Page 26 - 《中国药房》2023年14期

h、反复冻融（－20 ℃～室温）3次、－80 ℃下放置2周的 表 5 5 种柴胡皂苷类成分在不同肠段中的吸收回归
稳定性。每个质量浓度平行6份。结果显示，各样品实 方程
测质量浓度的RSD均小于15%，RE亦在±15%内，符合 成分 肠段 回归方程 r
[12]
2020年版《中国药典》（四部）的相关要求 ，表明各样品 柴胡皂苷A 十二指肠 Q＝2.49t－2.97 0.982 7
空肠 Q＝1.07t－0.99 0.996 5
在上述条件下稳定。
回肠 Q＝1.00t－0.74 0.988 6
2.4 大鼠外翻肠囊实验 十二指肠 Q＝4.30t－2.27 0.977 2
柴胡皂苷B 2
大鼠实验前禁食不禁水12 h，腹腔注射20%乌拉坦 空肠 Q＝4.02t－2.43 0.971 6
回肠 Q＝3.70t－1.77 0.975 1
麻醉，以仰卧位固定，沿腹中线和腹白线剪开皮肤与肌
柴胡皂苷C 十二指肠 Q＝3.84t－4.87 0.979 9
肉，分别取十二指肠、空肠和回肠各 10 cm，放入 0 ℃的 空肠 Q＝2.51t－2.51 0.991 0
Tyrode液中，以弯镊将各肠段表面附着的脂肪和肠系膜 回肠 Q＝2.37t－2.69 0.991 2
剥离，用 0 ℃的 Tyrode 液冲洗肠管至无肠内容物流出， 柴胡皂苷D 十二指肠 Q＝0.46t－0.03 0.944 8
空肠 Q＝0.47t－0.04 0.949 7
翻转各段肠道，使肠黏膜朝外、浆膜层向内，用 37 ℃的
回肠 Q＝0.45t+0.01 0.939 6
Tyrode 液冲洗肠内表面，将硅胶软管插入各肠管的一 柴胡皂苷F 十二指肠 Q＝3.17t－2.86 0.988 9
端，用线将肠段与硅胶软管扎紧，同时将肠段另一端扎 空肠 Q＝2.33t－1.45 0.987 3
紧，使各肠段形成囊状。向肠囊中加入Tyrode液2 mL， 回肠 Q＝1.99t－0.95 0.979 7
并移至盛有37 ℃恒温Tyrode液30 mL的麦氏浴管中平 20 40
十二指肠 十二指肠
衡 5 min，然后将肠囊中的 Tyrode 液换成“2.1.2”项下的 15 空肠 30 空肠
回肠
回肠
柴胡总皂苷提取液 2 mL 进行肠外循环（循环期间向试 Q/μg 10 Q/μg 20
管内持续通入含 5%O2、95%CO2的混合气体）。分别在 5 10
循环15、30、60、90、120 min时吸取肠囊内的吸收样品液 0 0
0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120
200 μL，同时迅速补充同温度、等体积的 Tyrode 液。所 t/min t/min
A.柴胡皂苷A B.柴胡皂苷B 2
有取样结束后，将肠管纵向剖开，自然摊于滤纸上，测量 25 4
十二指肠 十二指肠
其长度和宽度并计算其吸收面积（S）。 20 空肠 3 空肠
回肠
回肠
15
取肠吸收样品液按“2.2”项下方法处理后，再按 Q/μg Q/μg 2
“2.3.1”项下条件进样分析，以随行标准曲线计算样品中 10 5 1
各皂苷类成分的质量浓度并按下式计算其累积吸收量 0 0
0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120
V n = 1 t/min t/min
（Q）：Q＝0.2×cn× 平衡 +0.2×∑ c（式中，cn为第 n 个时 C.柴胡皂苷C D.柴胡皂苷D
V i
取样 i = 1 25 十二指肠
间点肠吸收样品液的实测质量浓度；ci为第 i 个时间点 20 空肠
回肠
肠吸收样品液的实测质量浓度；V 平衡指平衡前肠内加入 Q/μg 15
10
[13]
Tyrode液的总体积；V 取样指每次取样的体积） 。以Q对
5
循环时间（t）进行线性回归，得斜率（L）；同时，按下式计 0
0 20 40 60 80 100 120
[13]
算吸收速率常数（Ka ）：Ka＝L/S 。各样品均平行操作 5 t/min
E.柴胡皂苷F
次。实验数据均以 x±s 表示，采用 SPSS 20.0 软件以单
图2 5种柴胡皂苷类成分的Q-t曲线（x±s，n＝5）
因素方差分析对同一成分在不同肠段中的 Q 和 Ka进行
比较，检验水准α＝0.05。 表6 5 种柴胡皂苷类成分在不同肠段中循环 120 min
结果（表 5、图 2、表 6）显示，柴胡皂苷 A 等 5 种皂苷 时的Q和Ka （x±s，n＝5）
类成分均能透过肠黏膜，其中柴胡皂苷 A、B2、C、F 在十 十二指肠 空肠 回肠
成分
二指肠、空肠、回肠内的吸收均为线性吸收，其 r 均超过 Q 120min/μg K a/[μg/（min·cm）] Q 120min/μg K a/[μg/（min·cm）] Q 120min/μg K a/[μg/（min·cm）]
2
2
2
a
a
a
0.95，符合零级吸收特征；而柴胡皂苷 D 在十二指肠、空 柴胡皂苷A 12.53±4.71 0.183 4±0.074 1 7.34±2.86 0.095 3±0.038 9 7.23±3.11 0.091 7±0.042 9 a
柴胡皂苷B 2 24.35±5.75 0.306 6±0.072 5 23.13±5.79 0.287 2±0.078 1 20.61±4.91 0.264 0±0.078 9
[14―15]
肠、回肠中的r均小于0.95，说明其为非线性吸收 。
a
a
a
柴胡皂苷C 20.04±3.32 0.274 7±0.051 5 13.37±4.91 0.179 4±0.076 9 12.21±2.22 0.169 5±0.036 4 a
与同成分在十二指肠中的吸收比较，柴胡皂苷A、C在空 柴胡皂苷D 2.73±0.21 0.033 1±0.003 0 2.65±0.39 0.033 1±0.005 9 2.56±0.38 0.031 6±0.005 7
肠、回肠中循环 120 min 时的 Q、Ka以及柴胡皂苷 F 在回 柴胡皂苷F 17.21±5.94 0.226 8±0.081 9 12.27±2.22 0.166 5±0.037 6 10.80±1.10 0.142 1±0.019 7 a
a
肠中循环120 min时的Q、Ka均显著降低（P＜0.05）。 a：与同成分在十二指肠中的吸收比较，P＜0.05。
· 1684 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 14 中国药房 2023年第34卷第14期