Page 25 - 《中国药房》2023年14期

3 4 和日间精密度试验的RSD均小于15%；低、中、高质量浓
60 000 1 2 5
intensity 40 000 度质控样品准确度试验的RE均在±15%内，LLOQ质控
20 000
0 样品准确度试验的RE均在±20%内，符合2020年版《中
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 [12]
t/min 国药典》（四部）的相关要求 。
A.空白肠液+混合对照品
表3 5种柴胡皂苷类成分的精密度与准确度试验结果
3 5
60 000 精密度试验的RSD 准确度试验的
intensity 40 000 1 4 待测成分 理论质量浓度/（μg/mL） 日内（n＝6）/% 日间（n＝3）/% RE（n＝6）/%
20 000
0 2 柴胡皂苷A 0.31 2.0 4.7 －5.7
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 0.63 2.9 4.7 8.6
t/min
B.空白肠液+柴胡总皂苷提取液 2.50 3.8 6.4 －8.4
7.50 3.9 6.2 4.2
3
10 000 4 柴胡皂苷B 2 1.56 4.1 6.4 －16.6
8 000
intensity 6 000 1 2 3.13 3.6 13.6 0.4
4 000
2 000
0 5 12.50 1.2 4.5 2.9
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 37.50 3.2 3.6 13.0
t/min 柴胡皂苷C 0.63 9.3 5.3 ＜0.1
C. 90 min时柴胡总皂苷提取液的十二指肠吸收样品液
1.25 6.0 1.7 5.1
1：柴胡皂苷C；2：柴胡皂苷F；3：柴胡皂苷A；4：柴胡皂苷B 2；5：柴
5.00 4.2 1.7 －4.5
胡皂苷D。
15.00 5.1 8.8 13.3
图1 不同样品的提取离子流图 柴胡皂苷D 0.50 7.1 3.4 6.6
1.00 4.8 11.5 11.1
2.3.3 标准曲线与线性范围考察
4.00 4.4 9.1 －10.5
精密吸取“2.1.3”项下混合对照品储备液，用空白肠 12.00 1.2 14.6 13.9
液稀释，制得柴胡皂苷 A 质量浓度分别为 0.31、0.63、 柴胡皂苷F 0.78 4.8 5.5 11.4
1.56 10.0 4.3 7.4
1.25、2.50、5.00、10.00 μg/mL，柴胡皂苷B2质量浓度分别
6.25 3.6 4.0 －1.6
为 1.56、3.13、6.25、12.50、25.00、50.00 μg/mL，柴胡皂苷 18.75 4.4 7.3 12.6
C 质量浓度分别为 0.63、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 2.3.5 基质效应试验
μg/mL，柴胡皂苷 D 质量浓度分别为 0.50、1.00、2.00、 取“2.1.4”项下空白肠液，按“2.2”项下方法处理后，
4.00、8.00、16.00 μg/mL，柴胡皂苷 F 质量浓度分别为 加入“2.1.3”项下混合对照品储备液，配制低、高质量浓
0.78、1.56、3.13、6.25、12.50、25.00 μg/mL 的系列对照品 度的质控样品，按“2.3.1”项下条件进样分析，记录峰面
溶液，按“2.3.1”项下条件进样分析，以各待测成分的质 积（A）；另以甲醇为溶剂，配制质量浓度与前者对应的混
量浓度（x）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回 合溶液，按“2.3.1”项下条件进样分析，记录峰面积（B）。
归。结果（表 2）显示，柴胡皂苷 A 等 5 种待测成分在其 按下式计算基质效应：基质效应＝A/B×100%。每个质
对应线性范围内与峰面积呈良好的线性关系[相关系数 量浓度平行6份。结果（表4）显示，柴胡皂苷A等5种待
（r）均大于 0.99]，定量下限（lower limit of quantification， 测成分的平均基质效应均在 90%～120% 内，且 RSD 均
LLOQ）分别为0.31、1.56、0.63、0.50、0.78 μg/mL。 小于 5%，符合 2020 年版《中国药典》（四部）的相关
表2 5种柴胡皂苷类成分的回归方程和线性范围 要求 。
[12]
待测成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL） LLOQ/（μg/mL） 表4 5种柴胡皂苷类成分的基质效应试验结果（n＝6）
柴胡皂苷A y＝69 159x－34 900 0.998 5 0.31～10.00 0.31
y＝23 561x－93 488 0.994 6 1.56～50.00 1.56 待测成分 理论质量浓度/（μg/mL） 基质效应（x±s）/% RSD/%
柴胡皂苷B 2
柴胡皂苷C y＝12 877x－12 280 0.998 9 0.63～20.00 0.63 柴胡皂苷A 0.63 108.27±2.15 2.0
柴胡皂苷D y＝63 386x－69 236 0.996 5 0.50～16.00 0.50 7.50 115.57±3.74 3.2
柴胡皂苷F y＝15 041x－31 676 0.992 6 0.78～25.00 0.78 柴胡皂苷B 2 3.13 93.20±0.71 0.8
37.50 109.46±2.81 2.6
2.3.4 精密度与准确度试验 柴胡皂苷C 1.25 113.97±2.18 1.9
按“2.3.3”项下方法配制 LLOQ 和低、中、高质量浓 15.00 110.32±3.92 3.6
柴胡皂苷D 1.00 95.83±1.43 1.5
度的质控样品[以空白肠液为溶剂，各成分具体质量浓
12.00 109.50±4.99 4.6
度（下同）如表 3 所示]，按“2.3.1”项下条件进样分析，每 柴胡皂苷F 1.56 101.04±0.65 0.6
个质量浓度平行6份，以同日内测定结果的相对标准偏 18.75 109.55±2.16 2.0
差（RSD）考察日内精密度，以连续 3 d 测定结果的 RSD 2.3.6 稳定性试验
考察日间精密度；以实测质量浓度与理论质量浓度的相 按“2.3.3”项下方法配制低、高质量浓度的质控样
对误差（RE）考察准确度。结果（表3）显示，日内精密度 品，分别考察其室温下放置 12 h、处理后 4 ℃下放置 48

中国药房 2023年第34卷第14期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 14 · 1683 ·