Page 51 - 《中国药房》2023年3期

表1 主成分综合得分及排名 2.6.3 供试品溶液的制备 制备方法同“2.3”项。
批次 Y 1 Y 2 Y 3 Y 排名 2.6.4 专属性试验 取“2.6.2”“2.6.3”项下对照品溶液
S12 4.603 1.584 3.143 3.635 1 及供试品溶液，按照“2.6.1”项下色谱条件进样测定，记
S11 4.908 1.312 －1.303 3.279 2
S9 2.177 －0.899 －0.754 1.037 3 录色谱图（图略）。结果显示，各成分色谱峰分离良好，
S2 0.012 1.251 －0.904 0.248 4 提示该方法专属性良好。
S6 －0.215 1.197 －0.842 0.098 5 2.6.5 线性关系考察 取“2.6.2”项下对照品溶液，逐级
S8 1.318 －2.823 －0.745 －0.016 6
S5 －0.656 0.394 －0.762 －0.385 7 稀释 0、2、4、8、16、32 倍，按照“2.6.1”项下色谱条件进行
S10 0.915 －4.500 0.694 －0.566 8 测定。以各差异性成分的质量浓度为横坐标（X）、峰面
S7 －2.155 2.150 0.491 －0.715 9 积为纵坐标（Y）绘制标准曲线。另外，以信噪比 3∶1、
S4 －2.112 1.053 －0.562 －1.095 10
S3 －4.236 0.381 0.515 －2.488 11 10∶1计算检测限和定量限。结果见表2。
S1 －4.558 －1.101 1.029 －3.033 12 表2 4种差异性成分的线性关系和灵敏度考察结果
2.5.3 正交偏最小二乘法-判别分析 本研究采用 化合物 标准曲线 R 2 线性范围/ 定量限/ 检测限/
SIMCA 14.1软件，以17个共有峰峰面积为数据阵，对12 （mg/mL） （mg/mL） （mg/mL）
苦参碱 Y＝3 332.071 3X+634 207.268 7 0.996 9 0.113 0～3.600 3.61×10 －4 1.58×10 －4
批苦参药材进行正交偏最小二乘法-判别分析。结果显 降苦参酮 Y＝22 149.189 6X－2 395 790.468 0 0.998 4 0.084 0～2.700 8.10×10 －4 1.25×10 －4
2
2
示，模型X矩阵的解释参数（R X）、稳定性参数（R Y）及预 苦参酮 Y＝12 071.462 1X－1 186 496.109 0 0.995 3 0.056 0～1.800 9.01×10 －4 1.42×10 －4
2
测能力参数（Q）分别为 0.854、0.883、0.718，均大于 0.7， 氧化槐果碱 Y＝5 382.841 3X－624 718.333 3 0.996 2 0.075 0～2.400 7.20×10 －4 1.23×10 －4
表明建立的模型拟合较好，具有较高的稳定性和预测 2.6.6 精密度试验 取“2.6.3”项下供试品溶液（S1），按
[13]
性，可用于分析不同产地苦参药材间的质量差异 。正 “2.6.1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录各差异性成分
交偏最小二乘法-判别分析得分图（图5）显示，12批苦参 的峰面积。结果显示，苦参碱、降苦参酮、苦参酮、氧化
药材可分为3类，与聚类分析、主成分分析结果一致。 槐 果 碱 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 2.06%、2.98%、0.97%、
1.29%（n＝6），表明仪器精密度良好。
2.6.7 稳定性试验 取“2.6.3”项下供试品溶液（S1），于
4
陕西商州区 室温放置 0、4、8、12、16、20、24 h 时，按“2.6.1”项下色谱
2 河南伊川县
内蒙古赤峰市 条件进样分析，记录各差异性成分的峰面积。结果显
t[2] 0
示，苦参碱、降苦参酮、苦参酮、氧化槐果碱峰面积的
－2
RSD分别为2.62%、1.41%、2.77%、0.79%（n＝7），表明各
－4
差异性成分在室温放置24 h内稳定性较好。
－6 2.6.8 重复性试验 精密称取苦参药材（S1）粉末 6 份，
－10 －6 －2 0 2 4 6 8
t[1] 按“2.6.3”项下方法平行制备供试品溶液 6 份，再按
图5 12 批苦参药材的正交偏最小二乘法-判别分析得 “2.6.1”项下色谱条件进样分析，记录各差异性成分的峰
分图 面积，并根据标准曲线计算含量。结果显示，苦参碱、降

变量重要性投影（variable importance in the projec‐ 苦参酮、苦参酮、氧化槐果碱含量的RSD分别为3.06%、
tion，VIP）值能够表示变量对模型的整体贡献程度，以 2.82%、1.45%、2.67%（n＝6），表明该方法重复性良好。
[14]
VIP 值大于 1 筛选影响苦参药材质量的差异性成分 。 2.6.9 加样回收率试验 精密称取苦参药材（S1）粉末
结果显示，影响苦参药材质量的差异性成分依次为峰10 0.25 g，平行称取6份，分别加入含有氧化槐果碱1.4 mg、
（苦参碱，VIP＝2.024）、峰 17（降苦参酮，VIP＝1.695）、 苦参碱 0.7 mg、苦参酮 3.1 mg、降苦参酮 0.6 mg 的对照
峰 16（苦参酮，VIP＝1.681）、峰 2（氧化槐果碱，VIP＝ 品溶液20 mL，按“2.6.3”项下方法制备供试品溶液，再按
1.157）、峰 11（VIP＝1.112）、峰9（VIP＝1.074）。 “2.6.1”项下色谱条件进样分析，记录各差异性成分的峰
2.6 苦参药材4种差异性成分的含量测定 面积，并计算平均加样回收率。结果显示，苦参碱、降苦
根据上述结果，选择 VIP 值排名前 4 位的差异性成 参酮、苦参酮、氧化槐果碱的平均加样回收率分别为
分——苦参碱、降苦参酮、苦参酮和氧化槐果碱进行含 101.4%、98.5%、99.4%、102.0%，RSD 分 别 为 1.75%、
量测定。 1.70%、1.85%、2.69%（n＝6），表明该方法准确度良好。
2.6.1 色谱条件 色谱条件同“2.1”项。 2.6.10 含量测定 取 12 批不同产地的苦参药材粉末
2.6.2 对照品溶液的制备 取苦参碱、降苦参酮、苦参 0.5 g，精密称定，按照“2.6.3”项下方法制备供试品溶液，
酮、氧化槐果碱对照品各适量，分别置于 1 mL 容量瓶 再按“2.6.1”项下条件进样分析，记录各差异性成分的峰
中，加甲醇溶解并定容，制得上述成分质量浓度分别为 面积，并根据标准曲线计算苦参碱、降苦参酮、苦参酮、氧化
3.6、2.7、1.8、2.4 mg/mL的对照品溶液。 槐果碱的含量。平行测定3次，取平均值。结果见表3。

中国药房 2023年第34卷第3期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 3 · 301 ·