Page 75 - 《中国药房》2023年6期

毒性和神经毒性发生率较高，因此随着氨基糖苷类药物 0.1% 甲酸）为流动相 B 进行梯度洗脱（0.01～1.0 min，
（庆大霉素）以及第二、三代头孢菌素的问世，该药逐渐 10%B；1.0～2.0 min，10%B→70%B；2.0～3.0 min，
被替代 。近年来，多重耐药革兰氏阴性菌感染的防治 70%B→90%B；3.0～3.1 min，90%B→10%B；3.1～5.0
[4]
已成为全球性的临床难题 [5―6] ，而几乎对所有耐碳青霉 min，10%B）；流速为0.5 mL/min；柱温为40 ℃；自动进样
烯类革兰氏阴性菌均具有良好抑制活性的多黏菌素类 器温度为4 ℃；进样量为10 μL。
药物重新受到临床的重视，并成为了多重耐药革兰氏阴 2.1.2 质 谱 条 件 采 用 电 喷 雾 离 子 源（electrospray
[7]
性菌感染治疗的最后一道防线 。 ionization，ESI）以多反应监测（multi-reaction monitoring，
临床实践显示，多黏菌素治疗窗窄，其常见不良反 MRM）模式进行正离子扫描；离子源电压为 5 500 V；离
应包括肾毒性和神经毒性，以肾毒性最为常见，主要表 子源温度为 550 ℃；用于定量分析的离子对分别为 m/z
[8]
现为急性肾损伤（acute renal injury，AKI） 。相关指南 603.2→101.2（多黏菌素 B1）、m/z 595.7→101.1（多黏菌
建议当多黏菌素类药物对病原菌的最小抑菌浓度（mini‐ 素 B2）、m/z 578.5→101.1（内标）；多黏菌素 B1、B2 和内
mum inhibitory concentration，MIC）≤2 mg/L 时，多黏菌 标的去簇电压分别为 116.0、120.0、106.2 V，碰撞能量分
素B的稳态血药浓度应维持在2～4 mg/L [2，9] 。体外抗菌 别为 36.3、36.0、34.1 eV。多黏菌素 B1、B2 和内标的质
[2]
实验发现，多黏菌素易诱导耐药 ，而达到有效的血药浓 谱图见图1。
度是预防耐药菌产生的有效措施；同时，接受多黏菌素 3.2×10 6
3.0×10 6
治疗的患者多为重症患者，早期达到有效治疗浓度是其 2.8×10 6
2.6×10 6
治疗成功的关键，因此在治疗过程中进行治疗药物监测 2.4×10 6
2.2×10 6
[10]
（therapeutic drug monitoring，TDM）显得尤为必要 。超 2.0×10 6 6
1.8×10
高 效 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱（ultra performance liquid intensity/cps 1.6×10 6 6
1.4×10
chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MS/ 1.2×10 6 6
1.0×10
8.0×10 5
MS）技术以特定的离子对作为信号记录对象，具有专属 6.0×10 5
4.0×10 5
[11]
性强、灵敏度高的特点，是临床TDM的“金标准” 。本 2.0×10 5
0
研究拟采用 UPLC-MC/MC 法测定人血浆中多黏菌素 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600
m/z
B1 和 B2 的血药浓度，同时采用该法检测接受多黏菌素
A.多黏菌素B1
B治疗的重症患者的稳态峰、谷浓度，以分析用药剂量和
7.5×10 5
血药浓度的分布情况，并初步评价血药浓度与AKI发生 7.0×10 5
6.5×10 5
的相关性，旨在为临床安全用药提供参考。 6.0×10 5
5.5×10 5
1 材料 5.0×10 5 5
4.5×10
1.1 主要仪器 intensity/cps 4.0×10 5 5
3.5×10
本研究所用主要仪器包括LC-30 AD型超高效液相 3.0×10 5
2.5×10 5
色谱仪（日本 Shimadzu 公司）、AB SCIEX Qtrap 5500 型 2.0×10 5
1.5×10 5
三重四极杆串联质谱仪（美国 AB Sciex 公司）、Biofuge 1.0×10 5
5.0×10 4
primo R 型低温离心机（美国 Thermo Fisher Scientific 公 0 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600
司）、Milli-Q plus 型超纯水仪（美国 Millipore 公司）、 m/z
B.多黏菌素B2
GENIUS型漩涡混匀器（德国IKA公司）、BP211DD型电
子天平（德国Sartorius公司）等。 6.5×10 5
6.0×10 5
1.2 主要药品与试剂 5.5×10 5
5.0×10 5
多 黏 菌 素 B1 对 照 品（批 号 P037-01BL，纯 度 4.5×10 5
93.431%）、多 黏 菌 素 B2 对 照 品（批 号 P039-01，纯 度 4.0×10 5 5
3.5×10
92.757%）、多黏菌素E2对照品（内标，批号P056E2，纯度 intensity/cps 3.0×10 5 5
2.5×10
92.294%）均购自美国 TOKU-E 公司；乙腈、甲酸均为色 2.0×10 5
1.5×10 5
谱纯，三氯乙酸为分析纯，水为超纯水。 1.0×10 5
5.0×10 4
1.3 空白血浆 0
健康人空白血浆由陆军军医大学第一附属医院输 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600
m/z
血科提供。 C.内标
2 方法与结果 图1 多黏菌素B1、B2和内标的质谱图
2.1 色谱与质谱条件 2.2 溶液的制备
2.1.1 色 谱 条 件 以 BEH C18 （2.1 mm×50 mm，1.7 2.2.1 对照品溶液 精密称取多黏菌素B1、B2对照品，
μm）为色谱柱，以水（含0.1%甲酸）为流动相A、乙腈（含 分别用0.2%甲酸溶液溶解并定容，制得多黏菌素B1、B2
中国药房 2023年第34卷第6期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 6 · 705 ·