Page 99 - 《中国药房》2023年12期
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代；随后，周期蛋白依赖性激酶 4/6（cyclin-dependent ki‐            扫描；气帘气（N2 ）压力为 25 psi，离子源气体 1（N2 ）压力
          nase 4/6，CDK4/6）抑制剂和磷脂酰肌醇3激酶抑制剂也                   为50 psi，离子源气体2（N2 ）压力为50 psi，碰撞气（N2 ）压
                                      [1]
          成了内分泌靶向治疗的药物之一 。                                   力为 8 psi；离子源喷雾电压为 5 000 V；离子源温度为
              哌柏西利胶囊由美国 Pfizer 公司研发，是全球首个                    600 ℃；分辨率 Q1/Q3 设为 unit/unit；质谱采集时间为
          上市的 CDK4/6 抑制剂。2015 年 2 月，该药通过加速审                  2.5 min；用于定量分析的离子对分别为 m/z 448.2→
                                                                                                 [6]
          评途径获得美国FDA的上市批准，与来曲唑联合作为初                          380.2（哌柏西利）、m/z 456.2→388.2（内标） 。
          始内分泌治疗用于 HR 阳性和人表皮生长因子受体 2                         2.2 哌柏西利和内标工作溶液的配制
         （epithelial growth factor receptor 2，HER2）阴性晚期乳腺    2.2.1 标准曲线工作溶液及质控工作溶液 精密称取
          癌。随后，哌柏西利胶囊在日本、欧盟等多个国家和地                           哌柏西利对照品，加入适量体积的 50% 甲醇-0.1% 甲酸
          区获批上市。2018 年 7 月，该药在我国获批上市，并于                      溶液（取水50 mL、甲醇50 mL、甲酸0.1 mL，混合超声而
          2023年1月进入国家医保目录。目前，在我国获批的哌                         得，下同）使其完全溶解，制得质量浓度为1.00 mg/mL的
          柏西利胶囊仿制药生产企业已有3家。本研究以河北某                           对 照 品 储 备 液 ，备 用 ；取 该 储 备 液 适 量 ，用 50% 甲
          生物医药科技有限公司研制的哌柏西利胶囊作为受试                            醇-0.1% 甲酸溶液稀释，得相应质量浓度的标准曲线工
          制剂，以美国Pfizer公司持证的原研药哌柏西利胶囊（商                       作溶液和质控工作溶液。
                                 [2]
          品名 Ibrance）作为参比制剂 ，采用高效液相色谱-串联                     2.2.2 内标工作溶液 精密称取内标对照品，加入适量
          质谱法测定人血浆中哌柏西利的质量浓度，并参考现行                           体积的 50% 甲醇-0.1% 甲酸溶液使其完全溶解，制得质
          生物等效性研究的相关技术指导原则进行人体生物等                            量浓度为 1.00 mg/mL 的内标工作储备液，备用；取该储
          效性评价    [3―5] ，以期为药品注册提供支持，为临床用药提                  备液适量，用50%甲醇-0.1%甲酸溶液稀释，得质量浓度
          供更多选择。                                             为300 ng/mL的内标工作溶液。
          1 材料                                               2.3 哌柏西利校正标样和质控血浆样品的配制
          1.1 主要仪器                                               取空白血浆 95 μL，加入“2.2.1”项下相应质量浓度
              本研究所用主要仪器包括 LC-20AD 型液相色谱仪                     的哌柏西利标准曲线工作溶液或质控工作溶液5 μL，涡
         （日本Shimadzu公司）、API 4500型质谱仪（美国Sciex公                旋混匀，得质量浓度分别为 1.00、2.00、5.00、10.0、50.0、
          司）等。                                               100、180、200 ng/mL 的校正标样和质量浓度分别为
          1.2 主要药品与试剂                                        1.00、3.00、25.0、150 ng/mL的质控血浆样品，备用。
              受试制剂哌柏西利胶囊（批号 2210801，规格 125                   2.4 血浆样品的处理
          mg）由河北某生物医药科技有限公司提供；参比制剂哌                              取血浆样品 100 μL，依次加入 50% 甲醇-0.1% 甲酸
          柏西利胶囊（注册证号 H20180040，批号 CH3704，规格                  溶液20 μL、内标工作溶液（300 ng/mL）20 μL、叔丁基甲
          125 mg）由美国 Pfizer 公司持证，Pfizer Manufacturing        醚 300 μL，室温涡旋 2 min，以 10 000 r/min 离心 3 min；
          Deutschland GmbH 生产；哌柏西利对照品（批号 1827-               精密移取上清液100 μL至另一聚丙烯管中，浓缩至干，
          099A1，纯度 96.4%）、哌柏西利-d8 对照品（内标，批号                  残渣加 50% 甲醇-0.1% 甲酸溶液 200 μL 复溶，涡旋混
          2023-064A3，纯度 95.0%）均购自美国 TLC 公司；甲醇、               匀，转移至进样瓶中，备测。
          乙腈、甲酸等为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯                           2.5 方法学考察
          净水。                                                2.5.1 专属性试验 取空白血浆100 μL按“2.4”项下方
          1.3 空白血浆                                           法处理（不加内标）后所得样品、空白血浆95 μL与哌柏
              空白血浆均来自本试验纳入的健康受试者。                            西利质控工作溶液（200 ng/mL）5 μL 混合并按“2.4”项
          2 方法与结果                                            下方法处理后所得样品、餐后等效性试验某受试者服药
          2.1 色谱与质谱条件                                        1 h后的血浆样品按“2.4”项下方法处理后所得样品各适
              以 CAPCELL PAK ADME（2.1 mm×50 mm，5 μm）          量，按“2.1”项下色谱与质谱条件进样测定，记录色谱图。
          为色谱柱，以 Phenomenex C18 （3.0 mm×4 mm，5 μm）为          结果显示，哌柏西利与内标的保留时间均约为 0.8 min，
          保护柱，以 0.1% 甲酸溶液为流动相 A、甲醇-乙腈-异丙                     内源性物质不干扰其测定（图略）。
          醇（45∶5∶10，V/V/V）-0.1% 甲酸混合溶液为流动相 B 进               2.5.2 线性关系与定量下限考察 按“2.3”项下方法配
          行梯度洗脱（0 min，35%B；0～1.0 min，35%B→90%B；              制哌柏西利质量浓度分别为 1.00、2.00、5.00、10.0、50.0、
          1.0～1.3 min，90%B；1.3～1.4 min，90%B→35%B；1.4～        100、180、200 ng/mL 的校正标样，按“2.4”项下方法处理
          2.5 min，35%B）；流速为 0.5 mL/min；柱温为 40 ℃，自动           后，再按“2.1”项下条件进样测定，记录峰面积。以哌柏
                                        [6]
          进样器温度为15 ℃；进样量为5 μL 。                              西利血药浓度为横坐标（x）、其与内标的峰面积比值为
                                                                                                   2
              采用电喷雾离子源，以多反应监测模式进行正离子                         纵坐标（y），采用最小二乘法（权重系数为1/x）进行线性

          中国药房  2023年第34卷第12期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 12    · 1499 ·
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