Page 52 - 《中国药房》2023年8期
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效 。青黛主产于福建、四川、贵州等地。近年来，青黛                                      表1 不同产地青黛样品信息
            [1]
          在溃疡性结肠炎、牛皮癣等疾病的治疗中取得了良好的                            样品编号        植物来源             产地         批号
                                                              S1           马蓝             四川雅安        210707
                   [2―3]
          临床疗效       ，其化学成分也受到了越来越多的关注。
                                                              S2           马蓝             四川江油        201003
          青黛主要含有生物碱、有机酸、萜类、类固醇、核苷等成                           S3           马蓝             四川江油        17080075
            [4]
          分 。其中，吲哚生物碱是青黛中非常重要的一类活性                            S4           马蓝             福建仙游        190517
                                                              S5           马蓝             福建漳州        20220201
          成分，是青黛在抗肿瘤、促进组织修复、抑菌、抑制炎症                           S6           马蓝             福建仙游        20200807
          反应等方面发挥药理作用的物质基础                 [5―6] 。建立与青黛       S7           马蓝             贵州独山        20210801
                                                              S8           马蓝             福建仙游        20210702
          药理作用相关的活性成分的含量测定方法，可以为青黛                            S9           马蓝             四川雅安        220702
          质量控制研究提供支撑。                                         S10          马蓝             四川江油        210901
                                                              S11          马蓝             福建仙游        20210803
              目前，2020年版《中国药典》及相关文献报道均是通
                                                              S12          马蓝             福建仙游        20220701
          过高效液相色谱法测定靛蓝、靛玉红的含量进而对青黛
                                                              2 方法与结果
          进行质量控制       [7―11] 。青黛在药理作用方面表现出多成
                                                              2.1 色谱条件和质谱条件
          分、多靶点的特点，仅采用靛蓝、靛玉红作为质量控制的
                                                              2.1.1 色谱条件 采用 Venusil MP C18 （100 mm×2.1
          指标难以全面反映青黛的质量。建立青黛中多种生物
                                                              mm，3 μm）为色谱柱；采用乙腈（A）和 0.1% 甲酸溶液
          碱的含量测定方法，可以较为全面地对青黛药材的质量
                                                             （B）为流动相进行梯度洗脱（0～3.0 min，10%A；3.0～
          进行控制。超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱
                                                              18.0 min，10%A→50%A；18.0～21.0 min，50%A→85%A；
         （UPLC-MS/MS）法具有快速、高效和灵敏度高等优
                                                              21.0～22.0 min，85%A；22.0～22.1 min，85%A→10%A；
            [12]
          点 ，能有效用于青黛中多种生物碱的同时测定。本文
                                                              22.1～25.0 min，10%A）；流速为 0.30 mL/min；柱温为
          建立了 UPLC-MS/MS 法同时测定青黛中 6 种吲哚生物
                                                              40 ℃；进样量为5 μL。
          碱，并结合聚类分析、主成分分析、偏最小二乘法-判别
                                                              2.1.2 质谱条件 采用电喷雾离子源正离子模式进行
          分析等化学计量学方法对不同产地的青黛进行质量评
                                                              扫描；检测方式为多重反应监测；气帘气为 30 L/min；
          价，为提高其质量控制水平提供参考。
                                                              GS1 雾化气为 50 L/min，GS2 辅助加热气为 50 L/min；
          1 材料
                                                              CAD碰撞气为Medium；辅助加热气温度为500 ℃；喷雾
          1.1 主要仪器
                                                              电压为 5 500 V。6 个成分的质谱条件见表 2，对照品及
              本研究所用主要仪器有 XA205DU 型十万分之一
                                                              样品的多反应监测（multi-reaction monitoring，MRM）色
          天平[瑞士梅特勒-托利多国际贸易（上海）有限公司]、
                                                              谱图见图1。
          Nexera X2 型超高效液相色谱仪（日本 Shimadzu 公司）、
                                                                       表2 青黛中6个成分的质谱参数
          Triple Quad 4500 型三重四极杆串联质谱仪（美国 AB
                                                              成分       t R/min  母离子m/z  子离子m/z  解簇电压/V  碰撞能量/V
          SCIEX公司）、AS10200AT型超声波清洗器（天津奥特赛                     靛蓝       15.98    262.9   219.0    91      33
          恩斯仪器有限公司）、AXLM型超纯水机（重庆阿修罗科                          靛玉红      17.39    262.9   190.1    91      48
                                                              靛红        4.81    148.0   102.1    80      24
          技发展有限公司）等。
                                                              色胺酮      14.07    248.9   130.2    80      38
          1.2 主要药品与试剂                                         吲哚        7.55    117.9    91.2    103     28
              靛红对照品（批号 DSTDD018202，纯度≥98%）、色                  吲哚-3-甲醛   7.55    145.9   118.1    80      18
          胺酮对照品（批号DST200611-256，纯度≥98%）、靛蓝对                   2.2 溶液的制备
          照品（批号DSTDD008801，纯度≥98%）均购自成都德思                     2.2.1 混合对照品溶液 取靛蓝、靛玉红、靛红、色胺
          特生物技术有限公司；靛玉红对照品（批号 110717-                         酮、吲哚、吲哚-3-甲醛对照品适量，精密称定，加入2%水
          201805，纯度≥99%）购自中国食品药品检定研究院；吲                       合氯醛的三氯甲烷溶液（取硅胶干燥器中放置24 h的水
          哚对照品（批号 H2127379，纯度≥99%）、吲哚-3-甲醛对                   合氯醛，称取2.0 g，加三氯甲烷至100 mL，放置，出现浑
                                                                                            [7]
          照品（批号G2021117，纯度≥98%）均购自上海阿拉丁生                      浊，以无水硫酸钠脱水，滤过，即得 ），分别制备上述成
          化科技股份有限公司。乙腈（色谱纯）购自上海安谱实                            分质量浓度为 62.6、59.6、60.2、57.8、28.1、26.3 μg/mL 的
          验科技股份有限公司，甲酸（色谱纯）购自赛默飞世尔科                           对照品储备液。分别精密量取各对照品储备液适量，用
          技有限公司。收集5个产地共12批青黛药材，经重庆市                           2%水合氯醛的三氯甲烷溶液配制质量浓度为9 390.00、
          中医院药剂科副主任中药师陈玲鉴定为青黛，药材信息                            894.00、451.50、28.90、28.10、13.15 ng/mL 的混合对照品
          见表1。                                                溶液。


          · 942 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 8                               中国药房  2023年第34卷第8期
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