Page 77 - 《中国药房》2023年9期

3.6 3m 对 A431、Colo-16 细胞周期分布及凋亡率的 JAK2 128 kDa
影响
与对照组比较，3m低、高浓度组A431、Colo-16细胞 p-JAK2 128 kDa
G2期占比、凋亡率均显著升高（P＜0.01），且呈剂量依赖 STAT3 91 kDa
性。结果见表3。
p-STAT3 91 kDa
表3 2种细胞周期分布和凋亡率的检测结果（x±s，n＝
3，%%） Bcl-2 26 kDa
A431细胞 Colo-16细胞
组别 Bax 23 kDa
G1期占比 S期占比 G2期占比 凋亡率 G1期占比 S期占比 G2期占比 凋亡率
对照组 57.97±0.77 31.7±0.57 9.89±0.53 6.52±1.25 52.53±0.89 34.77±1.10 12.21±0.46 6.71±1.05
3m低浓度组 49.31±1.06 32.56±1.66 17.72±0.79 40.64±1.15 48.12±0.85 33.81±0.65 17.35±0.71 39.34±1.19 a β-actin 42 kDa
a
a
a
3m高浓度组 42.43±1.05 33.87±0.67 23.19±0.91 62.51±2.10 42.14±0.53 33.82±0.75 23.80±0.69 60.77±1.34 ab
ab
ab
ab
对照组 3m低浓度组 3m高浓度组
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与3m低浓度组比较，P＜0.01 A. A431细胞
3.7 3m 对 A431、Colo-16 细胞中 JAK2/STAT3 信号通 JAK2 128 kDa
路相关基因mRNA表达的影响
p-JAK2 128 kDa
与对照组比较，3m低、高浓度组A431、Colo-16细胞
中 JAK2、STAT3、Bcl-2 mRNA 表达水平均显著降低，
STAT3 91 kDa
Bax mRNA表达水平均显著升高（P＜0.01），且呈剂量依
赖性。结果见表4。 p-STAT3 91 kDa
表4 2 种 细 胞 中 JAK2/STAT3 信 号 通 路 相 关 基 因 Bcl-2 26 kDa
mRNA表达水平的检测结果（x±s，n＝3）
Bax 23 kDa
A431细胞 Colo-16细胞
组别 JAK2 STAT3 Bcl-2 Bax JAK2 STAT3 Bcl-2 Bax
β-actin 42 kDa
mRNA mRNA mRNA mRNA mRNA mRNA mRNA mRNA
对照组 0.99±0.02 0.98±0.02 1.01±0.01 0.98±0.02 1.01±0.03 1.01±0.03 1.02±0.01 0.99±0.02 对照组 3m低浓度组 3m高浓度组
a
a
a
a
a
a
a
3m低浓度组 0.66±0.04 0.74±0.03 0.62±0.05 1.95±0.08 0.64±0.02 0.79±0.03 0.58±0.02 1.79±0.05 a B. Colo-16细胞
ab
ab
ab
ab
ab
ab
3m高浓度组 0.35±0.03 0.51±0.04 0.29±0.04 2.62±0.06 0.44±0.04 0.49±0.02 0.35±0.02 2.68±0.06 ab 图7 3m 对 A431、Colo-16 细胞中 JAK2/STAT3 信号通
ab
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与3m低浓度组比较，P＜0.01 路相关蛋白表达影响的电泳图
3.8 3m 对 A431、Colo-16 细胞中 JAK2/STAT3 信号通
表5 2 种细胞中 JAK2/STAT3 信号通路相关蛋白磷酸
路相关蛋白表达的影响
化水平和表达水平的检测结果（x±s，n＝3）
与对照组比较，3m低、高浓度组A431、Colo-16细胞
A431细胞 Colo-16细胞
中 JAK2、STAT3 蛋白磷酸化水平和 Bcl-2 蛋白表达水平 组别 p-JAK2/ p-STAT3/ Bcl-2/ Bax/ p-JAK2/ p-STAT3/ Bcl-2/ Bax/
均显著降低（P＜0.01），Bax 蛋白表达水平均升高（P＜ JAK2 STAT3 β-actin β-actin JAK2 STAT3 β-actin β-actin
对照组 0.99±0.03 1.01±0.05 1.01±0.02 1.02±0.02 0.99±0.02 1.03±0.01 1.02±0.03 1.02±0.02
0.01），且呈剂量依赖性。结果见图7、表5。
3m低浓度组 0.57±0.02 0.58±0.04 0.64±0.08 1.74±0.11 0.68±0.03 0.60±0.02 0.85±0.03 1.38±0.01 a
a
a
a
ab
a
a
a
4 讨论 3m高浓度组 0.39±0.09 0.34±0.04 0.44±0.05 2.36±0.16 0.49±0.02 0.39±0.04 0.51±0.05 1.56±0.05 ab
ab
ab
ab
ab
ab
ab
ab
cSCC 约占所有非黑色素瘤皮肤癌的 20%，是一类 a：与对照组比较，P＜0.01；b：与3m低浓度组比较，P＜0.01
[13]
起源于皮肤表皮或附属角质形成细胞的恶性肿瘤，其常 亡的人数多于恶性程度高的黑色素瘤 。本研究结果
用的手术治疗及放化疗手段，不仅存在不良反应多的缺 显示，3m 可呈剂量依赖性地降低 A431、Colo-16 细胞克
点，还易在治疗后复发和转移。因此，研究治疗cSCC的 隆形成、迁移和侵袭的能力。
[11]
新型药物尤为重要 。二氢色原酮拼接多环吡咯螺环 细胞周期被人为划分为合成间期和分裂期，其中合
氧化吲哚类化合物3m由2种抗肿瘤活性较强的天然产 成间期又分为 DNA 合成前期（G1 期）、DNA 合成期（S
物合成，具有强抗肿瘤活性，可抑制多种肿瘤细胞的增 期）、DNA 合成后期（G2 期），细胞周期受阻则会抑制细
[12]
[14]
殖 。本研究发现，3m 可呈剂量依赖性地抑制 A431、 胞增殖 。凋亡为细胞程序性死亡的一种类型，主要作
Colo-16细胞增殖，且在作用48 h时，其抑制作用强于临 用是保证细胞形成和细胞死亡之间的平衡，因此，检测
床常用但副作用大的 5-FU。同时，3m 可使 A431、Colo- 细胞凋亡也是研究抗肿瘤药物活性的重要手段 [15―16] 。
16细胞排列稀疏、连接松散、细胞质泄漏。 本研究结果显示，3m可呈剂量依赖性地将A431、Colo-16
肿瘤细胞具备浸润生长和远处转移的特点，虽然 细胞阻滞于G2期，并促进其凋亡。
cSCC 转移率低于 5%，但一旦发生此类情况即为晚期 JAK2/STAT3信号通路可参与细胞增殖、分化、凋亡
[1]
cSCC，患者生存率明显降低 。据估计，因cSCC导致死 和免疫调节等多种关键生物学过程，进化过程中高度保
中国药房 2023年第34卷第9期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 9 · 1091 ·