.67±5.03 a 247.49±9.91 b
比例分别为1∶4 000、1∶1 000、1∶1 000、1∶1 000、1∶5 000、
UDCA组 13.53±1.93 c 17.60±4.21 d 239.36±19.33
1∶1 000),于 4 ℃下孵育过夜;加入相应二抗(稀释比例 HBF-L组 12.58±2.69 d 10.62±3.78 242.49±18.38
1∶2 000),于室温下孵育1 h;以化学发光法显色,使用全 HBF-M组 12.37±2.80 d 11.56±4.18 c 242.65±15.76
HBF-H组 12.12±3.28 d 13.42±2.71 d 254.78±10.75
自动成像分析系统成像。以β-tubulin为内参,计算目的
a:与control组比较,P<0.01;b:与control组比较,P<0.05;c:与
蛋白与内参蛋白的灰度值比值,用以表示目的蛋白的相
model组比较,P<0.05;d:与model组比较,P<0.01。
对表达量。
3.4 HBF对大鼠肝组织病理形态的影响
2.9 统计学方法
control 组大鼠肝组织形态结构完整,肝索结构清
采用 SPSS 25 软件对数据进行统计分析。数据以
晰,肝细胞排列紧密,界限清晰且大小正常,未见明显异
x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
常;model 组大鼠肝组织受损严重,细胞边界缺失,中央
比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
静脉周围可见肝细胞灶性坏死,伴明显的炎症细胞浸
3 结果 润;UDCA 组大鼠肝组织中肝细胞形态结构较为完整,
3.1 HBF对大鼠一般生理状况的影响 未见明显坏死;HBF-L 组大鼠肝组织形态结构有所好
造模前,各组大鼠的精神状态、活动、尿色、毛发等 转,但仍伴有少量肝细胞灶性坏死和炎症细胞浸润;
生理状况均正常。造模后,与 control 组比较,其余各组 HBF-M组大鼠大部分肝细胞形态结构完整,伴有少量肝
大鼠均出现不同程度的活动减少、皮肤瘙痒、尿黄等;与 细胞灶性坏死和炎症细胞浸润;HBF-H组大鼠肝组织形
model 组比较,各药物组大鼠的上述生理状况均有一定 态与control组相似,肝细胞形态结构保持完整,较model
程度的改善。各组大鼠均未死亡。 组显著好转。结果见图1。
3.2 HBF对大鼠血清中肝功能指标的影响
与 control 组比较,model 组大鼠血清中 AST、ALT、
ALP、TBA、DBIL、TBIL 含量均显著升高(P<0.01)。与
model组比较,HBF-H组大鼠上述指标均显著降低(P<
0.05或P<0.01),而HBF-L组、HBF-M组、UDCA组大鼠
均只有部分指标显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。结果 A. control组 B. model组
见表2。
表2 HBF 对大鼠血清中肝功能指标的影响(x±s,
n=6)
组别 AST/(U/L) ALT/(U/L) ALP/(U/L) TBA/(μmol/L) DBIL/(μmol/L)TBIL/(μmol/L)
control组 42.12±5.61 33.28±5.85 167.89±60.66 13.70±3.97 0.84±0.06 0.57±0.20
model组 58.95±5.95 108.06±16.3 776.37±118.52 315.20±16.39 a 29.43±9.37 a 61.90±7.97 a C. UDCA组 D. HBF-L组
a
a
a
UDCA组 38.59±9.53 107.80±7.90 556.58±90.79 b 276.66±22.59 b 21.73±6.76 60.64±11.43
b
b
HBF-L组 71.11±7.43 106.60±19.55 619.04±117.93 295.18±12.90 24.88±13.04 63.06±11.15
HBF-M组 58.45±10.70 106.49±24.67 546.78±53.39 b 272.62±26.22 b 18.88±5.89 c 51.17±8.27
c
HBF-H组 47.94±13.96 88.83±6.71 505.55±127.52 229.86±34.31 b 16.40±4.68 b 43.51±11.80 b
b
c
a:与control组比较,P<0.01;b:与model组比较,P<0.01;c:与
model组比较,P<0.05。
3.3 HBF对大鼠血清中氧化应激指标的影响
E. HBF-M组 F. HBF-H组
与control组比较,model组大鼠血清中MDA水平显 →:炎症细胞浸润。
著升高,GSH、SOD 水平均显著降低(P<0.05 或 P< 图1 HBF 对大鼠肝组织病理形态变化影响的显微图
0.01)。与 model 组比较,HBF-M 组、HBF-H 组、UDCA (HE染色)
· 1946 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 16 中国药房 2023年第34卷第16期