Page 20 - 《中国药房》2023年14期

表1 7种化合物的线性关系 表2 指标成对比较的优先判断矩阵
化合物名称 标准曲线 线性范围/（μg/mL） R 2 权重指标 补骨脂素 异补骨脂素 新补骨脂异黄酮 补骨脂异黄酮 补骨脂定 补骨脂乙素 补骨脂酚
补骨脂素 y＝383.38x－10.71 2.935 3～105.67 0.999 9 补骨脂素 1 1 4 4 4 4 4
异补骨脂素 y＝404.03x－2.64 1.737 5～62.55 0.999 9 异补骨脂素 1 1 4 4 4 4 4
新补骨脂异黄酮 y＝249.32x－3.08 2.782 2～100.16 0.999 8 新补骨脂异黄酮 1/4 1/4 1 1 1 1 1/3
补骨脂异黄酮 y＝444.86x+86.76 1.391 1～50.08 0.999 9 补骨脂异黄酮 1/4 1/4 1 1 1 1 1/3
补骨脂定 y＝225.38x－17.18 3.101 9～111.67 0.999 8 补骨脂定 1/4 1/4 1 1 1 1 1/3
补骨脂乙素 y＝111.63x+65.61 1.391 1～50.08 0.999 2 补骨脂乙素 1/4 1/4 1 1 1 1 1/3
补骨脂酚 y＝32.55x－27.30 30.697 0～110 5.10 0.999 9 补骨脂酚 1/4 1/4 3 3 3 3 1
2.1.5 精密度试验 数（C）、浸渍时间（D）和温度（E），每个因素设置高、低两
将供试品溶液连续进样测定6次，结果显示，补骨脂 个水平（表3）。采用Design-Expert 12.0.3软件设计实验
素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂异黄酮、补骨 方案，结果见表4。
脂定、补骨脂乙素、补骨脂酚峰面积的 RSD 均不高于 表3 PB实验设计因素与水平
1.053%（n＝6），表明方法的精密度良好。 水平 A（药材粉碎度）/目 B（固液比）/倍 C（乙醇体积分数）/% D（浸渍时间）/h E（温度）/℃
2.1.6 稳定性试验 －1 20 4 40 24 4
将供试品溶液于室温放置0、2、4、8、12、24 h后进样 1 60 10 95 72 40
分析，结果显示，补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄 表4 PB实验设计与结果
酮、补骨脂异黄酮、补骨脂定、补骨脂乙素、补骨脂酚峰 序号 A（药材粉碎度）/目 B（固液比）/倍 C（乙醇体积分数）/% D（浸渍时间）/h E（温度）/℃ Y
1 60 10 40 72 40 47.09
面积的 RSD 均不高于 1.997%（n＝6），表明供试品溶液
2 20 10 95 24 40 65.01
在室温下放置24 h内稳定性良好。 3 60 4 95 72 4 93.82
2.1.7 重复性试验 4 20 10 40 72 40 34.73
5 20 4 95 24 40 51.58
平行制备供试品溶液 6 份，进样分析，结果显示，补
6 20 4 40 72 4 14.69
骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂异黄酮、 7 60 4 40 24 40 22.69
补骨脂定、补骨脂乙素、补骨脂酚含量均不高于 3.467% 8 60 10 40 24 4 31.14
9 60 10 95 24 4 90.34
（n＝6），表明方法的重复性良好。
10 20 10 95 72 4 64.64
2.1.8 加样回收率试验 11 60 4 95 72 40 87.32
取同一份已知含量的供试品溶液，精密量取6份，分 12 20 4 40 24 4 12.58
别加入与供试品溶液中7种成分含量相等的对照品，进 采用 Design-Expert 12.0.3 软件对数据进行回归分
样分析并计算平均回收率，结果显示，补骨脂素、异补骨 析和显著性检验。由于 B 和 E 对 Y 值无显著影响，为了
脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂定、补骨脂异黄酮、补骨 节约成本，将B和E分别定为7倍和常温。其余因素对Y
脂 乙 素 、补 骨 脂 酚 的 平 均 回 收 率 分 别 为 105.94%、 值影响的显著性顺序依次为C＞A＞D（表5）。
104.62%、98.83%、99.14%、101.04%、102.25%、102.09%， 表5 PB实验设计方差分析结果
RSD 分别为 0.946%、0.568%、1.589%、1.801%、3.087%、 来源 离差平方和 自由度 F P
2.628%、0.805%（n＝6），表明方法的准确度良好。 A 1 390.41 1 23.380 0.002 9
2.2 浸渍法提取补骨脂的工艺优化 B 210.590 1 3.540 0 0.108 9
C 6 998.19 1 117.68 ＜0.000 1
2.2.1 AHP法确定指标权重 D 396.180 1 6.660 0 0.041 7
根据补骨脂饮片中各成分对于治疗白癜风的效用， E 0.122 00 1 0.002 1 0.965 3
将上述7种指标性成分的含量归一化后的值作为权重指 残差 356.810 6
总离差 9 352.29 11
[7]
标予以量化。AHP 评分标准为九级标度法 ，构建优先
注：检验水准α＝0.05。
判断矩阵（表2）。用AHP法计算得到补骨脂素、异补骨
2.2.3 Box-Behnken响应面法优化提取工艺
脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂异黄酮、补骨脂定、补骨
根据PB实验的结果，选择A、C、D为关键自变量，每
脂乙素、补骨脂酚的权重系数分别为 0.302 9、0.302 9、
个因素设置高、中、低3个水平（表6），以Y 为评价指标，
0.062 3、0.062 3、0.062 3、0.062 3、0.144 9，一致性比例因
设计 3 因素 3 水平的 Box-Behnken 响应面实验优化补骨
子小于 0.1。综合评分（Y）是指各成分含量乘以对应的
权重系数后再除以最大值，然后将所有结果相加得到的 脂有效成分的提取工艺，实验设计与结果见表7。
总和。 表6 Box-Behnken响应面实验因素与水平
2.2.2 PB实验筛选显著性因素 水平 A（药材粉碎度）/目 C（乙醇体积分数）/% D（浸渍时间）/h
－1 20 40 24
通过前期预实验可知，影响补骨脂提取工艺的因素 0 40 67.5 48
主要有5种，即药材粉碎度（A）、固液比（B）、乙醇体积分 1 60 95 72

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