Page 30 - 《中国药房》2023年16期

and CYP7A1， and the relative expression of NF-κB p65 in liver tissue were significantly decreased； the levels of GSH in serum，
the mRNA expressions of FXR， SHP， MRP2， BSEP， NTCP and OATP2， and the relative expressions of FXR， MRP2， BSEP and
NTCP in liver tissue were significantly increased （P＜0.05 or P＜0.01）； the pathological changes of liver tissue were significantly
improved. Only some indexes in HBF-L group， HBF-M group and UDCA group were significantly reversed （P＜0.05 or P＜0.01）.
CONCLUSIONS HBF can prevent intrahepatic cholestatic liver injury in rats， and the effects may be related to the activation of
FXR signaling pathway and the reduction of inflammation and oxidative stress.
KEYWORDS Hugan buzure formula； intrahepatic cholestatic liver injury； farnesoid X receptor signaling pathway； inflammatory
reaction； oxidative stress

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胆汁淤积是多种肝胆疾病常见的基本病理改变 。 司）、FluorChem E 0723 型超灵敏全自动成像分析系统
作为一种进行性肝病，该症与肝外胆管、肝内胆管梗阻 （美国ProteinSimple公司）等。
或肝细胞分泌胆汁方式改变所致胆汁流中断有关，表现 1.2 主要药品与试剂
为有毒胆汁成分（包括胆汁酸、胆固醇和胆红素等）在肝 菊苣根（批号 JJZ-YP-200527）、菊苣子（批号 JJZ-
脏内过度蓄积，从而损害肝细胞，最终引发肝脏炎症、肝 YP-191209）、茴香根皮（批号 HXGP-YP-210115）均购自
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纤维化甚至肝硬化 。WHO统计数据显示，肝硬化是中 新疆宝康药业有限公司，芹菜根（批号Z30142203）、芹菜
低收入国家人群第八大死亡原因，且对于终末期肝病患 子（批号 G30131002）均购自新疆维吾尔自治区维吾尔
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者而言，唯一可用的治疗方法是肝移植 。由于目前缺 医医院，小茴香（批号 XHX-YP-170803）、菟丝子（批号
乏治疗胆汁淤积性肝病的有效药物，因此中医药治疗胆 150701）均购自新疆和济中药饮片有限公司，以上药材
汁淤积的疗效及其作用机制研究备受学界关注。 经新疆医科大学药学院胡君萍教授鉴定均为真品。
护肝布祖热方（Hugan buzure formula，HBF）是保肝 α - 异 硫 氰 酸 萘 酯（alpha-naphthyl isothiocyanate，
护肝的经典方之一，由菊苣根、菊苣子、芹菜根、芹菜子、 ANIT）对照品（货号 551-06-4，纯度 98%）购自上海麦克
茴香根皮、小茴香、菟丝子7味药材组成，具有补益肝胃、 林生化科技股份有限公司；熊去氧胆酸（ursodeoxycho‐
散气止痛、利胆、利水的功效，用于临床治疗急慢性乙型 lic acid，UDCA）胶囊（阳性对照，货号 L20237A，规格
肝炎、黄疸性肝炎、急慢性胆囊炎、胆管炎等肝胆疾病， 250 mg）购自德国 Losan Pharma 公司；天冬氨酸转氨酶
其成方制剂为护肝布祖热颗粒。本课题组前期研究表 （aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸转氨酶（ala‐
明，HBF对四氯化碳诱导的人肝星状细胞损伤和大鼠急 nine aminotransferase，ALT）、碱性磷酸酶（alkaline phos‐
性肝损伤、肝纤维化均具有良好的改善作用 [4―6] ，但其是 phatase，ALP）、总胆汁酸（total bile acid，TBA）、总胆红
否具有体内抗胆汁淤积作用尚不清楚。有文献报道，该 素（total bilirubin，TBIL）、直接胆红素（direct bilirubin，
方主要活性成分芹菜素可通过影响法尼酯 X 受体 DBIL）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）、超氧化物歧化酶
（farnesoid X receptor，FXR）信号通路对胆汁淤积性肝病 （superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，
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发挥改善作用 ，由毛菊苣加工制成的单味制剂清热卡 MDA）检测试剂盒（批号分别为 20210708、20210708、
森颗粒可通过调控该通路而改善大鼠的肝内胆汁淤 20210708、20210707、20210709、20210618、20210709、
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积 。此外，FXR受体在抑制胆汁酸合成酶、抑制肝摄取 20210708、20210709）均购自南京建成生物工程研究所；
转运体、诱导胆汁外流转运体、促进肝脏胆汁酸代谢等 苏木精-伊红（HE）染色试剂（批号G1003）购自武汉赛维
方面也发挥着重要的调节作用，因此被称为“胆盐受 尔生物科技有限公司；反转录试剂盒、扩增试剂盒（批号
体”，是目前肝内胆汁淤积的关键治疗靶点 。基于此， 分别为AL50946A、AL51019A）均购自日本Takara公司；
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本文研究了HBF对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响， 兔源 FXR 抗体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠
并从FXR信号通路角度初步探讨了其潜在机制，旨在为 IgG 二抗（货号分别为 25055-1-AP、SA00001-1）均购自
拓展该方的临床用途提供依据。 武汉三鹰生物技术有限公司；兔源胆盐输出泵转运蛋白
1 材料 （bile salt export pump，BSEP）、多药耐药蛋白 2（multi‐
1.1 主要仪器 drug resistance protein 2，MRP2）抗体和鼠源 β-微管蛋白
本文所用主要仪器有Multiskan GO型酶标仪（美国 （β-tubulin）抗体（货号分别为AF7593、DF3873、AF7018）
Thermo Fisher Scientific 公司）、Eclipse Ni-U 型显微镜 均购自美国 Affinity 公司；鼠源钠离子依赖性牛磺胆酸
+
（日本 Nikon 公司）、QuantStudio 6 Flex 型实时荧光定 共转运蛋白（Na -taurocholate cotransporting polypeptide，
TM
量聚合酶链式反应（PCR）仪（美国 Life Technologies 公 NTCP）抗体（货号YT5372）购自苏州睿瀛生物技术有限

· 1944 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 16 中国药房 2023年第34卷第16期