Page 28 - 《中国药房》2023年8期

substances in blank plasma did not interfere with the determination of the components to be tested， and the standard curve had a
good linear relationship； the lower limits of quantification for ATV， 2-HAT， 4-HAT and ATL were 0.5， 0.5， 0.25 and 0.063 nmol/L，
respectively. The precision， accuracy， recovery， matrix effect and stability investigation were all in line with the requirements of
biological analysis. Pharmacokinetic analysis showed that after intragastric administration in rats， ATV calcium metabolized rapidly，
and was mainly exposed to blood circulation in the form of ATV and 2-HAT， with the lowest concentration of lactone-type
metabolites. CONCLUSIONS The established method is precise， rapid and accurate for plasma concentration analysis of ATV and
its active/toxic metabolites. The application of the method could help to fully elucidate the pharmacokinetic characteristics of
atorvastatin calcium in rats.
KEYWORDS atorvastatin calcium； LC-MS/MS； hydroxy atorvastatin； atorvastatin lactone； pharmacokinetics

[10]
阿托伐他汀（atorvastatin，ATV）是 3-羟基-3-甲基戊 产物进行了定量分析 [8―9] ，Ni等 报道了包含毒性代谢产
二酰辅酶 A（DL-3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A 物ATL的大鼠血药浓度，但是分析方法中未采用防止酸
disodium，HMG-CoA）的还原酶抑制剂，属于第3代他汀 型和内酯型间的构型转换措施。因此，本研究旨在建立
类药物。ATV能够显著降低胆固醇、低密度脂蛋白及三 一种准确、快速、灵敏的液相色谱-串联质谱（LC-MS/
酰甘油水平，具有降脂作用强、药效维持时间长的优点， MS）检测方法，同时测定大鼠血浆中的ATV及其活性代

同时能够显著降低冠心病和其他心脑血管疾病的发生 谢产物2-HAT、4-HAT和毒性代谢产物ATL，并应用于药
率及病死率，被广泛用于心血管疾病的预防和治疗，是 代动力学分析。
[1]
目前使用最多、销量最大的他汀类药物 。但随着 ATV 1 材料
的使用占比增加，由其引发的不良反应也逐渐增加，主 1.1 主要仪器
要表现为转氨酶升高、药物性肝炎、肌痛、关节痛及横纹 本研究所用主要仪器有API 4000 QTRAP型质谱系
[1]
肌溶解等 。 统（美国 Applied Biosystem 公司）、Agilent 1200 型高效
ATV以其活性酸的钙盐口服给药，绝对生物利用度 液相色谱仪（美国Agilent公司）、DW-FL362型超低温冰
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约为14% 。生物利用度较低的原因在于进入体循环前 箱（合肥长虹美菱股份有限公司）、MS205DU 型电子天
肠道和肝脏的首过效应 。阿托伐他汀钙口服给药后， 平（瑞士Mettler Toledo公司）等。
[2]
主要经由肝脏的细胞色素 CYP3A4 酶代谢为活性成分 1.2 主要药品与试剂
2-羟基阿托伐他汀酸（2-hydroxy atorvastatin acid，2-HAT） ATV 对照品（批号 s.2077）购自美国 Selleck Chemi‐

和 4-羟基阿托伐他汀酸（4-hydroxy atorvastatin acid， cals 公司；ATL对照品（批号5-JGC-56-5）、2-HAT对照品
4-HAT），在尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶的参与下转化 （批号 7-VHP-82）、4-HAT 对照品（批号 1-TKA-22-2）均
为相应的非活性内酯衍生物，主要为阿托伐他汀内酯 购自加拿大 Toronto Research Chemicals 公司；匹伐他汀
（atorvastatin lactone，ATL） 。活性成分与非活性内酯衍 （pitavastatin，PIV）对照品（批号 H29A7B20167，内标）购
[3]
生物在体内可互相转换并保持平衡 [4―5] 。体外实验中， 自上海源叶生物科技有限公司，上述对照品纯度均不低
2-HAT和4-HAT对HMG-CoA还原酶的抑制作用与ATV 于98%。阿托伐他汀钙片（批号EP8450，规格20 mg/片）
相当，对HMG-CoA还原酶的循环抑制活性约70%是由 购自辉瑞制药有限公司，质谱分析所用甲酸、甲醇和乙
活性成分代谢产物产生的 [6―7] 。与 ATV 比较，临床及近 腈均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
来的机制研究发现，ATL是ATV服用后发生肌肉毒性的 1.3 实验动物
主要因素 [6―7] 。因此，全面解析口服 ATV 后体内活性代 SPF 级雄性 SD 大鼠，体质量（200±10）g，购自北京
谢产物和潜在毒性代谢产物 ATL 的暴露水平对于保障 维通利华生物技术有限公司，生产许可证号为 SCXK
其疗效和安全性具有重要意义，特别是在与ATV的药物 （京）2019-0010，使用许可证号为SYXK（京）2019-0010。

相互作用研究中，可更准确地预测合并用药隐患。 所有大鼠均饲养于中国中医科学院西苑医院动物室，温
尽管 ATV 已在临床广泛使用，考虑到临床研究成 度（22±3）℃，相对湿度40%～70%，12 h明暗交替环境，
本，在临床前开展基于动物的药物相互作用评价仍是早 自由进食、饮水，适应性饲养1周。动物实验经过中国中
期筛选及获得预警信息的重要手段。大部分关于 ATV 医科学院西苑医院动物伦理委员会批准，伦理批件号为
的药代动力学研究只针对大鼠血浆中原型及活性代谢 2022XLC030-2。

· 918 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 8 中国药房 2023年第34卷第8期