Page 54 - 《中国药房》2023年3期
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Additionally， G. rigescens and G. cephalantha contained xantones， G. delavayi contained flavonoids. PCA showed that there was a
          small  difference  between  G.  rigescens  and  G.  cephalantha；  however，  there  was  a  big  difference  between  G.  delavayi  and  G.
          rigescens.  CONCLUSIONS  The  difference  between  the  roots  and  rhizomes  of  G.  cephalantha  and  G.  rigescens  from  the  same
          origin  is  small  and  there  is  substitutability；  while  the  difference  in  the  chemical  components  from  roots  and  rhizomes  between  G.
          delavayi and G. rigescens is great and G. delavayi cannot be used as medicine instead of G. rigescens.
          KEYWORDS     Gentiana  rigescens；  Gentiana  cephalantha；  Gentiana  delavayi；  iridoids；  chemical  components；  content
          determination； identification



              龙胆属植物在全世界约有360种，我国有248种，在                       1 材料
                                                    [1]
          全国各地均有分布，且主要集中分布于西南山区 。在                            1.1 主要仪器
          云南分布的龙胆属植物有 119 种及 6 个变种，其中坚龙                           本研究所用的主要仪器包括 Agilent 1200 型 HPLC
          胆Gentiana rigescens Franch.被历版《中国药典》所收载，            仪（美国Agilent公司），Dionex UltiMate 3000型UPLC仪
          是龙胆药材的基原植物。坚龙胆于 1987 年就被列入国                        （美国 Dionex 公司），Compact 型质谱系统（德国 Bruker
          家重点保护野生药材物种，并且由于近年来生态环境被                            Daltonics公司），AE240型电子天平（瑞士Mettler Toledo
          破坏（紫茎泽兰等外来物种入侵）和过度采挖（药厂需求                           公司），SK5200H型超声波清洗仪（上海科导超声仪器有
                                                 [2]
          激增），坚龙胆野生资源急剧减少，濒临灭绝 。因此，                           限公司）。
          寻找坚龙胆可替代资源具有重要意义。笔者前期通过
                                                              1.2 主要药品与试剂
          调研及探访民间草药医生发现，白族民间将坚龙胆 G.
                                                                  坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆样品均由本课题组于
          rigescens Franch.、头花龙胆 G. cephalantha Franch. 和微
                                                              2020年10月采自云南大理，采集地经度为N25°67. 55′、
          籽龙胆 G. delavayi Franch. 这 3 种主要分布在云南大理
                                                              纬度为E99°3. 183′，每个品种随机采集生长年限大致相
          的龙胆属植物统称为龙胆草，俗称蓝花根、炮仗花、苦草
                                                              同且无病虫害的开花期植株30株，采集植株之间的株距
          及青鱼胆等，以其根及根茎或全草入药。
                                                              不小于 10 m。采集的植株样品经大理大学药学院李海
              据报道，环烯醚萜类、黄酮类化合物是龙胆药材的
                                                              峰教授鉴定为龙胆属植物坚龙胆 G. rigescens Franch.、
          主要活性成分       [3―5] ，其中的环烯醚萜类成分具有保肝利
                                                              头花龙胆 G.cephalantha Franch.、微籽龙胆 G.delavayi
                                          [7]
                      [6]
          胆（龙胆苦苷） 、健脾胃（獐牙菜苦苷） 、抗炎杀菌（獐牙
                                                              Franch.。将采集的植株样品根及根茎在40 ℃恒温箱中
                                          [9]
               [8]
          菜苷） 、调节脂质代谢（苦龙胆酯苷） 等功效。本课题
                                                              干燥至恒质量。龙胆苦苷对照品（批号ZJ0701BA13，纯
          组前期采用高效液相色谱（HPLC）法对不同产地头花龙
                                                              度≥98%）、獐芽菜苦苷对照品（批号 M29J4S1，纯度≥
          胆根及根茎中4种环烯醚萜类有效成分（龙胆苦苷、獐牙
                                                              98%）、獐 芽 菜 苷 对 照 品（批 号 PN1125SA13，纯 度 ≥
          菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷）的含量进行了测定，发
                                                              98%）、苦龙胆酯苷对照品（批号 Z06J6S2，纯度≥98%）
          现不同产地头花龙胆中4种环烯醚萜类成分的含量存在
                                                              均购自上海源叶生物科技有限公司；甲醇为色谱纯，其
          差异  [10―11] 。但考虑到药用植物的化学成分组成不仅受
                                                              余试剂均为分析纯，水为超纯水。
          遗传因子的影响，还受气候、土壤等生态环境因子的影
                                                              2 方法与结果
          响，因此，本课题组以坚龙胆为对照，采用HPLC法对同
          一产地3种龙胆属植物（坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆）根                          2.1 溶液的制备
          及根茎中上述4种环烯醚萜类成分进行定量分析，同时                            2.1.1 供试品溶液 随机选取每个品种的根及根茎质
          借助超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间高分辨质                           量相近的植株10株，混合、粉碎后作为样品。分别精密
          谱联用（UPLC-ESI-Q-TOF-MS）技术对上述植物根及根                    称取粉末0.2 g于10 mL容量瓶中，加入4 mL甲醇，超声
          茎中的化学成分进行定性分析，并对质荷比（m/z）在                          （53 kHz、40 ℃）处理 20 min，滤纸过滤，滤渣用 4 mL 甲
          50～2 000 之间的化学成分进行主成分分析（principal                   醇按上述步骤重复处理1次；合并2次提取滤液至10 mL

          component analysis，PCA），为从龙胆属植物中挖掘坚龙                容量瓶中，冷却至室温，加甲醇定容，混匀。使用前用
          胆可替代资源提供依据。                                         0.22 μm有机相微孔滤膜过滤，收集滤液，即得。


          · 304 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 3                               中国药房  2023年第34卷第3期
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