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2.8 大鼠肝组织中 FXR 信号通路相关蛋白和 NF-κB                      组大鼠血清中 MDA、GSH 水平均显著逆转(P<0.05),
          p65蛋白表达检测                                           HBF-L组大鼠血清中仅MDA水平显著逆转(P<0.05或
              采用Western blot法进行检测。取-80 ℃下保存的                  P<0.01)。结果见表3。
          肝组织适量,经裂解、研磨、静置后,以12 000 r/min离心                    表3 HBF 对大鼠血清中氧化应激指标的影响(x±s,
          10 min,取上清液,测定蛋白浓度后煮沸变性;取变性蛋                             n=6)
          白样品适量,经电泳分离后转膜,封闭;加入 FXR、                           组别         MDA/(μmol/L)  GSH/(μmol/L)  SOD/(U/mL)
                                                              control组    3.93±0.26     13.64±1.97  269.43±17.21
          MRP2、BSEP、NTCP、β-tubulin 和 NF-κB p65 一抗(稀释
                                                              model组     16.87±2.29 a   6.67±5.03 a  247.49±9.91 b
          比例分别为1∶4 000、1∶1 000、1∶1 000、1∶1 000、1∶5 000、
                                                              UDCA组      13.53±1.93 c   17.60±4.21 d  239.36±19.33
          1∶1 000),于 4 ℃下孵育过夜;加入相应二抗(稀释比例                     HBF-L组     12.58±2.69 d   10.62±3.78  242.49±18.38
          1∶2 000),于室温下孵育1 h;以化学发光法显色,使用全                     HBF-M组     12.37±2.80 d   11.56±4.18 c  242.65±15.76
                                                              HBF-H组     12.12±3.28 d   13.42±2.71 d  254.78±10.75
          自动成像分析系统成像。以β-tubulin为内参,计算目的
                                                                 a:与control组比较,P<0.01;b:与control组比较,P<0.05;c:与
          蛋白与内参蛋白的灰度值比值,用以表示目的蛋白的相
                                                              model组比较,P<0.05;d:与model组比较,P<0.01。
          对表达量。
                                                              3.4 HBF对大鼠肝组织病理形态的影响
          2.9 统计学方法
                                                                  control 组大鼠肝组织形态结构完整,肝索结构清
              采用 SPSS 25 软件对数据进行统计分析。数据以
                                                              晰,肝细胞排列紧密,界限清晰且大小正常,未见明显异
          x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两
                                                              常;model 组大鼠肝组织受损严重,细胞边界缺失,中央
          比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。
                                                              静脉周围可见肝细胞灶性坏死,伴明显的炎症细胞浸
          3 结果                                                润;UDCA 组大鼠肝组织中肝细胞形态结构较为完整,
          3.1 HBF对大鼠一般生理状况的影响                                 未见明显坏死;HBF-L 组大鼠肝组织形态结构有所好
              造模前,各组大鼠的精神状态、活动、尿色、毛发等                         转,但仍伴有少量肝细胞灶性坏死和炎症细胞浸润;
          生理状况均正常。造模后,与 control 组比较,其余各组                      HBF-M组大鼠大部分肝细胞形态结构完整,伴有少量肝
          大鼠均出现不同程度的活动减少、皮肤瘙痒、尿黄等;与                           细胞灶性坏死和炎症细胞浸润;HBF-H组大鼠肝组织形
          model 组比较,各药物组大鼠的上述生理状况均有一定                         态与control组相似,肝细胞形态结构保持完整,较model
          程度的改善。各组大鼠均未死亡。                                     组显著好转。结果见图1。
          3.2 HBF对大鼠血清中肝功能指标的影响
              与 control 组比较,model 组大鼠血清中 AST、ALT、
          ALP、TBA、DBIL、TBIL 含量均显著升高(P<0.01)。与
          model组比较,HBF-H组大鼠上述指标均显著降低(P<

          0.05或P<0.01),而HBF-L组、HBF-M组、UDCA组大鼠
          均只有部分指标显著降低(P<0.05 或 P<0.01)。结果                             A. control组             B. model组
          见表2。
          表2 HBF 对大鼠血清中肝功能指标的影响(x±s,
               n=6)
           组别   AST/(U/L) ALT/(U/L)  ALP/(U/L) TBA/(μmol/L) DBIL/(μmol/L)TBIL/(μmol/L)
           control组 42.12±5.61  33.28±5.85 167.89±60.66  13.70±3.97  0.84±0.06  0.57±0.20
           model组 58.95±5.95 108.06±16.3 776.37±118.52 315.20±16.39 a  29.43±9.37 a  61.90±7.97 a  C. UDCA组  D. HBF-L组
                            a
                                   a
                    a
           UDCA组 38.59±9.53 107.80±7.90 556.58±90.79 b  276.66±22.59 b  21.73±6.76  60.64±11.43
                    b
                                   b
           HBF-L组 71.11±7.43 106.60±19.55 619.04±117.93 295.18±12.90  24.88±13.04 63.06±11.15
           HBF-M组 58.45±10.70 106.49±24.67 546.78±53.39 b  272.62±26.22 b  18.88±5.89 c  51.17±8.27
                     c
           HBF-H组 47.94±13.96 88.83±6.71 505.55±127.52 229.86±34.31 b  16.40±4.68 b  43.51±11.80 b
                                   b
                            c
             a:与control组比较,P<0.01;b:与model组比较,P<0.01;c:与
          model组比较,P<0.05。
          3.3 HBF对大鼠血清中氧化应激指标的影响
                                                                      E. HBF-M组               F. HBF-H组
              与control组比较,model组大鼠血清中MDA水平显                       →:炎症细胞浸润。
          著升高,GSH、SOD 水平均显著降低(P<0.05 或 P<                     图1 HBF 对大鼠肝组织病理形态变化影响的显微图
          0.01)。与 model 组比较,HBF-M 组、HBF-H 组、UDCA                  (HE染色)
          · 1946 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 16                            中国药房  2023年第34卷第16期
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