Page 81 - 《中国药房》2022年23期

concentration and liver function indexes of the patients were detected after 3 months of treatment and 3 months of intensive
treatment. RESULTS Before treatment， among 54 epileptic patients， 31 epileptic patients had low expression of SIRT1， and 23
had high expression of SIRT1. After 3 months of low-dose VPA treatment， within effective blood concentration of VPA， effective
control rate of patients in SIRT1 high-expression treatment group was significantly lower than SIRT1 low-expression treatment
group （P＜0.05）. After 3 months of intensive treatment， the effective control rate of patients SIRT1 high-expression intensive
treatment group was significantly higher than SIRT1 high expression treatment group （P＜0.05）. No abnormality was found in liver
function indexes during VPA treatment. CONCLUSIONS Epilepsy in patients with high expression of serum SIRT1 may be more
difficult to control when VPA is within the effective blood concentration range； when the VPA dose is effectively increased， the
effective control rate of epilepsy can be improved.
KEYWORDS Sirtuin-1； epilepsy； sodium valproate； blood concentration monitoring； liver function

癫痫是一种常见的神经系统疾病，全球约 5 000 万 剂盒（批号202011Q610001）购自常州百代生物科技股份
人患有癫痫，其发病率在神经科疾病中仅次于头痛，临 有限公司；全自动生化分析仪购自瑞士Roche公司。主要
床上治疗较为困难，且很难根治 [1―4] 。丙戊酸钠（sodium 试剂包括无水乙醇、异丙醇、氯仿、无酶无菌水等。
[5]
valproate，VPA）已被广泛用于癫痫的长期治疗 ，主要作 1.2 临床资料
用机制是阻断持续和快速的钠电流，限制神经元高频重 选择 2021 年 3－10 月贵州医科大学附属白云医院
复放电 [3，6] 。VPA用于癫痫失神发作、临床抑郁症、强直- （以下简称“我院”）就诊、出院后单独口服VPA治疗的54
阵挛性癫痫、青少年肌阵挛性癫痫和复杂部分性癫痫的 例癫痫患者（包括有过癫痫史或有明确癫痫诱因的癫痫
临床疗效较好 [7―8] 。在临床实践中发现，部分癫痫患者 患者）为研究对象，患者年龄 19～88 岁，男 42 例、女 12
VPA 血药浓度虽然在有效范围内，但无临床疗效，其原 例。另同期选择我院体检中心 50 例体检健康者作为基
因尚未明确。 线参考样本，年龄 18～89 岁，男 31 例、女 19 例。本研究
有研究发现，持续的癫痫发作会导致线粒体功能 的纳入标准为：（1）年龄≥18岁；（2）入院诊断为癫痫，诊
[9]
障碍，这可能是癫痫发作引起脑损伤的关键因素 。 断标准参考《临床诊疗指南·癫痫病分册（2015 修订
[5]
Sirtuin-1（SIRT1）是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 版）》 ；（3）出院后单独口服 VPA。本研究的排除标准
激活的去乙酰化酶，可参与衰老、能量代谢、炎症和肿瘤 为：（1）伴有其他恶性疾病者，如恶性肿瘤、白血病；（2）
[10]
等多种生理病理过程 。SIRT1在癫痫状态下能发挥内 肝功能不全者；（3）同时服用其他抗癫痫药物或采用其
源性神经保护作用，抵消癫痫持续状态后癫痫发作诱导 他手段治疗癫痫者。本研究方案已获得我院医学伦理
的神经元细胞损伤，并在癫痫持续状态下增强大鼠海马 委员会审核批准，批件号：2022伦审第（8）号。所有患者
体中的表达和活性 [11―12] 。有研究表明，SIRT1 对细胞内 均知情同意，并签署了知情同意书。
的代谢应激信号敏感，在癫痫发生早期迅速上调，且癫 2 方法
痫患者和动物脑组织中的 SIRT1 表达和活性增加与难 2.1 血清RNA的提取
治性癫痫发生密切相关 [13―14] 。因此，SIRT1 的高表达可 试验前准备 BIOG RNA 提取试剂盒中的洗涤液 A
能导致药物控制癫痫发作效果不佳。VPA 治疗癫痫的 和洗涤液B。取血清样本和RNA载体置于无RNA酶的
有效血药浓度为 50～100 μg/mL，VPA＜50 μg/mL 视为 EP 管中混匀，加入裂解液和消化液混合均匀，然后于
无效浓度，VPA＞100 μg/mL 视为中毒浓度 ，而 SIRT1 56 ℃水浴 10 min 至完全裂解，再加入无水乙醇，混匀。
[15]
高表达癫痫患者的VPA血药浓度的有效范围有待研究。 将吸附柱置于收集管中，取上述溶液转入吸附柱内，静
有研究表明，人脑组织中的 SIRT1 和血清中的 SIRT1 表 置 2 min，以 12 000 r/min 4 ℃离心 1 min（下同），弃收集
[16]
达相关联 。因此，本研究探讨了血清 SIRT1 表达对 管内废液。剩余溶液转移至吸附柱内，静置 2 min，离
VPA治疗癫痫患者疗效的影响，以期为临床合理用药提 心，弃收集管内废液。吸附柱放回收集管内，加洗涤液
供参考。 A 至吸附柱内，离心，弃收集管内废液。吸附柱放回收
1 材料与资料 集管内，加洗涤液 B 至吸附柱内，离心，弃收集管内废
1.1 主要仪器与试剂 液。将吸附柱放回收集管内，离心，弃残留的洗涤液。
DA-1型干式荧光免疫分析仪、FY-06型试剂卡孵育 取出吸附柱，放入新的无RNA酶的离心管内，再加入洗
器、VPA检测试剂盒（批号FFS092T）均购自北京丹大生 脱液，静置 3 min，离心，收集 RNA 溶液，于－80 ℃冰箱
®
物技术有限公司；Research plus 型手动移液器、吸头及 保存，待检测。
离心管均购自德国 Eppendorf 公司；Pico17 型高速离心 2.2 血清SIRT1 mRNA相对表达水平的检测
机购自美国Thermo Fisher Scientific公司；WiseMix VM-10 采用实时荧光定量 PCR 检测。提取血清 RNA 后，
型涡旋振荡器购自韩国Daihan公司；BIOG RNA提取试 逆转录成cDNA，以cDNA为模板，扩增产物行琼脂糖凝

中国药房 2022年第33卷第23期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 · 2887 ·