Page 97 - 《中国药房》2022年24期

2.2×10 5 DLM 2.5.5 稳定性试验 按照“2.3”项下方法制备低、中、高
2.0×10 5
1.8×10 5 质量浓度（0.1、1、6 μg/mL）的质控血浆样品，分别于室
1.6×10 5 温下放置 2 h、4 ℃放置 6 h、－20 ℃下放置 7 d、－80 ℃
1.4×10 5
intensity 1.2×10 5 5 放置 15 d、反复冻融（－80 ℃～室温）2 或 3 次后，按照
1.0×10
0.8×10 5 “2.4”项下方法处理后，再按照“2.1”“2.2”项下色谱与质
0.6×10 5
0.4×10 5 谱条件进样分析，考察各样品在上述条件下的稳定性
0.2×10 5
0 （各质量浓度样品平行操作5份，结果以实测质量浓度的
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8
t/min RSD表示）。结果显示，除反复冻融3次外，各样品在其
A.空白血浆+DLM对照品
余条件下放置的稳定性均较好（RSD 均小于 10%），详
2.6×10 4 DLM
2.4×10 4 见表3。
2.2×10 4
2.0×10 4 表3 血浆样品的稳定性试验结果（n＝5，%）
1.8×10 4
1.6×10 4 理论质量浓度/ 室温放 4 ℃放置 －20 ℃放置 －80 ℃放置 反复冻融 反复冻融
1.4×10 4 （μg/mL） 置2 h 6 h 7 d 15 d 2次 3次
intensity 1.2×10 4 4 0.1 9.5 7.6 5.5 8.3 8.7 17.3
1.0×10
0.8×10 4 1 8.4 8.1 5.1 7.4 9.1 16.2
0.6×10 4
0.4×10 4 6 7.0 5.4 6.8 6.3 8.8 15.7
0.2×10 4
0 同时，按照“2.3”项下方法配制质量浓度为1 mg/mL
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8
t/min 的DLM储备液和质量浓度分别为10、80 μg/mL的DLM
B.服用DLM患者的血浆样品
图1 DLM专属性考察的色谱图 标准溶液，考察上述溶液于室温下放置6 h、4 ℃放置15
d的稳定性（各质量浓度样品平行操作5份，结果以实测
表1 精密度与准确度试验结果
质量浓度的 RSD 表示）。结果显示，各样品在上述条件
理论质量浓度/（μg/mL） 日内精密度RSD（n＝5）/% 日间精密度RSD（n＝3）/% 准确度（n＝5）/%
0.05 6.1 7.5 92.7 下放置的稳定性均较好（RSD均小于10%），详见表4。
0.1 1.0 4.2 95.2 表4 储备液和标准溶液的稳定性试验结果（n＝5，%）
1 1.8 4.7 104.9
理论质量浓度 室温放置6 h 4 ℃放置15 d
6 2.2 6.9 97.3
1 mg/mL 3.5 5.4
2.5.4 基质效应与萃取回收率试验 分别用3种方法制 10 μg/mL 5.7 6.9
80 μg/mL 4.2 5.0
备低、中、高质量浓度（0.1、1、6 μg/mL）的待测样品——
2.5.6 残留效应 取“2.3”项下质量浓度为 8 μg/mL 的
第1组：取DLM对照品适量，用50%甲醇稀释，制成低、
标准曲线血浆样品，按照“2.4”项下方法处理后，再按照
中、高质量浓度的 DLM 溶液，按照“2.1”“2.2”项下色谱
“2.1”“2.2”项下色谱与质谱条件进样分析，随后同法测
与质谱条件进样分析，得峰面积A；第2组：取空白血浆，
定空白血浆样品以考察残留效应。结果显示，在 DLM
加9倍体积的甲醇以沉淀蛋白，离心后取上清液（具体操
相同的保留时间处，空白血浆样品对应色谱峰峰面积与
作同“2.4”项），以此上清液作为基质，制备低、中、高质量
定量下限质量浓度血浆样品色谱峰峰面积的比值小于
浓度的DLM样品溶液，按照“2.1”“2.2”项下色谱与质谱
5%，表明残留效应对DLM的定量分析无明显影响。
条件进样分析，得峰面积 B；第 3 组：取 DLM 对照品适
2.5.7 稀释可靠性 取“2.3”项下质量浓度为 8 μg/mL
量，用空白血浆稀释，制成低、中、高质量浓度的DLM血 的标准曲线血浆样品，用空白血浆稀释 10 倍后，按照
浆样品，按照“2.4”项下方法处理后，再按照“2.1”“2.2”项 “2.4”项下方法处理后，再按照“2.1”“2.2”项下色谱与质
下色谱与质谱条件进样分析，得峰面积C。按下式分别 谱条件进样分析以考察稀释可靠性（样品平行操作 5
计算基质效应和萃取回收率：基质效应＝B/A×100%， 份）。结果显示，稀释后样品的精密度RSD小于10%，准
萃取回收率＝C/B×100%。各质量浓度样品平行操作5 确度为 98.9%，表明血浆样品用空白血浆稀释 10 倍对

份。结果显示，各样品的平均基质效应为 94.3%～ DLM的定量分析无明显影响。
107.5%，平均萃取回收率为93.2%～98.1%，详见表2。 2.6 方法应用
表2 基质效应与萃取回收率试验结果（x±s，n＝5） 2.6.1 患者的纳入与排除标准 纳入标准包括：（1）年
理论质量浓度/（μg/mL） 基质效应/% 萃取回收率/% 龄18～65岁；（2）临床确诊为MDR-TB患者；（3）规律服
0.1 107.5±3.0 98.1±2.8
1 98.6±1.0 93.2±1.6 用DLM片1周以上，中途未中断或未更改剂量；（4）同意
6 94.3±2.7 96.7±1.4 参加试验并已签署知情同意书。排除标准包括：（1）不

中国药房 2022年第33卷第24期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 24 · 3031 ·