Page 53 - 《中国药房》2023年8期

靛蓝 100 靛蓝 表3 青黛中6个成分的回归方程、线性范围、检测限及
100
相对丰度/％ 50 相对丰度/％ 50 定量限的结果
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25 成分 回归方程 线性范围/（ng/mL） r 检测限/（ng/mL）定量限/（ng/mL）
t/min 100 t/min 靛蓝 Y＝5 261.32X+2 536 057.47 146.70～9 390.00 0.998 6 2.115 6.346
相对丰度/％ 50 靛玉红 相对丰度/％ 50 靛玉红 靛玉红 Y＝8 173.21X+111 339.66 13.97～894.00 0.999 5 1.238 3.715
100
靛红
Y＝5 106.63X+32 021.72
0.999 1
0.468
1.403
7.06～451.50
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25 色胺酮 Y＝405 869.68X+75 701.15 0.45～28.90 0.999 8 0.072 0.217
Y＝23 139.58X+1 189.31
0.079
0.236
0.44～28.10
0.999 9
吲哚
t/min t/min
靛红 100 靛红 吲哚-3-甲醛 Y＝41 272.07X+7 936.38 0.21～13.15 0.999 6 0.033 0.100
相对丰度/％ 50 相对丰度/％ 50 2.3.3 重复性试验 按照“2.2.2”项下方法制备 S2 青黛
100
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25 样品供试品溶液6份，按照“2.1”项下条件进样分析，计算
t/min t/min 各成分的含量。结果显示，靛蓝、靛玉红、靛红、色胺酮、
色胺酮 100 色胺酮
100
相对丰度/％ 50 相对丰度/％ 50 吲哚、吲哚-3-甲醛的平均含量分别为25 475.01、2 512.91、
343.12、3.42、4.19、3.04 μg/g（n＝6），含量的 RSD 分别
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25
t/min t/min 1.92%、2.20%、2.17%、1.68%、3.81%、3.91%（n＝6），表明
吲哚 100 吲哚 方法的重复性良好。
相对丰度/％ 50 相对丰度/％ 50 2.3.4 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于0、4、8、
100
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25 12、24 h时按照“2.1”项下条件进样分析，记录峰面积，计
t/min t/min
吲哚-3-甲醛 100 吲哚-3-甲醛 算 RSD。结果显示，靛蓝、靛玉红、靛红、色胺酮、吲哚、
相对丰度/％ 50 相对丰度/％ 50 吲哚-3-甲醛峰面积的RSD分别为2.03%、1.19%、2.93%、
100
0
0 5 10 15 20 25 0 0 5 10 15 20 25 0.82%、3.41%、3.24%（n＝5），表明供试品溶液在 24 h 内
t/min t/min
A.对照品 B.供试品 稳定性良好。
图1 6个成分对照品（A）和青黛供试品（B）的MRM色 2.3.5 加样回收率试验 取S2青黛样品的粉末6份，每
谱图 份 10 mg，精密称定。分别精密加入 6 个吲哚生物碱对
2.2.2 供试品溶液 取青黛样品约20 mg，精密称定，置 照品储备液适量。按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶
于具塞锥形瓶中，加入 2% 水合氯醛的三氯甲烷溶液 液，按照“2.1”项下条件进样分析，记录峰面积，计算各成
100 mL，称定质量。超声（功率 300 W，频率 25 kHz）提 分的加样回收率及 RSD。结果显示，靛蓝、靛玉红、靛
取 90 min，取出，放冷，用 2% 水合氯醛的三氯甲烷溶液 红、色胺酮、吲哚、吲哚-3-甲醛的平均加样回收率分别为
补足减失的质量，摇匀，取上清液，用 0.22 μm 的微孔滤
96.81%、95.03%、94.48%、90.49%、90.71%、92.30%（n＝
膜过滤，即得供试品溶液。
6），RSD 分 别 为 2.00%、1.20%、3.15%、3.20%、4.02%、
2.3 方法学考察
3.09%（n＝6），表明方法准确度良好。
2.3.1 线性关系、检测限和定量限考察 取“2.2.1”项下
2.4 样品测定
的混合对照品溶液，用 2% 水合氯醛的三氯甲烷溶液逐
称取不同产地的青黛 20 mg，精密称定。按“2.2.2”
级稀释为系列浓度的混合对照品溶液，按“2.1”项下条件
项下方法制备供试品溶液，按“2.1”项下条件进样分析。
分析。以各成分的质量浓度为横坐标（X），定量离子的
计算靛蓝、靛玉红、靛红、色胺酮、吲哚、吲哚-3-甲醛的含
峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线。结果显示，各成分
量。每批样品平行测定3次，取平均值，结果见表4。
的质量浓度与其峰面积有良好的线性关系。用2%水合
2.5 化学计量法评价青黛的质量
氯醛的三氯甲烷溶液稀释混合对照品溶液一定倍数后，
2.5.1 聚类分析 采用SPSS 21.0软件，以6个成分的含
进行测定。以信噪比 3∶1 和 10∶1 时对应的最低质量浓
度分别确定各成分的检测限、定量限，结果见表3。 量为变量进行聚类分析，结果见图2。从图2可知，当平
2.3.2 精密度试验 取“2.2.1”项下的混合对照品溶液， 方欧氏距离为 10 时，12 批青黛药材可以聚为 2 类，S1、
稀释一定倍数以后，按“2.1”项下条件连续进样6次进行 S2、S4、S6、S7、S9、S10号样品聚为Ⅰ类，S3、S5、S8、S11、
分析，记录峰面积，计算RSD。结果显示，靛蓝、靛玉红、 S12号样品聚为Ⅱ类。在Ⅰ类样品中，S1、S2、S9、S10号
靛红、色胺酮、吲哚、吲哚-3-甲醛峰面积的 RSD 分别为 样品产自四川，S4、S6 号样品产自福建，S7 号样品产自
1.87%、1.34%、3.83%、1.08%、3.27%、3.10%（n＝6），表明 贵州；Ⅱ类样品中，S3号样品产自四川，S5、S8、S11、S12
仪器的精密度良好。 号样品产自福建。

中国药房 2023年第34卷第8期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 8 · 943 ·